上海市卫生局科技发展基金(2008001)
- 作品数：5 被引量：17H指数：3
- 相关作者：陶敏芳王玉东胡云秋朱洁萍程蔚蔚更多>>
- 相关机构：上海交通大学附属第六人民医院中国福利会国际和平妇幼保健院复旦大学更多>>
- 发文基金：上海市卫生局科技发展基金上海市卫生局青年科研基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 围绝经期妇女骨密度与肌肉及脂肪含量的关系被引量：5
- 2009年
- 目的分析围绝经期妇女骨密度（BMD）与身体不同部位总肌肉含量（TLM）和总脂肪含量（TFM）的关系。方法选择围绝经期健康女性141名，采用双能X线吸收仪检测腰椎1—4（L1-4）及左侧髋部各部位包括股骨颈、大转子和全髋部的BMD、TLM和TFM，分析BMD与身体成分的相关性。结果逐步多元回归分析显示，L1-4、股骨颈、大转子和全髋部BMD与TLM均显著正相关（β值为0．261、0．284、0．388和0．335，P〈0．01），但与TFM均无相关性（P〉0．05）。结论围绝经期妇女腰椎及髋部各部位BMD与TLM呈显著正相关；加强运动，增加身体TLM，对预防骨质疏松具有重要作用。
- 朱洁萍陶敏芳胡伟伟胡云秋李淼章振林
- 关键词：围绝经期骨密度脂肪含量
- ERβ介导脱氢表雄酮对成骨细胞的选择性作用被引量：1
- 2011年
- 目的明确ERβ介导脱氢表雄酮（DHEA）对成骨细胞的选择性作用机制。方法构建ERβ沉默表达的pLVTHM—GFP／ERβ-shRNA质粒和ER[3高表达的pWPT-ERβ重组质粒，转染人成骨细胞系hMG63，使hMG63细胞中的ER[3沉默表达（命名为hMG63-shER[3细胞）和高表达（命名为hMG63-ERβ细胞），分别给予DHEA（1×10^-7mol／L）、加或不加入U0126、依托泊苷作用后，流式细胞仪检测细胞的增殖和凋亡情况；同时利用逆转录PCR技术检测DHEA对hMG63细胞雌激素受体亚型mRNA表达的影响。结果hMG63-ERβ和hMG63-shERβ细胞中ERβ基因的相对表达量分别比hMG63细胞升高7．39倍和降低为17％。DHEA对hMG63-shERβ、hMG63-ERβ和对照细胞hMG63细胞ER[3mRNA的表达有升调节作用，而对ERamRNA的表达无明显影响。与hMG63-shERβ细胞相比，DHEA能明显促进ER[3高表达时（即hMG63-ERβ细胞）和对照细胞hMG63的细胞增殖[增殖指数分别为（81．6±7．6）％、（75．0±5．3）％，P均〈0．05]并拮抗细胞的凋亡[凋亡率分别为（12．2±1．6）％、（14．6±1．5）％，P均〈0．01]，该作用可被U0126部分阻断[增殖指数分别为（33．2±2．0）％、（41．2±2．4）％，凋亡率分别为（40．5±4．3）％、（43．3±4．1）％，P均〈0．05]。结论优势表达的ERB是介导DHEA对成骨细胞选择性作用的主要受体。
- 王玉东郎虓陶敏芳程蔚蔚
- 关键词：去氢表雄酮雌激素受体Β成骨细胞
- β雌激素受体介导脱氢表雄酮对OPG/RANKL的升调节被引量：3
- 2012年
- 目的探讨β雌激素受体(ERβ)介导脱氢表雄酮(DHEA)对成骨细胞骨保护素/细胞核因子κB受体活化因子配体(OPG/RANKL)的调节作用。方法构建ERβ沉默表达(pLVTHM-GFP/ERβ-shRNA)和ERβ高表达(pWPT-ERβ)重组质粒,并转染人成骨细胞系hMG63,使hMG63的ERβ沉默表达(hMG63-shERβ)和高表达(hMG63-ERβ)。有或无U0126(丝裂原活化蛋白激酶信号途径中特异抑制分子)作用后,给予生理浓度(10-7mol.L-1)的DHEA作用24、48和72 h,ELISA和Western blot法分别检测hMG63培养上清中OPG和细胞中RANKL蛋白表达;Western blot法检测丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号途径中pERK1/2、JNK和p38分子的表达。结果给予DHEA作用48和72 h后,hMG63分泌的OPG明显增高(P<0.01),而RANKL表达无明显变化;与hMG63细胞相比较,在DHEA作用下hMG63-shERβ和hMG63-ERβ组的ERα表达无明显改变;而hMG63-ERβ细胞中ERβ表达增高,伴随着pERK1/2和OPG的升高(P<0.05,P<0.01);相反,hMG63-shERβ组ERβ表达减少并伴随pERK1/2和OPG分泌的降低(P<0.05)。另外,DHEA对pERK1/2和OPG的升调节可部分被U0126阻断。结论 ERβ可能通过激活pERK1/2-MAPK途径介导了DHEA对成骨细胞OPG/RANKL的调节。
- 王玉东陶敏芳王丽华黄勇万小平
- 关键词：脱氢表雄酮骨保护素破骨细胞分化因子ERΒ
- 双侧卵巢切除对围绝经期妇女骨密度及身体成分的影响被引量：7
- 2010年
- 目的探讨双侧卵巢切除术对围绝经期妇女骨密度、身体成分及性激素的影响。方法选择2009年1月1日—2009年12月31日期间在上海交通大学附属第六人民医院妇产科行双侧卵巢切除术的围绝经期患者33例(卵巢切除组),以同期更年期门诊自然绝经妇女35例为对照组,采用美国GE-Lunar-Prodigy双能X线骨密度检测仪和化学发光法检测两组妇女在闭经6和12个月时的骨密度、脂肪含量、肌肉含量及性激素。结果两组妇女在闭经后6和12个月时,骨密度、脂肪含量、肌肉含量比较差异均无统计学意义(P>0.05)。在闭经6个月时,卵巢切除组的雌二醇(E2)水平明显低于对照组[(14.79±22.17)U/Lvs(32.74±31.02U/L)](P<0.05);闭经后12个月时,卵巢切除组的E2和卵泡刺激素(FSH)水平与对照组比较差异均有统计学意义[E2:(8.09±4.38)U/Lvs(25.92±3.53)U/L;FSH:(64.88±18.39)U/Lvs(40.69±31.63)U/L](P<0.05)。结论围绝经期双侧卵巢切除后12个月内主要表现为E2和FSH改变,而E2水平的降低对骨密度、脂肪含量以及肌肉含量的影响并未显现。
- 陶敏芳戎融吴氢凯滕银成朱洁萍胡云秋
- 关键词：双侧卵巢切除术围绝经期雌激素身体成分
- β雌激素受体沉寂表达载体的构建及表达被引量：2
- 2010年
- 目的构建雌激素受体β(ERβ)亚型沉寂表达载体,并观察其转染成骨细胞后抑制ERβ基因表达的效果。方法参考人ERβ基因mRNA序列,设计、合成ERβ-shRNA的DNA Oligo后行PCR扩增,获得的shRNA双链DNA片段与pLVTHM-GFP质粒双酶切后连接,转化大肠杆菌E.coliDH5α感受态细胞。取鉴定正确的pLVTHM-GFP/ERβ-shRNA重组质粒转染人成骨hMG63细胞,实验分空白载体组、空白对照组和ERβ-siRNA组,转染48h后于倒置荧光显微镜下观察各组细胞的转染效果,并采用流式细胞术检测转染效率。抽提各组细胞的总RNA,经RT-PCR生成cDNA,Realtime-PCR检测ERβ基因的抑制效率。结果倒置荧光显微镜下观察显示,ERβ-siRNA组hMG63细胞90%以上呈现绿色荧光。流式细胞术检测ERβ-shRNA转染hMG63细胞的转染效率为92.3%。Realtime-PCR检测结果表明,ERβ-siRNA组ERβ表达量(0.17±0.01)仅约为空白载体组(1.00±0.01)的17.3%(P<0.001),ERβ-siRNA对hMG63细胞ERβ基因的抑制效率约为83%。结论成功建立了人ERβ沉寂表达的成骨细胞模型,慢病毒载体介导的ERβ-siRNA能有效抑制成骨细胞ERβ基因的表达,满足了研究成骨细胞中ERβ相关功能的需要。
- 孙旭妍陶敏芳程蔚蔚王玉东
- 关键词：成骨细胞雌激素受体Β
