国家自然科学基金(30801375)
- 作品数：5 被引量：23H指数：3
- 相关作者：宋海峰王清清付洁王啸林高新更多>>
- 相关机构：军事医学科学院广西医科大学沈阳药科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- siRNA体内递送研究进展被引量：5
- 2010年
- RNA干扰(RNA interference,RNAi),是一种在动植物中存在的通过双链RNA诱导同源特异性序列转录后基因沉默的过程。虽然小干扰RNA(siRNA)较单链反义寡核苷酸显示出更好的稳定性与基因沉默效果,但是作为新型的基因治疗药物,靶向递送siRNA是药物进入临床应用最主要的环节,siRNA体内有效作用发挥的关键在于它在体内能否高效递送至靶细胞并与靶基因结合。目前研究主要集中在siRNA的修饰方式与递送载体研究,以提高其体内的稳定性与靶向性。文中主要综述了siRNA的体内靶向递送障碍以及近几年siRNA非病毒递送载体脂质体、阳离子多聚物、纳米粒、胶束等方面的研究进展。
- 葛华王清清宋海峰付洁王东援
- 关键词：RNA干扰小干扰RNA
- 阳离子脂质体-小干扰RNA复合物的处方优化及其治疗前列腺癌的体外研究被引量：3
- 2014年
- 目的研究小干扰RNA(siRNA)的新型阳离子脂质体的制备,考察此脂质体-小干扰RNA复合物对LNCap细胞中靶mRNA的沉默效应。方法采用逆向蒸发法制备新型阳离子脂质体,并加入鱼精蛋白和小牛胸腺DNA以增加其对小干扰RNA的压缩,评价其理化性质;以LNCap细胞为模型,以lipofectamine 2000作为阳性对照,用RT-PCR方法研究脂质体-小干扰RNA复合物对前列腺癌细胞中靶基因Plk-1的沉默效应。结果制备的脂质体(2,3-二油氧基丙基)三甲基氯化铵胆固醇的最佳比例为3∶1,粒径为(117±4.3)nm,Zeta电位为(47±3.6)mV;新型阳离子脂质体小干扰RNA复合物的入胞效率显著提高,荧光显微镜显示LNCap细胞内小干扰RNA含量明显升高。结论本实验所制备的阳离子脂质体具有较高转染效率,脂质体-小干扰RNA复合物的沉默效果显著。此新型阳离子脂质体有望成为小干扰RNA等基因治疗药物的高效传递系统。
- 王啸林葛华王清清李淼高新付洁宋海峰
- 关键词：阳离子脂质体小干扰RNALNCAP前列腺癌
- 寡核苷酸药物定量分析方法的研究进展被引量：1
- 2011年
- 寡核苷酸作为治疗药物在抗肿瘤、病毒治疗、免疫调节等方面有着良好的应用前景。寡核苷酸药物的药代动力学的研究和质量控制均要求具备相应的定量分析方法。本文综述了近年来在寡核苷酸药物药代动力学评价及生产质量控制中常用的几种定量分析方法,主要包括质谱法、毛细管电泳法、定量PCR法以及杂交技术相关的方法,阐述了各方法的特点、应用前景及其最新研究进展。
- 李娜方珍文王啸林王清清宋海峰
- 关键词：寡核苷酸质谱法毛细管电泳法定量PCR法杂交技术
- 适配子介导siRNA靶向递送系统的研究进展被引量：8
- 2012年
- RNA干扰技术(RNAi)作为一种新型的基因治疗技术已应用到许多疾病的体外研究中,但靶向递送技术仍是目前制约小干扰RNA(siRNA)药物成功进入临床的关键技术问题。寡核苷酸适配子具有高亲和性、高靶向性,成为递送siRNA的重要手段。本文综述了siRNA体内递送的主要障碍,以及近年来适配子介导的siRNA靶向递送系统的最新研究进展。
- 王啸林王清清宋海峰
- 关键词：SIRNA适配子靶向药物递送
- 激光诱导荧光毛细管电泳法优化随机寡核苷酸文库聚合酶链反应扩增的条件被引量：6
- 2010年
- 寡核苷酸文库的聚合酶链反应(PCR)扩增是指数富集系统配基进化技术(SELEX)筛选适配子技术中的重要步骤。本研究采用毛细管电泳技术结合激光诱导荧光检测器(CE-LIF),通过对双链产物、PCR副产物以及剩余引物的考察,研究了寡核苷酸文库PCR扩增时的影响因素,并对其进行优化。结果表明,随机寡核苷酸文库的扩增与传统均一模板的扩增显著不同,其在扩增十几个循环时产物就达到最大值;此外,初始模板数、退火温度、DNA聚合酶浓度等条件也有所不同。因此,在进行SELEX筛选之前必须对文库PCR条件进行详细优化。本研究中N39文库优化后的PCR扩增条件为:初始模板的量为105个分子,DNA聚合酶浓度0.05U/μL,退火温度70℃,18个循环。本研究为利用SELEX技术有效筛选适配子,降低筛选的假阳性及提高特异性提供了参考依据。
- 季颖王清清付洁高新宋海峰
- 关键词：毛细管电泳聚合酶链式反应适配子
