江苏省科技厅基金(BG2007322)
- 作品数：5 被引量：8H指数：2
- 相关作者：张月华钱荷英徐安英孙平江李刚更多>>
- 相关机构：中国农业科学院蚕业研究所江苏科技大学更多>>
- 发文基金：江苏省科技厅基金国家现代农业产业技术体系建设项目国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 家蚕耐氟近等基因系SSH文库的构建及初步分析
- 家蚕耐氟品系T6和敏感品系733新构建耐氟近等基因系,以回交11代的家蚕耐氟近等基因系群体中的耐氟个体和敏感个体中肠为材料,构建家蚕耐氟近等基因系抑制消减杂交(SSH)cDNA文库.
- 王小强徐安英李刚张月华钱荷英孙平江郭锡杰
- 家蚕碱性丝氨酸蛋白酶基因Asp的克隆及在不同耐氟性家蚕组织中的表达差异
- 2013年
- 在家蚕耐氟近等基因系SSH文库中发现一条差异表达的EST序列。以家蚕耐氟近等基因系群体的幼虫中肠cDNA为模板,利用RACE技术克隆了该基因的全长cDNA序列,将该基因命名为Asp(GenBank登录号:JX312360)。该基因cDNA全长868 bp,包括20 bp的5'-UTR和77 bp的3'-UTR,ORF为771 bp,编码256个氨基酸。该基因由4个外显子和3个内含子组成,编码蛋白质为亲水性蛋白,属于丝氨酸蛋白酶家族,在第17～18氨基酸残基处存在信号肽切割位点。荧光定量PCR检测该基因在家蚕耐氟近等基因系群体幼虫的中肠、脂肪体及马氏管中都有表达,以中肠的表达量最高,表达量因个体的耐氟性而存在差异:中肠中,敏感个体的表达量是耐氟个体的2.49倍;脂肪体中,敏感个体与耐氟个体之间的表达量差异不显著;马氏管中,敏感个体的表达量是耐氟个体的8.16倍。该基因在不同耐氟性家蚕品种5龄幼虫中肠的表达量存在极显著差异,在耐氟性品种的表达量是氟敏感品种的50倍。研究结果提示,该碱性丝氨酸蛋白酶基因可能与家蚕的耐氟性有一定的关联。
- 张华光吴萍徐安英钱荷英张月华孙平江王小强
- 关键词：家蚕荧光定量PCR
- 家蚕绵茧突变品系中部丝腺的差异蛋白组学分析
- 2012年
- 为了获取与家蚕绵茧突变形成相关蛋白质的基础信息,采用蛋白质双向电泳技术对结茧性状具有明显差异的正常茧、绵茧、丝胶茧3个家蚕品系5龄期幼虫中部丝腺不同区段的蛋白质进行双向电泳(2-DE)分析,图谱中的蛋白点主要集中在分子质量14～70 kD、等电点(pI)4～9的区域。采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术对部分表达量差异显著的蛋白点进行鉴定,获得35种可信的蛋白质,绵茧突变品系与正常茧、丝胶茧品系相比表达量有显著差异的蛋白质包括参与能量代谢、蛋白质合成等生物学过程的功能蛋白质,其中丝氨酸蛋白酶抑制剂16(serpin16)和丝氨酸蛋白酶抑制剂18(serpin18)可能与家蚕绵茧突变形成相关。
- 张俊徐安英王小强李刚张月华钱荷英孙平江
- 关键词：家蚕差异蛋白质双向电泳
- 家蚕黄茧近等基因系SSH文库的构建及部分EST序列分析被引量：3
- 2009年
- 以家蚕黄茧品系KY(YYCC)和白茧品系C108(+Y+Y+C+C)组配黄茧(C)近等基因系。挑取回交11代的黄茧(C)近等基因系群体中的黄血个体的黄色和浅黄色中部丝腺作为实验材料,构建家蚕黄茧近等基因系抑制消减杂交(SSH)cDNA文库。通过对SSHcDNA文库中随机挑选的104个阳性克隆测序和聚类拼接,得到15个假定基因(contig)、25个已知功能基因(unigenes)和5个未知功能基因(unknown)。获得的表达序列标签(EST)经Blast比对和同源性分析,初步发现这些基因参与家蚕体内能量代谢、基因转录、信号传导、物质转运、细胞生长分裂、细胞结构形成、蛋白质合成与降解、核酸及蛋白质加工、机体防御等诸多生物学过程。分析结果可作为深入研究家蚕茧着色分子机制的基础信息。
- 李刚徐安英李木旺陈兆羽张月华钱荷英孙平江郭锡杰
- 关键词：家蚕抑制性消减杂交近等基因系表达序列标签
- 家蚕黄血近等基因系差异蛋白组学分析
- 2010年
- 为了获取与家蚕黄血基因(Y)协同作用的相关蛋白的基础信息,通过双向电泳技术对家蚕黄血近等基因系5龄起蚕黄血个体和白血个体的中肠蛋白进行分离并作图像分析,发现分离出的较为清晰的蛋白点主要集中在14～80kD区域,等电点(pI)4～9。采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术对其中一些差异明显的蛋白点进行鉴定,鉴定结果较为可信的5个蛋白点包括参与能量代谢、蛋白质合成等功能蛋白,这些蛋白可能与家蚕黄血性状的形成有关。采用实时定量PCR方法,对质谱鉴定出的质子转移ATP合酶β亚基2编码基因在家蚕黄血近等基因系黄血个体和白血个体5龄不同发育时期的相对表达量进行分析,结果表明该基因在2种个体中的表达均呈现明显上升的趋势,并且在黄血个体中的表达量明显较白血个体高,5龄第1-2天的相对表达量高7倍左右,提示该基因可能与家蚕的黄血性状有关联。
- 李刚徐安英陈兆羽李木旺裘智勇张月华钱荷英孙平江郭锡杰
- 关键词：家蚕双向电泳质谱分析实时定量PCR
- 家蚕耐氟近等基因系SSH文库的构建及部分差异表达基因的分析被引量：5
- 2011年
- 为了获取与家蚕耐氟性状相关的基因信息,利用家蚕耐氟品种T6和氟化物敏感品种733新建立耐氟近等基因系,以回交11代的家蚕耐氟近等基因系群体中的耐氟个体和敏感个体的中肠为材料,构建家蚕耐氟近等基因系抑制消减杂交(SSH)cDNA文库。通过对抑制消减杂交cDNA文库中随机挑选的153个阳性克隆测序和聚类拼接,得到19个重叠群(con-tig)、47个已知功能基因(un igene)和28个未知功能基因。获得的表达序列标签(EST)经BLASTx比对和同源性分析,初步发现这些基因参与家蚕体内物质转运、能量代谢、基因转录、蛋白质合成与降解、蛋白质加工、信号转导、机体免疫防御、细胞结构形成等诸多生物学过程。采用实时定量RT-PCR方法,对部分基因在家蚕耐氟近等基因系群体中的耐氟个体和敏感个体的不同组织的表达进行定量分析,发现磷酸根离子转运蛋白基因、三磷酸腺苷(ATP)合成酶基因、液胞型H+-ATP酶基因、脂肪酶基因以及主要过敏原蛋白基因在耐氟个体的中肠、马氏管、脂肪体组织中的表达量有较明显上调。
- 王小强徐安英李刚张月华钱荷英孙平江郭锡杰
- 关键词：家蚕抑制性消减杂交实时定量RT-PCR
- 家蚕黄茧近等基因系SSH文库的构建及部分EST序列分析
- 以家蚕黄茧品系KY（YYCC）和白茧品系C108（+Y+Y+C+C）组配黄茧（C）近等基因系。挑取回交11代的黄茧（C）近等基因系群体中的黄血个体的黄色和浅黄色中部丝腺作为实验材料,构建家蚕黄茧近等基因系抑制消减杂交（S...
- 李刚徐安英李木旺陈兆羽张月华钱荷英孙平江郭锡杰
- 关键词：家蚕抑制性消减杂交近等基因系表达序列标签
- 文献传递
