贵州省优秀科技教育人才省长资金项目([2010]40)
- 作品数：6 被引量：24H指数：3
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- 丹芪合剂和依那普利对糖尿病大鼠肾组织PTEN的影响被引量：2
- 2012年
- 目的研究丹芪合剂和依那普利对糖尿病(DM)大鼠肾组织第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源基因(PTEN)表达的影响,探讨丹芪合剂和依那普利治疗糖尿病肾病(DN)的作用及机制。方法将SD大鼠分成对照组、糖尿病组、丹芪合剂治疗组和依那普利治疗组(n=8)。尾静脉注射链脲菌素(STZ)复制糖尿病大鼠模型;12周处死大鼠,检测相应生化指标和计算肾脏指数;观察肾组织病理学改变;免疫组化和Western blotting检测肾组织PTEN、TGF-β1、p-AKT1(Ser473)和FN蛋白的表达;RT-PCR检测PTENmRNA的表达。结果丹芪合剂和依那普利能减轻DM大鼠肾脏肥大,显著改善肾功能,减轻DN肾脏病变及肾间质FN表达,下调TGF-β1和p-AKT1(Ser473)表达,上调PTEN蛋白和mRNA的表达。结论丹芪合剂和依那普利可能通过上调肾组织PTEN表达,抑制AKT1激活,减少FN的沉积,减轻或延缓了DN的病变。
- 王圆圆刘瑞霞郭兵肖瑛石明隽皮明婧文箐颍张国忠
- 关键词：磷酸化AKT丹芪合剂依那普利
- MG132对高糖条件下肾小管上皮细胞SnoN蛋白表达及纤维化效应的影响被引量：4
- 2015年
- 目的:观察蛋白酶体抑制剂MG132对高糖培养条件下肾小管上皮细胞核转录共抑制因子Sno N蛋白表达的影响,探讨MG132减轻高糖状态下肾小管纤维化病变的作用及可能机制。方法:将体外培养的NRK-52E细胞分为正常组(NG)、高糖组(HG)和不同浓度MG132预处理后高糖培养组(HG+MG132),采用免疫荧光双染的方法观察E-钙黏蛋白(E-cadherin)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)在肾小管上皮细胞中的表达和分布,用Western blotting方法检测Sno N、Samd泛素化调节因子2(Smurf2)、Arkadia、E-cadherin、α-SMA和Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)等目标蛋白的相对表达量。结果:与NG组相比,HG组肾小管上皮细胞E-cadherin和Sno N表达减少(P<0.05),而α-SMA、Col-Ⅰ、Smurf2和Arkadia表达增多(P<0.05);与HG组相比,不同浓度MG132预处理肾小管上皮细胞后高糖培养,可见肾小管上皮细胞中Sno N和E-cadherin蛋白表达显著上调(P<0.05),而α-SMA和Col-Ⅰ蛋白的表达显著下调(P<0.05),并且这种效应呈量效依赖性,但MG132预处理对Smurf2和Arkadia的表达无影响。结论:MG132可对抗高糖介导的肾小管上皮细胞的纤维化效应,其机制可能是通过减少Sno N蛋白的泛素化降解作用实现的。
- 石春花石明隽王圆圆刘丽荣张昌志李霜肖瑛严瑞郭兵
- 关键词：肾小管上皮细胞高糖MG132
- 胰岛素控制血糖对糖尿病大鼠肾组织Smad7表达及纤维化病变的影响被引量：9
- 2013年
- 目的:观察胰岛素控制糖尿病大鼠血糖后是否能上调肾组织Smad7的表达,减轻或延缓糖尿病肾病(DN)肾纤维化病变的发生发展。方法:链脲菌素复制大鼠糖尿病模型,随机分为糖尿病组(DM组)和胰岛素治疗组(INS组)(n=8);INS组于成模13周起用胰岛素将血糖控制在4～7 mmol/L;同时设正常对照组(NC组)(n=8)。17周处死大鼠,检测相应生化指标,观察胰腺和肾组织病理学改变,免疫组化和Western blotting检测各组大鼠肾组织组织转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)、Smad泛素化调节因子2(Smad ubiquitin regulatory factor 2,Smurf2)、Smad7、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、层连蛋白(fibronectin,FN)和胶原蛋白Ⅰ(collagenⅠ)的蛋白表达。结果:与NC组比较,DM组大鼠体重显著减轻,24 h尿蛋白、血糖和甘油三酯显著升高(P<0.05),病理检查显示胰岛被破坏,肾组织TGF-β1、Smurf2、α-SMA、FN和collagenⅠ蛋白的表达均显著增加(P<0.05),并伴有肾小管Smad7和E-cadherin的表达减少(P<0.05);而经胰岛素控制血糖后,INS组大鼠较DM组体重逐渐增加,24 h尿蛋白和血糖均显著降低(P<0.05),肾纤维化病变明显改善,TGF-β1、Smurf2、α-SMA、FN和collagenⅠ蛋白的表达均显著减少(P<0.05),Smad7和E-cadherin的表达显著上调(P<0.05)。结论:控制血糖能恢复糖尿病大鼠肾组织Smad7蛋白表达水平,减少细胞外基质的沉积,延缓DN的纤维化进展,其机制可能与肾组织中TGF-β1和Smurf2表达降低、Smad7蛋白的泛素化降解减少有关。
- 王圆圆李霜刘丽荣苏博石磊石明隽肖瑛张国忠郭兵
- 关键词：SMAD7胰岛素
- 中药复方对糖尿病大鼠肾小管PKC_α和ERK_(1/2)表达的影响被引量：4
- 2012年
- 目的观察自拟的中药复方对糖尿病(DM)大鼠肾小管蛋白激酶Cα(PKCα)和细胞外信号调节激酶(ERK1/2)表达的影响,探讨其防治糖尿病肾病(DN)的药理机制。方法雄性SD大鼠随机分为5组:正常对照组(N组),糖尿病组(D组),中药复方1号治疗组(Y1组),中药复方2号治疗组(Y2组),依那普利治疗组(E组)。尾静脉注射链脲佐菌素(55mg/kg)复制DM动物模型。实验12周时处死大鼠,生化方法测血糖、24h尿蛋白、血肌酐、甘油三酯、胆固醇;光镜观察肾组织的形态结构变化;免疫组化检测肾组织PKCα、TGF-β1、FN、ERK1/2蛋白表达情况;RT-PCR法检测大鼠肾皮质ERK2mRNA水平。结果 D组大鼠血糖、24 h尿蛋白、血肌酐、甘油三酯和胆固醇较N组显著升高,药物治疗组的24 h尿蛋白均较D组显著降低,Y1、Y2组的甘油三酯、胆固醇比D组显著降低,而Y1组和E组的血肌酐显著低于D组;D组大鼠出现明显的肾脏形态学异常改变,而Y1、Y2组和E组病变明显减轻;免疫组化结果显示,与N组相比,D组大鼠肾组织PKCα、ERK1/2、TGF-β1、FN表达显著增高,Y1、Y2组和E组较D组明显降低;RT-PCR结果显示D组大鼠肾皮质ERK2mRNA表达较N组显著增多,Y1、Y2组和E组ERK2mRNA的表达较D组均显著下调。结论中药复方和依那普利可能通过抑制PKCα-ERK1/2信号通路而下调TGF-β1的过度表达,使FN的生成减少,从而对糖尿病大鼠肾脏起保护作用。
- 孙兰刘瑞霞王圆圆肖瑛郭兵
- 关键词：蛋白激酶CΑ细胞外信号调节激酶中药复方
- 控制血糖对糖尿病大鼠肾PTEN表达及纤维化病变的影响被引量：3
- 2012年
- 目的:观察控制血糖前后糖尿病(DM)大鼠肾组织第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源基因(PTEN)表达变化,探讨PTEN与肾小管上皮细胞向间充质细胞的转化(EMT)的关系及控制血糖对PTEN表达及肾纤维化病变的影响。方法:SD大鼠随机分为正常对照组(N)、糖尿病组(DM)、胰岛素治疗组(DMA),尾静脉注射STZ复制DM模型,于成模13周起,DMA组大鼠采用胰岛素个体化治疗,以血糖控制在4～7 mmol/L,尿糖阴性为准,分别于16周和24周时处死各组大鼠。生化方法测血糖、血肌酐和24 h尿蛋白;观察肾脏病理改变;免疫组织化学和Western blotting检测各组大鼠肾组织PTEN、CollagenⅣ、FN、E-cadherin和α-SMA蛋白的表达;RT-PCR检测PTENmRNA的表达。结果:与N组相比,不同时间点DM组大鼠血糖、血肌酐、24 h尿蛋白明显增多(P<0.05),并出现肾组织纤维化改变;而DMA组大鼠血糖、血肌酐、24 h尿蛋白均显著低于DM组(P<0.05),肾纤维化病变明显改善;不同时间点的DM组大鼠肾组织PTEN蛋白和mRNA的表达均较N组明显减少(P<0.05),并伴有E-cadherin的表达减少(P<0.05),α-SMA表达增加(P<0.05),CollagenⅣ和FN蛋白的沉积增多(P<0.05);而与DM组相比,DMA组大鼠肾组织PTEN蛋白和mRNA表达均明显增加(P<0.05),且E-cadherin的表达增加(P<0.05),α-SMA表达减少(P<0.05),CollagenⅣ和FN在间质的沉积减少(P<0.05)。结论:控制血糖能上调肾小管上皮细胞PTEN的表达,同时能减少肾小管上皮细胞EMT及肾间质ECM沉积,改善肾纤维化病变。
- 李霜王圆圆文箐颍苏博肖瑛石明隽郭兵
- 关键词：血糖肾疾病
- SnoN对高糖诱导大鼠原代肾小管上皮细胞纤维连接蛋白合成的影响被引量：2
- 2011年
- 目的:观察核转录共抑制因子SnoN(Ski-related novel protein N)对高糖诱导大鼠原代肾小管上皮细胞(RTECs)纤维连接蛋白(FN)合成的影响。方法:原代培养大鼠RTECs,免疫荧光细胞化学和Western blot-ting检测培养细胞的上皮性钙黏蛋白、角蛋白-18和α-平滑肌肌动蛋白表达,鉴定培养细胞;正常糖(5.5 mmol/L)、高糖(25 mmol/L)和相同渗透压的甘露醇分别培养RTECs 30 min、2 h、12 h、24 h、48 h、72 h和96 h;SnoN siRNA转染RTECs,分为对照组、高糖组、control siRNA组和SnoN siRNA组;Western blotting和免疫细胞化学检测不同处理组RTECs中SnoN和FN蛋白的表达;RT-PCR检测FN mRNA。结果:与正常糖培养组相比,高糖刺激能抑制RTECs中SnoN蛋白表达,且呈时间依赖性;高糖刺激能使RTECs中FN蛋白和mRNA表达增加;与单纯高糖培养组相比,转染SnoN siRNA能进一步促进高糖诱导的RTECs中FN蛋白表达(P<0.05)。结论:SnoN表达减少参与了高糖诱导的RTECs中FN合成过程。
- 刘瑞霞郭兵王圆圆肖瑛石明隽张国忠
- 关键词：高糖肾小管上皮细胞SNON纤连蛋白类
