国家自然科学基金(30671001) 作品数:10 被引量:20 H指数:3 相关作者: 杨金奎 郭丽敏 史婷婷 林珊珊 张雪莲 更多>> 相关机构: 首都医科大学 北京石景山医院 北京市普仁医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
大鼠ACE2腺病毒载体的构建及其在INS-1细胞中的表达 被引量:3 2009年 目的构建携带大鼠血管紧张素转化酶2(angiotensin-converting enzyme 2,ACE2)基因的重组腺病毒表达载体并确定其对INS-1细胞的感染效率。方法采用RT-PCR方法,从大鼠肾脏组织中扩增出ACE2基因的全长cDNA序列,将ACE2基因定向克隆到穿梭质粒载体pShuttle-GFP-CMV,经与腺病毒骨架质粒pAdxsi载体同源重组后得到携带大鼠ACE2基因的重组腺病毒(pAdxsi-GFP-CMV-ACE2),采用PCR的方法对重组腺病毒进行鉴定,转染HEK293细胞进行包装和扩增,氯化铯密度梯度离心法纯化,半数组织培养感染剂量(50%tissue culture infective dose,TCID50)方法测定重组腺病毒的滴度。体外转染INS-1细胞,绿色荧光观察绿色荧光蛋白(GFP)和Western blotting检测ACE2蛋白的表达。结果克隆得到大鼠ACE2基因,经PCR鉴定和测序证实结果正确,成功构建得到高滴度的重组腺病毒,并能高效感染INS-1细胞。结论成功构建了表达ACE2的复制缺陷型重组腺病毒,为深入研究ACE2基因在胰岛细胞中的生物学功能提供了一定的工作基础。 方红娟 杨金奎关键词:血管紧张素转化酶2 腺病毒载体 INS-1细胞 血管紧张素1-7抑制剂对糖代谢的影响 被引量:1 2009年 目的研究血管紧张素1-7Ang(1-7)的抑制剂A779对胰岛功能及其他代谢指标的影响从而为研究Ang(1-7)在糖尿病及其合并症中的作用提供新的思路。方法对c57bl/6小鼠置入皮下泵持续给予A779干预,干预结束后行腹腔糖耐量试验、胰岛素耐量试验及胰岛素水平测定评价干预对糖代谢的影响,并测定血压、血脂及血管紧张素Ⅱ的水平,评价干预对其他代谢指标的影响。结果A779干预组的空腹胰岛素水平明显高于对照组,差异有统计学意义;胰岛素抵抗指数和胰岛素分泌指数明显高于对照组,差异有统计学意义。结论A779对糖耐量及胰岛素基础分泌产生负面影响,提示Ang(1-7)可能对胰岛功能具有保护作用。 史婷婷 马亚红 杨金奎关键词:血管紧张素转化酶2 血管紧张素1-7 胰岛功能 血管紧张素转化酶2-血管紧张素1-7-Mas轴的研究进展 被引量:3 2009年 经典的肾素血管紧张素系统在维持动脉血压平衡,水电解质平衡,调节细胞增生及分化中起着重要的作用。血管转化酶2,血管紧张素1-7的受体Mas等新成员的发现使人们对这一系统的认识进一步深化。血管紧张素1-7,及其在体内主要的合成酶ACE2,和受体Mas组成的调节轴可产生广泛的生理学效应,拮抗血管转化酶-血管紧张素Ⅱ-AT1受体调节轴的效应,从而为高血压,心衰等心血管疾病和肾脏,肝脏等系统疾病的药物治疗提供新的思路和方法。 史婷婷 杨金奎关键词:血管紧张素转化酶2 血管紧张素1-7 血管紧张素转化酶相关性羧肽酶在人及啮齿动物胰腺的表达 被引量:2 2007年 目的近几年发现的血管紧张素转化酶相关性羧肽酶(ACE2),是血管紧张素转化酶(ACE)的相关酶,新近被证实是SARS相关冠状病毒的一个功能性受体。我们的先前实验发现SARS患者的血糖水平比对照组显著升高,提示SARS冠状病毒可能侵袭胰腺并导致胰腺损伤。本文研究ACE2在人、大鼠和小鼠内外分泌腺的表达,为探讨糖尿病及SARS病毒感染后血糖升高的机制提供依据。方法通过免疫组化的方法检测ACE2在人、大鼠和小鼠胰腺的表达。分别提取人和大鼠胰腺组织的RNA,通过RT-PCR的方法检测ACE2在人、大鼠的表达。结果免疫组化:ACE2在人、大鼠、小鼠的胰腺内外分泌腺均有表达,ACE2在内分泌腺的表达均强于外分泌腺。RT-PCR:在人和大鼠的胰腺RNA经逆转录后均扩增出ACE2基因片段,提示ACE2在人和大鼠胰腺中均有表达。结论ACE2在胰腺内分泌腺表达,提示SARS病毒能通过胰岛细胞膜上的ACE2受体侵入胰岛细胞,引起胰岛细胞损伤。 季秀娟 徐剑 张雪莲 郭丽敏 杨金奎肾素-血管紧张素系统与糖尿病 被引量:2 2009年 肾素-血管紧张素系统(RAS)在糖尿病的发生、发展中有重要作用。今年的国际糖尿病联盟(IDF)第20次学术会议专题报道了糖尿病人群的RAS系统。简而言之,最有效的延缓糖尿病。肾病进展的途径是阻滞RAS。大量临床研究也已经证实了阻滞RAS治疗糖尿病肾病的疗效。肾素抑制途径的研究,为防治肾损害提供了一个新的治疗方向。 杨金奎关键词:肾素-血管紧张素系统 糖尿病 糖尿病肾病 肾素抑制剂 血管紧张素转换酶2-血管紧张素1—7-Mas轴的心血管效应 2009年 经典的肾素-血管紧张素系统在维持动脉血压平衡,水电解质平衡,调节细胞增殖及分化中起着重要的作用。血管紧张素1—7及其在体内主要的合成酶血管紧张素转换酶2,及其受体Mas组成的调节轴可产生广泛的生理及病理生理学效应。此轴可拮抗血管紧张素转换酶-血管紧张素Ⅱ-血管紧张素Ⅱ1型受体凋节轴的效应,从而为高血压、心力衰竭等心血管疾病及其他系统疾病的药物治疗提供新的思路和方法。 史婷婷 杨金奎关键词:血管紧张素转换酶2 MAS受体 ACE2在小鼠胰腺组织中的表达 被引量:2 2010年 目的检测SARS冠状病毒(SARS-CoV)S蛋白的功能性受体血管紧张素转换酶2(ACE2)在小鼠胰腺内、外分泌腺的表达。方法①RT-PCR:麻醉小鼠后取胰腺和肺组织,采用RT-PCR方法检测各组织ACE2的表达。②免疫电镜:麻醉小鼠后取胰尾,采用免疫电镜方法检测胰腺组织ACE2的表达。结果胰腺和肺脏组织均表达ACE2mRNA,且胰腺内、外分泌腺均表达ACE2。结论 ACE2在小鼠胰腺内、外分泌腺的表达可介导SARS-CoV侵入并损害胰腺,使胰岛素耗竭。 郭丽敏 王夏涟 林珊珊 杨金奎关键词:血管紧张素转换酶2 SARS冠状病毒 S蛋白 胰腺 单基因变异与中国北方汉族2型糖尿病遗传易感性研究 2012年 目的在东亚和西非人群中分别进行的全基因组关联研究筛查出KCNQ1基因的rs2237892,AP3S1基因的rs3756555,MAN2A1基因的rs2015698为2型糖尿病易感位点,ALDH7A1基因rs2306617则与肥胖存在关联,而这些位点的作用尚未在中国北方汉族人群中进行探讨,本研究的目的是在中国北方汉族2型糖尿病患者中对这些可能的易感位点进行复制研究。方法应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱对KCNQ1基因的rs2237892,AP3S1基因的rs3756555,MAN2A1基因的rs2015698,ALDH7A1基因的rs2306617在无血缘关系的537名2型糖尿病患者和510名对照者中进行基因分型。结果 rs2237892和rs3756555位点的C等位基因显著增加2型糖尿病遗传易感性(P=0.002,P=0.003)。该显著性关联在调整年龄、性别和体质量指数(body mass index,BMI)后仍然存在(OR=1.51,95%CI:1.17~1.95,P=0.002;OR=1.48,95%CI:1.14~1.92,P=0.003)。未能发现rs2015698和rs2306617与2型糖尿病存在关联。通过对对照人群研究发现,调整年龄、性别和BMI后,rs2237892位点CC基因型空腹血糖显著高于其他2基因型(P=0.020);与其他两基因型相比,rs3756555位点CC基因型BMI略有降低(P=0.050)。结论 KCNQ1基因和AP3S1基因遗传变异与中国北方汉族2型糖尿病遗传易感性相关。 周建博 信中 冯建萍 杨金奎关键词:2型糖尿病 KCNQ1 空腹血糖 血管紧张素转换酶2在鼠胰腺组织中的表达 被引量:5 2010年 目的:检测SARS冠状病毒(SARS-CoV)S蛋白的功能性受体血管紧张素转换酶2(ACE2)在大小鼠胰腺内、外分泌腺的表达。方法:(1)免疫组化:取大鼠8种内脏组织,采用免疫组化方法检测各组织ACE2的表达。(2)免疫电镜:取小鼠胰尾,采用免疫电镜方法检测胰腺组织ACE2的表达。结果:ACE2在胰腺内、外分泌腺均有表达,且胰腺外分泌腺ACE2阳性细胞的吸光度值较内分泌腺显著增加(P<0.01)。结论:ACE2在大小鼠胰腺内、外分泌腺的表达可介导SARS-CoV侵入并损害胰腺,使胰岛素耗竭,血糖升高。 郭丽敏 林珊珊 杨金奎关键词:血管紧张素转换酶2 SARS冠状病毒 S蛋白 胰腺 血管紧张素转换酶2在大鼠胰腺组织中的表达 被引量:4 2007年 目的检测SARS冠状病毒(SARS-CoV)S蛋白的功能性受体血管紧张素转换酶2(ACE2)在大鼠内脏尤其在胰腺内、外分泌腺的表达。方法麻醉Wistar大鼠后取胰、肺、肝、肾、心、肠、膀胱和脾8种组织,采用免疫组化和RT-PCR方法检测各组织ACE2的表达。结果ACE2在组织中均有不同程度的表达,其中胰腺外分泌腺ACE2阳性细胞的吸光度值较内分泌腺显著增加(P<0.01)。结论ACE2在大鼠胰腺内、外分泌腺的表达可介导SARS-CoV侵入并损害胰腺,使胰岛素耗竭,引起血糖水平升高;同时ACE2在内脏组织的普遍表达为SARS-CoV的入侵提供了可能。 郭丽敏 张雪莲 杨金奎关键词:血管紧张素转换酶2 SARS冠状病毒 S蛋白 胰腺