河南省科技攻关计划(112102210299)
- 作品数：15 被引量：60H指数：5
- 相关作者：周晨妍付冠华高启禹王丹丹李端更多>>
- 相关机构：新乡医学院新乡医学院第一附属医院河南师范大学更多>>
- 发文基金：河南省科技攻关计划河南省教育厅自然科学基金河南省高等学校青年骨干教师资助计划项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生轻工技术与工程化学工程更多>>
- 木聚糖酶高产菌株Pichia pastoris G12摇瓶发酵工艺的优化
- 2012年
- 目的研究甲醇诱导的Pichia pastoris G12在摇瓶发酵条件下产木聚糖酶的表达规律。方法以木聚糖酶酶活力为评价指标,通过单因素试验和L9(34)正交试验考察确定摇瓶发酵条件下pH、接种时间、甲醇体积分数、诱导时间等因素对酶活力的影响。结果各因素影响程度依次为pH>甲醇体积分数>诱导时间>接种时间,最优表达条件为接种时间21 h,pH为5.5,甲醇诱导体积分数为1.50%,诱导时间为162 h。在此最优条件下培养菌株酶活力可达395.124 U.mL-1。结论该研究为木聚糖酶的工业化生产和应用提供了依据。
- 王丹丹张莉莉刘丹张艺严周晨妍
- 关键词：木聚糖酶毕赤酵母
- 纳米材料固定化酶的研究进展被引量：7
- 2013年
- 纳米材料在蛋白酶及核酶的固定化研究领域进展迅速,主要包括各种磁性纳米载体及非磁性纳米载体。目前在固定化纳米载体的特性、固定化方法及固定化效果上已进行了广泛探讨。综述以纳米载体的研究现状为基础,分析纳米载体固定化酶的应用前景及纳米载体固定对酶学性质的影响,并对该技术的研究进行介绍和展望。
- 高启禹徐光翠陈红丽周晨妍
- 关键词：纳米材料固定化酶磁性载体核酶
- 黑曲霉XZ-3S木聚糖酶Xyn ZF-1基因克隆和序列分析被引量：3
- 2012年
- 利用RT-PCR技术从黑曲霉XZ-3S中扩增并克隆了木聚糖酶(Xyn ZF-1)基因的cDNA片段,测序结果表明,Xyn ZF-1基因核苷酸序列阅读框全长678bp,编码225个氨基酸,推测分子量为24.06ku,等电点为5.20。以XZ-3S基因组DNA为模板扩增Xyn ZF-1的DNA序列,该序列仅存在一个内含子,长度为68bp。成熟肽基因推导的氨基酸序列与其他微生物来源的木聚糖酶一级结构进行比较,同源性最高达到了89.47%。系统进化树分析该酶属于G/11族糖基水解酶。又进一步对Xyn ZF-1二级结构进行了分析,并通过SWISS-MODEL预测了该酶的三维结构。
- 付冠华李端周晨妍
- 关键词：黑曲霉木聚糖酶基因克隆
- 木聚糖酶热稳定性分子改造的研究进展被引量：6
- 2014年
- 木聚糖酶广泛应用于食品加工、生物制药、酒的澄清及纸浆漂白等行业。热稳定性对于木聚糖酶在工业领域中的应用起着至关重要的作用。根据催化结构域的氨基酸组成不同,木聚糖酶主要分为F/10和G/11两大家族。本文主要就这两大家族木聚糖酶热稳定性分子改造的技术和方法作一综述,为进一步提高木聚糖酶的热稳定性提供参考。
- 李同彪周晨妍王丹丹
- 关键词：木聚糖酶热稳定性分子改造
- 明胶载体固定化木聚糖酶技术的研究被引量：3
- 2013年
- 以明胶为载体,戊二醛为交联剂,采用包埋-交联法制备固定化木聚糖酶,探讨明胶浓度、戊二醛体积分数、交联时间和固定化时间对固定化酶相对酶活力的影响。通过正交实验确定木聚糖酶的最佳固定化条件,比较固定化酶与其游离酶的最适反应温度、热稳定性、最适反应pH及pH稳定性。研究发现,在明胶浓度为15%、戊二醛体积分数为4%、交联时间为1h和固定化时间为3h时,固定化酶的回收率可达72.56%,同时固定化和游离酶的最适温度分别为50、60℃,最适pH分别为3.6、4.6,pH稳定性及热稳定性有显著提高。
- 高启禹徐光翠李永佳刘瑞周晨妍
- 关键词：木聚糖酶戊二醛固定化酶
- 高产木聚糖酶菌株选育研究进展被引量：1
- 2014年
- 木聚糖酶是木聚糖降解酶系中最关键的酶,主要以内切方式作用于木聚糖分子中的β-1,4-糖苷键。木聚糖酶主要由微生物产生,可表达于细菌、放线菌、真菌和酵母菌中,目前木聚糖酶在食品加工、纸浆漂白、饲料添加剂、工业乙醇的生产、生物转化等领域得到广泛应用,而不同来源木聚糖酶的性质存在较大差异,同时原料中木聚糖结构和加工工艺等因素均会影响木聚糖酶在工业中的应用效果。本文综述了木聚糖酶的作用机制、产木聚糖酶菌株的筛选培育及木聚糖酶基因的外源高效表达。
- 高启禹徐光翠张少丹周晨妍
- 关键词：木聚糖酶高产菌株诱变育种基因工程
- 酸性木聚糖酶固态发酵条件与粗酶性质研究
- 2012年
- 利用单因素和正交试验对实验室选育的黑曲霉XZ-3S（Aspergillus niger XZ-3S）菌株的发酵条件进行了研究。得到试验因素的产酶条件为天然原料麸皮与玉米芯的比例为5∶3,接种量1.0%（孢子悬液,孢子浓度5×107个/mL）,料水比例1∶1.7,培养基初始pH值为7.5,培养温度28℃、培养时间65h,其间翻曲2~3次,在上述条件下木聚糖酶的活力可达23612.38IU/g干曲。酶学性质初步研究显示,酶的最适反应温度和pH值分别为50℃和5.0,低于50℃、pH3.0~8.0酶稳定。
- 周晨妍刘振华郭伟云王燕李端
- 关键词：固态发酵木聚糖酶黑曲霉正交试验酶学性质
- 黑曲霉XZ-3S产木聚糖酶固态发酵条件的研究被引量：3
- 2013年
- 以木聚糖酶活性为评价指标,利用单因素试验和L9(34)正交试验考察摇瓶发酵条件下培养基组成及初始pH值、培养时间、培养温度、接种量等对木聚糖酶的影响。结果表明,培养基组成为(麸皮∶玉米芯=5∶3)、(NH4)2SO41.0%、KH2PO40.2%、CaCl20.1%、MgSO40.1%、聚山梨酯40 0.4%(均为相对于固体料的质量百分数)料水比例1 g∶1.7 mL;最优培养条件为三角瓶体积150 mL、接种量1.0%(孢子悬液,孢子浓度5×107个/mL)、pH值7.0、培养温度28℃、培养时间65 h,其间翻曲2～3次,在此工艺条件下,木聚糖酶的活性达27 638.71 IU/g。
- 周晨妍王燕周锋周克楠马雪亭付冠华
- 关键词：固态发酵木聚糖酶黑曲霉正交试验
- NLRP3在马兜铃酸致肾损伤小鼠肾脏组织中的表达及其意义被引量：2
- 2013年
- 目的:探讨核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)在马兜铃酸致肾损伤小鼠肾脏组织中的表达及意义,阐明NLRP3在马兜铃酸所致肾病发生发展过程中的作用。方法:64只雄性ICR小鼠随机分为对照组(16只)和马兜铃酸组(48只),马兜铃酸组小鼠给予50、100和200mg·kg-1马兜铃酸灌胃,每组16只。连续灌胃3d,于给药后第4和8天每组分别处死8只动物,收集尿液和血清,测定24h尿蛋白和血肌酐、尿素氮水平;ELISA法检测血清中白细胞介素1β(IL-1β)和白细胞介素18(IL-18)水平;荧光定量PCR检测肾组织中NLRP3mRNA的表达水平。结果:给药第4和8天,与对照组比较,马兜铃酸组小鼠24h尿蛋白、血肌酐和尿素氮均显著下降(P<0.05),其中200mg·kg-1马兜铃酸组小鼠在第7天全部死亡;与对照组比较,马兜铃酸组小鼠血清IL-1β和IL-18含量均显著升高(P<0.05),肾脏NLRP3的表达水平亦显著升高(P<0.05),且200mg·kg-1马兜铃酸组NLRP3表达水平显著高于50mg·kg-1马兜铃酸组(P<0.05)。结论:小鼠肾脏组织中NLRP3表达上调可能与马兜铃酸所致小鼠急性肾损伤的病理过程有关。
- 朱铁锤
- 关键词：马兜铃酸急性肾损伤细胞因子
- 木聚糖酶基因克隆和表达的研究进展被引量：4
- 2013年
- 半纤维素分解微生物在自然界的物质循环过程中起着重要作用,半纤维素是植物多糖的重要成分之一,而木聚糖则是半纤维素的主要成分。木聚糖酶(xylanase)可催化木聚糖的水解,在各种生物体内均发现木聚糖酶。在过去几十年中,已有上百种木聚糖酶基因被克隆至同源或异源宿主内来表达木聚糖酶,以期改变宿主特性并适于商业应用。本文综述了木聚糖酶基因的克隆和表达,并对基因工程技术在木聚糖酶上的应用前景进行了展望。
- 王丹丹周晨妍付冠华
- 关键词：木聚糖酶克隆基因表达
