江苏省自然科学基金(BK2002056)
- 作品数：11 被引量：25H指数：3
- 相关作者：曾水林李涛朱建宝雷志年王磊更多>>
- 相关机构：东南大学蚌埠市第三人民医院南京医科大学附属脑科医院更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 帕金森病大鼠黑质区神经干细胞分化的观察被引量：7
- 2007年
- 目的:探讨帕金森病(Parkinson’s disease,PD)大鼠中脑黑质区神经干细胞(NSCs)的分化情况。方法:将6-OHDA注入纹状体内制作PD大鼠模型。随机将成功模型分为3 d5、d7、d1、4 d2、8 d组,每组6只;另设假手术及正常对照组各3只。向成功模型鼠腹腔注射5-溴脱氧尿苷(Brdu)。用Brdu/NeuN、Br-du/GFAP、Brdu/TH免疫双标组织化学方法检测黑质区内源性NSCs向神经元、神经胶质细胞和多巴胺(DA)能神经元的分化情况。结果:PD模型7 d组,在黑质区Brdu+/GFAP+、Brdu+/NeuN+细胞开始出现,14 d组双标的阳性细胞数量逐渐增加,28 d达到高峰,14 d、28 d组与其它组比较差异显著(P<0.05)。在这些双标细胞中,Brdu+/GFAP+细胞数量较多,Brdu+/NeuN+细胞数量较少(P<0.05),未发现Brdu+/TH+细胞。结论:PD大鼠模型黑质区NSCs多数分化为神经胶质细胞,少数分化为神经元,在没有诱导和干预下,未见有向DA能神经元分化。
- 曾水林王磊朱建宝李涛刘卫国束汉生闫福麟
- 关键词：帕金森病神经干细胞分化黑质
- CEPO经Mash1信号促进大鼠局部脑缺血后纹状体内神经发生被引量：1
- 2009年
- 为检测氨甲酰化促红细胞生成素(CEPO)在大鼠脑缺血后发生过程中的作用及其相关信号通路,本实验将成年大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)后立即尾静脉给予CEPO(50μg/kg)。结果显示:CEPO可显著降低大鼠MCAO后3d梗塞面积,增加缺血侧神经干细胞增殖、促进神经干细胞分化成为神经元。CEPO的促神经发生效应与缺血侧纹状体内前神经元bHLH转录因子Mash1的表达上调密切相关。本结果提示CEPO对脑缺血具有神经保护作用,Mash1信号在缺血侧纹状体内可能介导CEPO增强的神经发生和神经元分化效应。
- 雷志年曾水林王磊朱建宝
- 关键词：脑缺血神经发生CEPO纹状体
- 神经干细胞联合胶质细胞源性神经营养因子脑内移植对Parkinson病大鼠纹状体内多巴胺含量的影响被引量：8
- 2006年
- 将原代培养的胚鼠(E14.5)腹侧中脑神经干细胞(NSCs)单独或联合胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)移植入Parkinson病(PD)大鼠纹状体内,术后各组动物存活一段时间,观察旋转行为后处死,取纹状体组织做高效液相色谱检测多巴胺(DA)含量。探讨NSCs单独或联合GDNF脑内移植对PD大鼠纹状体内DA含量的影响。结果显示:与PD模型相比,NSCs单独或联合GDNF脑内移植均能提高PD大鼠纹状体内的DA含量(P<0.05);在术后30d和60d,DA含量在GDNF+NSCs组的增加幅度比NSCs组更加明显,动物旋转行为亦得到明显改善(P<0.05)。上述结果表明,NSCs单独或联合GDNF移植均对PD大鼠有一定的治疗作用,而NSCs联合GDNF移植的治疗效果更好。
- 曾水林王磊雷志年朱建宝李涛闫福麟
- 关键词：神经干细胞PARKINSON病胶质细胞源性神经营养因子多巴胺纹状体
- 不同月龄大鼠脑室下区胶质细胞源性神经营养因子受体α_1的表达
- 2006年
- 目的:观察胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)受体α1(Glial cell line-derived growth factor recepterα1, GFR-α1)在1、3、8、12月龄大鼠脑室下区(SVZ)中的表达。方法:取不同月龄大鼠SVZ行冰冻切片,采用GFRα1多克隆抗体结合5′-BrdU单克隆抗体免疫组织化学单标与双标的方法染色。结果:在不同年龄大鼠SVZ可见GFR-α1、BrdU单标与双标细胞,但主要分布在SVZ前部的背外侧部分。随着年龄的增长,3种标记细胞的数量逐渐减少,且12月龄组的减少更明显。结论:GDNF可能通过GFR-α1参与调节哺乳动物脑内SVZ细胞的增殖和分化。随着年龄的增加,GFR-α1表达逐渐减少,SVZ细胞增殖、分化的能力亦减弱。
- 曾水林刘方舟杨宁雷志年王磊朱建宝李涛
- 关键词：脑室下区年龄
- Parthenolide抑制脑缺血后神经炎症并促进纹状体内神经发生被引量：3
- 2009年
- 目的:检测Parthenolide是否抑制脑缺血诱发的神经炎症及其分子机制。方法:MCAO大鼠腹腔注射parthenol-ide(500μg/kg),行BrdU、BrdU-DCX、BrdU-Tuj-1、BrdU-MAP-2、BrdU-GFAP免疫组化和Western blot检测缺血侧纹状体组织TNF-α表达水平。结果:脑缺血增加缺血侧纹状体内TNF-α表达水平,Parthenolide抑制TNF-α的表达并促进缺血侧纹状体内新生细胞的增殖。给予Parthenolide在脑缺血后3 d、7 d或28 d增加BrdU+-DCX+,BrdU+-Tuj-1+,and Br-dU+-MAP-2+阳性细胞数,同时减少BrdU+-GFAP+阳性细胞数。结论:Parthenolide抑制脑缺血诱发的神经炎症,促进非神经发生区-纹状体内神经发生。尚需在此模型上进一步阐明其分子作用机制。
- 雷志年曾水林王磊朱建宝李涛
- 关键词：脑中风神经炎症PARTHENOLIDE神经发生
- 神经干细胞联合胶质细胞源性神经营养因子脑内移植治疗帕金森病的实验研究被引量：2
- 2006年
- 目的:探讨胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)对脑内移植神经干细胞(neural stem cells,NSCs)的存活、分化及对帕金森病(Parkinsons’disease,PD)模型大鼠的治疗作用。方法:采用原代培养胚胎14.5天的胎鼠腹侧中脑NSCs,单独或经GDNF预处理后移植入PD模型大鼠的纹状体,观察NSCs在纹状体的分化情况,以及PD模型大鼠旋转行为的变化。结果:联合GDNF移植NSCs比单纯移植的NSCs较多的转化为多巴胺能神经元,并能够改善PD模型大鼠的旋转行为。结论:GDNF可以促进中脑来源的NSCs向多巴胺能神经元转化,并对PD模型大鼠有较好的治疗作用。
- 王磊曾水林朱建宝李涛
- 关键词：神经干细胞帕金森病大鼠胶质细胞源性神经营养因子多巴胺能神经元
- 胚胎大鼠腹侧中脑区域神经干细胞的培养及鉴定
- 2006年
- 目的:探讨胚胎大鼠腹侧中脑区域神经干细胞(neural stem cell,NSCs)的分离、培养、传代及鉴定的方法。方法:分离E14.5胚胎大鼠腹侧中脑组织,用机械吹打方法形成细胞悬液,接种到含有表皮生长因子(ep i-derm al growth factor,EGF)、碱性成纤维生长因子(fibrob last growth factor-basic,bFGF)、B27(B27 sup lem ent)的DMEM/F12(1∶1)的无血清培养液中培养,待形成原代克隆球后,用有限稀释法进行单细胞克隆和传代扩增,以获得大量来源相同的NSCs克隆球,并且进行B rdu和Nestin检测;然后取培养细胞诱导分化后行GFAP,NeuN,TH检测。结果:E14.5胚胎大鼠腹侧中脑组织细胞培养两周后可以形成较多的悬浮生长的神经球,经单细胞克隆和传代扩增后得到大量的同源细胞克隆球。经过B rdu和Nestin的免疫细胞化学检测90%以上的细胞呈阳性;诱导分化后细胞呈GFAP,NeuN阳性,少量细胞呈TH阳性。结论:从E14.5胚胎大鼠腹侧中脑组织分离得到的细胞具有不断增殖和自我更新的能力,是胚胎大鼠中枢神经系统的NSCs,并可以分化为TH阳性神经元。
- 王磊曾水林雷志年朱建宝李涛闫福麟
- 关键词：中脑
- 成年大鼠脑室下层细胞表达GFR-α_1的免疫组织化学研究被引量：1
- 2005年
- 观察胶质细胞源性神经营养因子受体-α1 (GFR -α1 )在成年大鼠脑室下层(SVZ)细胞的表达,探讨胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)对SVZ细胞的作用。成年大鼠SVZ组织冰冻切片,采用GFR -α1 结合5- 溴脱氧尿苷(BrdU)的免疫组织化学单标记与双标记方法,对成年大鼠SVZ进行观察。在成年大鼠SVZ可见GFR- α1 阳性细胞、BrdU阳性细胞和GFR- α1 /BrdU双标记细胞,且三种阳性细胞的分布趋势相似。结果提示GDNF可能参与调节成年哺乳动物脑内SVZ细胞的增殖、分化和迁移。
- 刘方舟杨宁雷志年曾水林李涛王磊
- 关键词：成年大鼠免疫组织化学胶质细胞源性神经营养因子
- GFR-α1在Parkinson病大鼠黑质区的表达被引量：1
- 2007年
- 本文观察了胶质细胞源性神经营养因子受体-α1(GFR-α1)在Parkinson病(PD)大鼠黑质区的表达变化。分别向大鼠左侧尾壳核和黑质致密部、中脑腹侧被盖区内注射6-羟基多巴胺(6-OHDA)建立部分损伤模型和完全损伤模型后,取大鼠黑质区脑组织作冰冻切片,行GFR-α1和TH免疫组织化学染色,用图像分析系统进行细胞计数。结果表明,在部分损伤组和完全损伤组中,GFR-α1在黑质区神经元及胶质细胞中均有表达,且部分损伤组GFR-α1阳性细胞的分布、数量随受损时程的不同出现差异。TH阳性神经元形态学改变,数量的变化与GFR-α1阳性细胞的分布、数量有着密切的关系。以上结果提示,GFR-α1的表达可能与脑内受损部位细胞的营养、修复、再生有关。
- 刘云龙杨宁曾水林刘方舟花菊兰李凤飞董博
- 关键词：PARKINSON病黑质免疫组织化学
- 帕金森病大鼠模型激发自体脑内神经干细胞增殖的实验研究被引量：8
- 2004年
- 目的 研究帕金森病 (Parkinson’sdisease ,PD)大鼠激发自体脑内神经干细胞的增殖情况。方法 选用SD大鼠 ,将 6 羟多巴胺 (6 OHDA)注入纹状体内制作PD大鼠模型 ,假手术对照组注入等量生理盐水 ,于不同时间点处死大鼠。处死前均注射 5 溴脱氧尿苷 (Brdu)。免疫组织化学方法动态检测Brdu和巢蛋白 (Nestin)的表达 ,以确定脑内增殖细胞和神经前体细胞数量 ,Brdu/Nestin免疫双标确定脑内神经干细胞的增殖情况。结果 同正常组、假手术对照组比较 ,PD大鼠损伤侧海马区、侧脑室室管膜下区和黑质区的Brdu+ 细胞、Nestin+ 细胞和Brdu+ /Nestin+ 细胞数在模型成功后的第 3、5、7天明显增加 ,14d后逐渐减少 ,2 8d后恢复到正常水平。结论 6 OHDA纹状体内注射制作PD的模型大鼠能够激活自体神经干细胞增殖。
- 王磊曾水林李涛朱建宝雷志年韩洋
- 关键词：脑内自体大鼠模型神经干细胞增殖帕金森病6-OHDA
