国家自然科学基金(81101222)
- 作品数：2 被引量：5H指数：1
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- c-Jun氨基末端激酶在单增李斯特菌感染形成炎症复合体中的作用
- 2019年
- 目的探讨c-Jun氨基末端激酶(JNK)在单增李斯特菌(LM)感染小鼠腹腔巨噬细胞过程中,对于炎症复合体活化与装配的作用,及其与毒力因子李斯特菌溶血素(LLO)的关系。方法将小鼠腹腔巨噬细胞随机分为SP处理组、未处理组及阴性对照组(NI),每组3个复孔。SP处理组用JNK抑制剂SP600125预处理小鼠腹腔巨噬细胞1 h,除NI外,其余各组巨噬细胞感染野生型LM(WT-LM)24 h,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测上清液中白细胞介素(IL)-18的表达;免疫荧光观察细胞内炎症复合体的关键蛋白组分ASC斑点(ASC-speck)的形成情况;Western blot检测WT-LM感染小鼠腹腔巨噬细胞不同时相点JNK的磷酸化水平。同时使用LM的△hly和△hly::hly突变株感染小鼠腹腔巨噬细胞,观察胞内ASC-speck的形成情况及不同时相点JNK蛋白的磷酸化水平。结果SP处理组IL-18的表达水平与未处理组相比明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),免疫荧光法发现SP处理组ASC-speck阳性的细胞百分比明显低于未处理组,差异有统计学意义(P<0.01)。Western blot结果显示p-JNK在WT-LM感染10 min时即明显升高,40 min时达到峰值,持续至少120 min。LM的突变株感染实验中,免疫荧光结果显示△hly感染组ASC-speck阳性细胞的百分比较WT-LM感染组明显降低,差异有统计学意义(P<0.01),而LLO重新表达的△hly::hly感染组,ASC-speck阳性细胞数得到明显恢复,与野生型LM组相比差异无统计学意义(P>0.05)。Western blot结果看到p-JNK在△hly突变株感染后40 min有显著表达,而在80 min和120 min后出现骤然减弱甚至消失。结论JNK信号通路参与调控LM感染过程中炎症复合体的活化,并且在JNK参与活化过程中,与LLO密切相关。
- 刘倩倩申艳娜
- 关键词：C-JUN氨基末端激酶白细胞介素-18
- Syk调控单增李斯特菌感染中炎症复合体的活化被引量：5
- 2014年
- 目的探讨脾源性酪氨酸激酶syk在单增李斯特菌(LM)感染小鼠腹腔巨噬细胞对炎症复合体形成过程中的作用。方法将小鼠腹腔巨噬细胞随机分为BAY处理组、SB处理组、WO处理组、未处理组以及阴性对照组(NI),每组设3个复孔。BAY处理组、SB处理组、WO处理组分别用syk抑制剂BAY117082、P38MAPK抑制剂SB203580以及PI3K抑制剂wotamine预处理小鼠腹腔巨噬细胞1 h,除阴性对照组外,各组巨噬细胞感染LM 24 h,ELISA检测上清液中白细胞介素(IL)-18表达;免疫荧光观察细胞内炎症复合体的关键蛋白组分ASC-speck的形成情况;Western blot检测LM感染小鼠腹腔巨噬细胞不同时相点syk的磷酸化水平。结果 BAY处理前后阴性对照组的小鼠腹腔巨噬细胞的IL-18表达水平无明显变化(P>0.05)。BAY处理组小鼠腹腔巨噬细胞感染LM后IL-18的表达水平与未处理组相比明显降低(P<0.05),而SB处理组和WO处理组、未处理组间小鼠腹腔巨噬细胞的IL-18表达水平差异无统计学意义(P>0.05),免疫荧光结果显示BAY处理组小鼠腹腔巨噬细胞内ASC-speck阳性的细胞百分比明显低于未处理组(P<0.01)。syk磷酸化水平在LM感染5、15、30 min时均明显升高。结论 syk介导的信号通路参与调控LM感染过程中炎症复合体的形成。
- 刘倩倩刘运德张琼李雪冯香梅刘晓春邸宝华申艳娜
- 关键词：白细胞介素18INTERLEUKIN-18
