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城市污泥改良沙地土壤过程中氮磷的淋溶特征与风险分析被引量：27: 2013年; 针对城市污泥组成成分的特点,以科尔沁沙地土壤为研究对象,分析其应用于沙地土壤改良的可行性及对地下水的潜在风险。室内土柱淋溶模拟试验研究结果表明,不同的污泥施入量可明显增加沙化土壤表层中氮磷养分含量,提高沙化土壤质量,同时污泥施用量对淋出液中氮磷养分含量存在显著影响,且氮素的淋溶风险大于磷素。当污泥施用量为30t/hm2时,淋出液中总氮(TN)、总磷(TP)含量与不施用污泥的对照处理间未存在显著差异,且随淋洗次数的增加,TN含量呈现先下降后趋于稳定的变化趋势,TP含量呈现逐渐下降,而硝态氮(NO3--N)含量较不施用污泥的对照处理增加11%～33%,但与其差异不显著(P>0.05)。当污泥施用量为60,90t/hm2时,淋洗液中TN和TP含量显著增加(P<0.01),随淋洗次数的增加,TN和NO3--N含量呈现先上升后趋于稳定的变化趋势,而NO3--N含量在第3次淋洗后均超出地表水环境质量标准中Ⅲ类水质标准限值(20mg/L),对地下水体污染风险增加。合理控制污泥施用量不仅可以实现城市污泥的资源化利用,同时也可控制其对地下水的影响。; 李霞李法云荣湘民范志平黄风尘张营程志辉; 关键词：城市污泥沙地土壤淋溶环境风险

改进MSAP-PCR技术应用于Cd胁迫下拟南芥DNA甲基化分析被引量：5: 2015年; 全基因组DNA甲基化分析是植物胁迫表观遗传损伤研究的主要方向之一,目前可用手段虽多,然而多数较繁琐,不利于表观遗传损伤的快速诊断。为此应用MSAP-PCR法研究Cd胁迫下拟南芥基因组甲基化变化,并通过优化实验条件、筛选引物(共5条,包括通用引物MLG2和本实验室设计引物AP-1、AP-2、AP-3、AP-4)以及检验多态性和敏感性,综合评估该方法在植物甲基化研究中的应用前景。研究结果发现:该方法模板量选择在150~250 ng并使用4%聚丙烯酰胺凝胶电泳(含50%尿素)分辨PCR产物多态性最佳;该方法对镉敏感性高,在0.2 mg·L-1Cd2+水平就可检测约30个位点的甲基化多态性;引物AP-4对Cp G位点甲基化变化最敏感,而AP-3对CHG位点甲基化变化敏感性最高。该方法操作简便、成本低廉、结果准确且敏感性高,可作为植物全基因组甲基化研究的理想方法,以及植物抗逆研究和环境污染早期诊断的生物胁迫标记物。; 王鹤潼何蕾宋杰孙梨宗崔伟娜台培东贾春云刘宛; 关键词：拟南芥生物标记物

植物位点特异性甲基化研究的引物设计及PCR体系优化被引量：2: 2016年; 通过设计大量引物,探索在植物甲基化引物设计中长、短引物的设计方法及其相应的PCR条件,同时比较不同Taq酶对甲基化率影响。结果表明：17~30 bp短引物适合使用Touch-down程序PCR,但特异性差、成功率低;31~50 bp长引物使用55℃退火60℃延伸的PCR条件成功率最高,其中反向引物的长度及Tm小于正向引物较佳;高保真酶因其3′→5′外切酶活性不宜用于甲基化研究,而Epi TaqTMHS在PCR结果中表现最佳。; 王鹤潼宋婕崔伟娜曹霞何蕾贾春云惠秀娟台培东成智博刘宛; 关键词：引物设计

铜胁迫对拟南芥幼苗生长和基因组DNA甲基化的影响被引量：9: 2015年; 通过Murashige and Skoog（M＆S）培养实验,利用甲基化敏感扩增多态性（methylation-sensitive amplified polymorphism,MSAP）技术研究Cu2＋胁迫对拟南芥幼苗基因组DNA甲基化水平与甲基化模式的变化,同时比较其与幼苗鲜重、根系生长对Cu2＋胁迫的敏感性。结果表明：0、0.25、1.0 mg獉L-1Cu2＋处理15 d后,幼苗根长及鲜重变化差异不显著,而幼苗基因组MSAP率随Cu2＋浓度的增加呈先增高后降低的趋势,分别为15.93%、16.28%和15.83%;高浓度Cu2＋胁迫下（3.0 mg獉L-1）,根长显著变短,鲜重显著降低,MSAP率为14.26%;Cu2＋胁迫（0.25~3.0 mg獉L-1）下,拟南芥幼苗基因组超甲基化（M型）位点及去甲基化（D型）位点数均呈显著增加趋势,Msp I酶较Hpa II酶对胁迫反应更敏感。因此,拟南芥幼苗MSAP变化对低浓度Cu2＋胁迫响应敏感,可作为Cu污染的早期诊断和生态风险评价。; 陈瑞娟何蕾孙梨宗王鹤潼宋婕刘宛; 关键词：DNA甲基化拟南芥 CU胁迫

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国家科技重大专项(2012ZX7505-001)