北京市教委科技计划面上项目(KM201310028010)
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
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- 烟草丝束蛋白ABD2与微丝的体内体外相互作用
- 2014年
- 微丝骨架在细胞的生命活动中具有重要的功能,而其动态的解聚聚合特性是其实现功能的前提.丝束蛋白(fimbrin/plastin)做为微丝结合蛋白质,是微丝骨架的重要调控因子之一,含有2个肌动蛋白结合结构域,目前对其结合微丝的机制并不清楚.本文以烟草丝束蛋白的肌动蛋白结合结构域2(NtFAbd2)为研究对象,通过原核细胞表达纯化NtFAbd2,利用体外沉淀法分析发现,NtFAbd2能够与微丝结合;利用激光共聚焦扫描显微镜分析发现,在烟草BY-2悬浮细胞内,NtAbd2-GFP与微丝共分布,这些结果为深入分析植物丝束蛋白的作用机制提供了新的数据.
- 梁蒙韩利波孙海涛黄璐陈志玲
- 关键词：微丝
- 形成素结合蛋白调节粗糙脉孢菌菌丝极性生长发育被引量：1
- 2013年
- 微丝骨架在真菌菌丝极性生长中具有重要的功能,而其动态解聚-聚合特性是其实现功能的前提.形成素作为肌动蛋白结合蛋白,是微丝骨架动态调控因子之一,而形成素结合蛋白对于形成素发挥功能非常关键,但是对其在真菌极性生长发育中的功能还未见报道.本文以丝状真菌粗糙脉孢菌为材料,利用同源重组基因敲除技术,通过电击转化、分生孢子过膜以及PCR鉴定的方法,获得了形成素结合蛋白基因缺失突变菌株(FBPKO).进一步利用平板生长方法并结合细胞壁染色对突变菌株的表型进行分析.结果显示,与野生型相比,在分生孢子接种后24 h内突变菌株FBPKO的菌丝生长明显减慢且分支异常.这些结果表明,形成素结合蛋白调节着粗糙脉孢菌菌丝早期的极性生长发育.
- 李娜陈丹丹陈志玲
- 关键词：肌动蛋白粗糙脉孢菌
- 粗糙脉孢菌前纤维蛋白Y86和R88位点突变抑制菌丝生长被引量：1
- 2015年
- 微丝骨架在真菌的生长发育过程中发挥着重要的作用,而动力学特性是其实现功能的关键.前纤维蛋白(profilin)是肌动蛋白动态组装的主要调控因子,对其功能研究有助于阐明微丝骨架在真菌生长发育中的机制.本文以丝状真菌模式生物粗糙脉孢菌(Neurospora crassa)为材料,利用定点突变技术和同源重组技术,分别将前纤维蛋白上肌动蛋白结合位点86位酪氨酸(Y86)和88位精氨酸(R88)进行了单突变和双突变,获得了Y86R、R88E和Y86RR86E前纤维蛋白点突变株.进一步利用平板培养和竞争性生长管培养对点突变株的表型进行分析后发现,与野生型相比,3个前纤维蛋白点突变株的菌丝生长均明显减慢.这些结果表明,前纤维蛋白与肌动蛋白的相互作用对于N.crassa的生长和发育至关重要.
- 孙海涛黄璐陈志玲
- 关键词：前纤维蛋白定点突变菌丝生长粗糙脉孢菌
