国家自然科学基金(30801366)
- 作品数：4 被引量：9H指数：2
- 相关作者：胡明冬周长喜徐剑铖杨昱杨丽更多>>
- 相关机构：第三军医大学新桥医院中国人民解放军总医院第三军医大学第二附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- JAB1对缺氧环境肺癌A549细胞化疗敏感性调控的研究被引量：2
- 2012年
- 目的观察导入pcDNA3.1-HRE-JAB1真核表达质粒的肺癌A549细胞,在低氧环境下对健择(Gemzar)的化疗敏感性,以期找到一种提高肺癌化疗敏感性的方法。方法首先构建缺氧反应元件启动的pcDNA3.1-HRE-JAB1真核表达质粒,鉴定后将该质粒导入肺癌A549细胞。在低氧环境培养过程中加入化疗药物Gemzar,观察空白组(A549)、空载体组(A549+pcD-NA3.1-HRE)和质粒组(A549+pcDNA3.1-HRE-JAB1)肺癌A549细胞对Gemzar的敏感性。采用Real-time PCR和Westernblot分别检测各组肺癌A549细胞中JAB1的mRNA和蛋白表达水平;流式细胞术检测各组肺癌A549细胞周期分布和凋亡情况。结果通过双酶切鉴定,确定构建获得了pcDNA3.1-HRE-JAB1质粒。在有化疗药物Gemzar的情况下,质粒组分别与空白组或空载体组比较,质粒组肺癌A549细胞中JAB1mRNA和蛋白表达水平明显增加(P<0.01),细胞凋亡率明显增加(P<0.01),而细胞周期被明显阻滞于G1期(P<0.01)。结论 JAB1在低氧环境下高表达提高了药物Gemzar化疗的敏感性,这将可能成为一种理想的提高肺癌或其他实体恶性肿瘤化疗敏感性的手段。
- 胡明冬徐剑铖杨昱徐静周长喜毛梅王艺
- 关键词：A549细胞JAB1健择化疗敏感性
- JAB1过表达增加人肺腺癌细胞对化疗的敏感性
- 2011年
- 目的通过探讨缺氧诱导因子1(HRE-1)启动子诱导JAB1过表达致人肺腺癌细胞(A549)对化疗敏感性的增加程度,来找到提高肺癌缺氧区肿瘤细胞对化疗敏感性的方法,最终达到逆转肺癌化疗耐药的目的。方法首先成功构建缺氧反应元件启动子所驱动的pUC57-HRE-JAB1真核表达质粒。随后,将该质粒导入A549细胞,化疗药物顺铂(C-DDP)也同时加入处理A549细胞。采用RFPCR和Western blot分别检测转染后A549中JAB1的mRNA和蛋白表达水平。采用流式细胞术检测经pUC57-HRE-JAB1质粒转染后A549细胞周期和凋亡的改变。结果较空白对照组和空载体组,经pUC57-HRE-JAB1真核表达质粒转染后,A549细胞中JAB1的表达明显增加(P<0.05)。同时,细胞周期被阻滞于G1期,并且转染后顺铂所诱导的细胞凋亡率较单纯顺铂处理明显增加(P<0.01)。更为重要的是,pUC57-HRE-JAB1导入增加了A549细胞对C-DDP的敏感性。结论缺氧诱导因子1启动子所诱导的JAB1过表达增加了肺癌细胞的化疗敏感性,为逆转肺癌化疗耐药提供了一种可行的治疗策略。
- 胡明冬周长喜杨昱徐剑铖李琦
- 关键词：缺氧诱导因子JAB1耐药顺铂
- 晚发性老年支气管哮喘被引量：4
- 2012年
- 老年支气管哮喘（简称哮喘）分为广义和狭义哮喘，广义的老年哮喘为年龄在60岁及其以上，符合支气管哮喘诊断标准的所有患者。而狭义的老年哮喘为60岁及其以上新发生的哮喘（称晚发老年哮喘）。老年期是继青少年期后的第二个哮喘发病高峰期。由于老年人生理功能的衰退和对药物的药代动力学和耐受性的差异，老年哮喘在诊断和治疗上存在很多特殊性。故哮喘患者的并发症多、对气流阻塞的感觉迟钝，老年哮喘的误诊率、漏诊率高，治疗效果差，与年轻人比较，老年哮喘的死亡率显著增高，积极正确地进行治疗将至关重要。因此本文从晚发性老年支气管哮喘流行病学、临床表现、发病原因、诊断、鉴别诊断、临床治疗和危险因素及干预措施等几方面的特殊性进行阐述，以提高对晚发性老年哮喘的认识。
- 胡明冬王关嵩
- 关键词：老年支气管哮喘晚发性晚发老年哮喘哮喘患者发病高峰期药代动力学
- miR-202调控GLI-2干预肺癌A549细胞的增殖和凋亡被引量：3
- 2016年
- 目的探讨miR-202对肺癌A549细胞增殖和凋亡的调控作用及其相关机制。方法培养肺腺癌A549细胞和肺正常上皮BEAS-2B细胞,利用Real time-PCR检测miR-202在上述细胞中的表达水平;合成并将miR-202 minic和miR-NC转染进入A549细胞后,应用MTT检测12、24、48 h时细胞的抑制率,使用流式细胞术检测转染后48 h细胞的凋亡情况,利用western blot检测GLI-2蛋白的表达情况;构建野生型和突变型GLI-2 3'UTR插入p MIR-REPORTTMluciferase vector载体,并将其与pRL-TK质粒共转染进入A549细胞,之后分别将等量的pre-miR-202和miR-NC再转染进入A549细胞,利用双荧光素酶报告基因检测试剂盒检测萤火虫和海肾荧光素酶活性。结果 miR-202在A549细胞中的相对表达量显著低于在BEAS-2B细胞中的表达量(P<0.01);miR-202 minic组在12、24、48和72 h的细胞抑制率显著高于对照组和miR-NC组(P<0.01);miR-NC组在72 h时细胞抑制率显著高于对照组(P<0.01)。此外,miR-202 minic组细胞凋亡率显著高于miR-NC和对照组(P<0.01),并且miR-NC组的细胞凋亡率显著高于对照组(P<0.01)。荧光素酶报告基因结果说明GLI-2是miR-202的靶基因。miR-202minc转染A549细胞后可显著降低GLI-2蛋白的表达,而miR-NC组与对照组相比较,GLI-2蛋白表达无显著差异。结论 miR-202通过下游靶基因GLI-2调控肺癌A549细胞的增殖和凋亡,其可作为治疗肺癌的潜在靶点。
- 杨丽王霞杨永静罗莉李长桂孙晓容胡明冬
- 关键词：支气管肺癌细胞增殖细胞凋亡
