国家重点基础研究发展计划(2009CB522407)
- 作品数：17 被引量：23H指数：3
- 相关作者：周鸿敏徐洪来雒真龙杨超何文涛更多>>
- 相关机构：华中科技大学西安交通大学医学院第一附属医院柳州市人民医院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金广西卫生厅科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- TCDD激活芳香烃受体减轻小鼠肾脏缺血再灌注损伤
- 2013年
- 目的论证2,3,7,8-四氯联苯对二恶英(2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin,TCDD)激活芳香烃受体(arylhydrocarbon receptor,AHR)在小鼠肾脏缺血再灌注损伤(ischemia-reperfusion injury,IRI)中的保护作用并探讨其机制。方法建立C57BL/6小鼠肾脏缺血再灌注损伤模型,设TCDD治疗组(术前24h腹腔注射TCDD 0.5μg/只)及PBS对照组(术前24h腹腔注射PBS 200μL/只),另设假手术组及正常组。观察各治疗组模型的生存时间,评估其病理变化并评分,检测外周血肌酐、尿素氮浓度。体外实验观察TCDD对初始型T细胞(naive T细胞)定向分化为调节性T细胞(Treg细胞)的影响。流式细胞技术检测IRI模型小鼠脾脏、外周血中Treg细胞的比例。结果与PBS对照组相比,TCDD治疗组小鼠生存时间明显延长,肾功能(血肌酐和尿素氮)明显改善(均P<0.05)。TCDD治疗组肾脏病理变化明显减轻,评分优于PBS对照组(P<0.05)。体外实验中TCDD的干预明显提升了Treg细胞的比例(P<0.05),而在IRI模型中TCDD激活AHR也显著提升了脾脏以及外周血中Treg细胞比例(P<0.05)。结论 TCDD激活AHR明显改善小鼠肾脏缺血再灌注损伤模型的肾功能,机制可能与TCDD选择性诱导Treg细胞亚群的扩增有关。
- 蔡兰军余道武高义杨超周鸿敏陈忠华
- 关键词：芳香烃受体缺血再灌注损伤调节性T细胞
- CD_(22)分子机制的研究进展被引量：2
- 2015年
- CD22为Ⅰ型跨膜糖蛋白,是唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素家族成员。作为B细胞受体(BCR)的抑制性共受体,CD22对B细胞激活信号具有负性调节作用。CD22能够与包含α-2,6连接唾液酸的糖蛋白配体特异性结合,抗原激活BCR,也使CD22胞质区免疫受体酪氨酸抑制基序中的酪氨酸迅速磷酸化,并激活下游信号分子抑制钙离子内流而减弱BCR信号。CD22参与B细胞的归巢过程。因CD22相对特异地表达于B细胞表面,已成为调节B细胞免疫及治疗某些B细胞肿瘤的良好靶标。
- 徐洪来肖敏刘强潘光栋陈忠华
- 关键词：CD22唾液酸归巢靶向治疗
- Galectin-7在人和鼠同种异体心脏移植物中的表达及其意义被引量：1
- 2013年
- 目的:通过检测发生急性排斥反应的小鼠及人移植心脏的galectin-7表达,进而分析galectin-7在急排发生过程中的作用。方法:建立小鼠心脏移植模型,分为鼠急排组和鼠对照组。Western blot法和免疫组化法检测小鼠移植心脏galectin-7的表达情况。选择15例心脏移植急排患者(人急排组)和10例正常人(人对照组),免疫组化法检测心肌组织galectin-7的表达。结果:鼠急排组galectin-7表达明显高于鼠对照组(1.34±0.18,0.77±0.03,P<0.01)。人急排组心脏galectin-7表达明显高于人对照组,且galectin-7主要定位于人急排心脏的浸润淋巴细胞及血管内皮细胞。结论:Galectin-7与人和鼠同种异体心脏移植急性排斥反应有相关性。
- 雒真龙周鸿敏黄霞方静徐洪来高义杨超潘铁成陈忠华
- 关键词：急性排斥反应心脏移植
- 应用PPIN分析肝移植临床耐受患者PBMC基因表达特点
- 2013年
- 应用生物信息学方法分析肝移植临床耐受患者PBMC基因表达特征,筛选临床耐受关键基因。从GEO数据库获取19个肝移植临床耐受病例及22个非临床耐受病例基因表达谱数据。应用DAVID网络软件进行差异基因功能注释与聚类分析;通过Cytoscape软件的MiMI插件构建蛋白质相互作用网络(PPIN)筛选肝移植临床耐受关键基因。差异基因涉及蛋白质及RNA代谢、免疫应答、膜结构调节等复杂生物过程。PPIN网络分析获得10个临床耐受核心基因。我们的研究表明:肝移植临床耐受涉及外周血免疫细胞复杂的基因表达调控机制及蛋白质间相互作用;RNA的转录后加工及蛋白质降解在免疫耐受的形成中发挥了重要作用;RBM8A、DHX9、CBL、IKBKB、CSNK2A1、HSPA8等核心基因发挥重要的免疫调节功能。
- 徐洪来肖敏杨超高义雒真龙周鸿敏陈忠华
- 关键词：肝移植基因表达谱蛋白质相互作用网络
- 肝、肾移植受者外周血基因表达差异分析被引量：3
- 2013年
- 目的探讨肝移植与肾移植受者外周血免疫细胞基因表达差异。方法从GEO数据库获取27个肝移植受者及25个肾移植受者外周血的基因芯片表达谱数据。应用GSEA软件进行基因集富集分析,应用Cytoscape软件对差异基因进行生物网络分析,获得肝、肾移植相关核心基因。结果 GSEA分析筛选出肝、肾移植领头亚群高重叠基因各20个。差异基因生物网络分析,筛选出肝、肾移植相关中心蛋白质(基因)数目分别为14及13;结合GSEA及生物网络分析结果,获得核心基因各5个。结论外周血免疫细胞的转录、翻译调节机制在肝移植免疫调节中发挥了更重要的作用,而在肾移植信号蛋白质的相互作用网络发挥了主要的免疫调控功能;免疫细胞的能量代谢与免疫调控存在密切关系;外周血肝、肾移植核心基因发挥了重要的免疫调节功能。
- 徐洪来肖敏杨超高义雒真龙周鸿敏陈忠华
- 关键词：肝移植肾移植基因表达谱生物网络
- 肥大细胞体外诱生CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T细胞的作用
- 2009年
- 探索小鼠骨髓源性肥大细胞能否在体外诱生CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞。从小鼠股骨获取骨髓细胞,加入完全RPMI 1640培养基(含IL-3和SCF各10 ng/ml)诱导4周。用甲苯胺蓝染色法观察肥大细胞异染颗粒;流式检测CD117和FcεRIα双阳性细胞比例。将肥大细胞与同基因来源的T细胞按不同比例(1∶2、1∶1、2∶1)置于48孔培养板中培养,作为三个实验组;未加肥大细胞的单独T细胞组作对照组。四个组均加入CD3抗体和CD28抗体各2μg/ml,IL-2 1 000U/ml,5 d后流式检测Foxp3表达情况。RT-PCR,免疫组化法检测肥大细胞中TGF-β1的表达。与对照组相比,实验组Foxp3表达均升高(对照组:3.37%±0.40%;实验组为:8.23%±0.80%、10.87%±1.25%、13.63%±0.55%)。RT-PCR和免疫组化均检出TGF-β1表达。肥大细胞能在体外诱导T细胞转化为CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞,可能与肥大细胞表达TGF-β1有关。
- 张维娜吴轲周鸿敏何文涛高英汪理林星光方泽民蔡兰军周巧丹雒真龙陈忠华
- 关键词：小鼠肥大细胞CD4^+CD25^+FOXP3^+调节性T细胞TGF-Β1
- MICA抗体监测在肾移植术后急、慢性排斥反应中的意义
- 2013年
- 目的探讨肾移植受者的抗MICA抗体水平与急性和陧性排斥反应的相关性及其对移植肾功能的影响。方法采用酶联免疫吸附方法检测接受同种异体肾移植手术的患者血清中MICA抗体，并同步检测HLA抗体、肾功血肌酐、尿量及移植肾超声等临床指标。本研究分两部分分别监测在肾移植术后急、慢性排斥反应中MICA抗体的变化。结果第一部分41例研究对象中有18例发生急性排斥反应，该组中MICA抗体阳性率高于肾功能稳定组（P〈0．05）；MICA抗体阳性组的急性排斥反应发生率高于MICA抗体阴性组（P〈0．05）；术后MICA抗体动态监测时发现，MICA抗体水平逐渐升高2～3d后出现排斥反应，给予抗排斥治疗后血肌酐水平逐渐降至正常，MICA抗体水平亦逐渐下降，但仍维持在阳性范围。第二部分40例患者中21例患者出现慢性排斥反应，其中MICA抗体阳性率明显高于肾功稳定组患者（P〈0．05）。慢排组中MICA抗体阳性患者的血肌酐与阴性组的血肌酐水平比较有统计学差异（P〈0．05）。移植肾穿刺病理结果显示MICA抗体阳性患者C4d沉积均为阳性。结论MICA抗体可预测急性排斥反应的发生及治疗效果，对于及时诊断及治疗排斥反应提供了一个重要指标，同时也是导致慢性排斥的主要因素之一，可影响移植肾的长期存活。
- 丁小明焦凤梅王晓红薛武军田普训李杨田晓辉
- 关键词：肾移植MICA抗体排斥反应
- 小鼠galectin-9可通过分泌形式诱导Tim-3^-T细胞凋亡
- 2010年
- 目的 构建小鼠galectin-9重组腺病毒pAd-gal-9,探讨galectin-9的真核表达定位以及galectin-9诱导T细胞凋亡与Tim-3表达的关系.方法 常规分子克隆方法 结合LR反应构建腺病毒重组质粒pAd/CMV/V5-DEST-gal-9,以Pac I线性化后,用脂质体2000体外转染293A细胞,8 d后反复冻融细胞3次收集含病毒上清,并以此上清感染293A细胞大量扩增病毒pAd-gal-9.CsCI密度梯度离心法纯化病毒,96孔板法梯度感染293A细胞测定病毒滴度,然后感染CHO细胞,用免疫组化、Western blot和流式细胞仪分析galectin-9的表达水平和定位;以新鲜培养的上清或固相化的细胞分别与外周淋巴结细胞进行培养,AnnexinV/PI法检测T细胞凋亡情况,对比凋亡细胞比例与Tim-3^＋ T细胞的比例.结果 重组腺病毒构建及表达成功,免疫组化表明galectin-9在CHO胞质表达;Westernblot证实galectin-9表达;流式分析表明胞内染色组galectin-9平均荧光强度显著高于表面染色组,病毒感染CHO表面染色组与空白对照组galectin-9平均荧光强度无明显区别;新鲜培养的上清可以明显诱导T细胞发生凋亡,显著高于Tim-3^＋ T细胞的比例.结论 重组腺病毒pAd-gal-9构建成功,体外感染pad-gal-9的CHO分泌galectin-9诱导T细胞凋亡可以不依赖Tim-3的表达.
- 何文涛袁劲徐逸周鸿敏蔡兰军郭晖李超左利群宫念樵陈忠华
- 关键词：凋亡T细胞
- 小鼠骨髓源性肥大细胞的培养及鉴定被引量：1
- 2009年
- 目的:在体外利用小鼠骨髓干细胞诱导获得高纯度的肥大细胞。方法:从小鼠股骨获得骨髓细胞,放入含10%胎牛血清的RPMI1640培养基中,加入不同浓度的刺激因子,即IL-3和SCF各分别为10ng/ml、15ng/ml、20ng/ml,放入CO2培养箱中培养4周,用免疫组化观察CD117的表达,用流式细胞术检测CD117和FcεRIα双阳性细胞的比例,用甲苯胺蓝染色法观察细胞的成熟度,并与较常用的肥大细胞系P815做比较。结果:培养获得的肥大细胞,其中IL-3和SCF分别为10ng/ml和15ng/ml时均可在4周后得到纯度大于95%的CD117和FcεRIα双阳性肥大细胞,而20ng/ml时FcεRIα的表达却有所降低,双阳性细胞仅达90%,而P815细胞系表达FcεRIα的比例很低。免疫组化发现培养获得的细胞大部分均表达CD117。甲苯胺蓝染色发现培养获得的细胞核被染成深蓝色,胞浆中布满大量紫红色的颗粒,呈现肥大细胞的典型特征。而P815却少见典型的紫红色异染颗粒。结论:用IL-3和SCF各10ng/ml可在体外成功培养获得高纯度的小鼠骨髓源性肥大细胞,且其在表型和成熟度方面均好于P815细胞系。
- 张维娜吴轲周鸿敏彭清臻何文涛高英林星光方泽民陈忠华
- 关键词：肥大细胞骨髓小鼠
- Galectin-7蛋白在人非小细胞肺癌中的表达及临床意义被引量：2
- 2013年
- 目的:观察galectin-7蛋白在人非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达,探讨galectin-7在NSCLC中的临床意义。方法:采用Western blot(WB)和免疫组织化学染色法(IHC)检测30例NSCLC组织及相应癌旁正常肺组织中galectin-7的表达情况。结果:WB结果显示galectin-7在NSCLC的表达较癌旁组织显著增高(1.33±0.11 vs.0.06±0.02,P<0.01)。IHC显示NSCLC中galectin-7染色明显强于癌旁组织,galectin-7主要表达于肺癌细胞、浸润淋巴细胞的胞膜和胞浆中。结论:galectin-7的高表达与NSCLC相关。
- 雒真龙周鸿敏徐立孙仕彬徐洪来姜毅楠杨超陈忠华潘铁成
- 关键词：免疫组织化学染色WESTERNBLOT
