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青岛地区贝类产品中诺如病毒的感染和流行初探被引量：13: 2009年; 从2006年1月至2007年1月,在青岛市内3区5个主要水产品批发市场连续采集贝类样品,其中太平洋牡蛎Crassostrea gigas 208个、毛蚶Scapharcasubcrenata169个、杂色蛤Venerupis variegata169个,采用RT-PCR方法检测诺如病毒(Novoviruses,NV)的感染,旨在为贝类食品的安全监控提供基础数据资料。研究结果表明,太平洋牡蛎和毛蚶样品中NV检出率分别为10.1%和5.3%,而杂色蛤未检出,NV流行的季节主要是11月至次年3月,感染部位主要分布于贝类的消化道。; 柳淑芳李振周德庆; 关键词：贝类诺如病毒

七鳃鳗(Lampetra japonica)白细胞cDNA文库构建及生物信息学分析被引量：5: 2010年; 以复合免疫日本七鳃鳗(Lampetra japonica)外周血中分离的单个核白细胞为材料,构建库容量为4.5×106pfu.mL-1的cDNA文库,随机挑选单克隆菌落测序共得到10 500条有效ESTs(expressed sequence tags)序列.经PHRAP软件对序列拼接组装后得到3 382个转录本,其中有1 080个重叠群和2 302个单一序列,有59.08%的转本录在NCBI数据库中搜索到同源序列.运用Blast2GO软件进行Gene Ontology注释,分别有27.47%、25.20%和10.01%的转录本参与细胞生理、代谢和生物调节等生物学途径;分别有48.43%、22.10%和10.69%的转录本起到结合、催化和结构分子活性等分子功能.统计数据显示,与细胞自身基因转录、蛋白质合成及转运等生命过程密切相关的基因如真核转录延长因子、反转录酶、核糖体蛋白、腺苷酸转运体、细胞色素C氧化酶和热休克蛋白等在血液白细胞群中大量表达.另外,与固有免疫密切相关的白细胞衍生趋化因子、抵抗素、颗粒体蛋白等表达量相对较高,说明固有免疫系统在七鳃鳗感染初期的免疫防卫方面起着主要作用.; 张宁刘欣孙晶刘岑洁陈操李竞芦静刘慧玲李庆伟; 关键词：EST 发育分化

水产品中诺如病毒检测技术研究进展被引量：3: 2008年; 近年来,诺如病毒(Noroviruses,NVs)引发的大规模肠胃炎事件在世界范围内频繁暴发,食用水产品是人感染NVs的一个主要途径,因此水产品中NVs的准确检测与监控是预防疫情暴发、控制疫情扩散的有效途径。文中介绍了NVs的分子生物学与流行病学特征,对目前国内外水产品中NVs检测技术及研究状况进行了综述,为水产品中NVs的检测提供参考。; 苏来金周德庆柳淑芳; 关键词：水产品诺如病毒

日本七鳃鳗类淋巴细胞的分离及细胞学特征被引量：9: 2008年; 为分离纯化并鉴定日本七鳃鳗(Lampetra japonica)血液中的类淋巴细胞,采用Ficoll密度梯度离心法分离出单个核细胞层,并得到分离单个核细胞层的最佳分离液比重为1.092。利用流式细胞仪对分离到的单个核细胞层细胞进行分选,根据细胞的前向光及侧向光散射特征成功分选出类淋巴细胞,分选效率为95.68%,每毫升外周血可分离纯化得到类淋巴细胞2.4×106个。通过透射电镜观察七鳃鳗类淋巴细胞,细胞为圆形或椭圆形,细胞表面有突起、无微绒毛,胞质内含有板状嵴线粒体、粗面内质网、游离核糖体和液泡等。淋巴细胞异质性实验结果表明,日本七鳃鳗血液白细胞中尚未发现T淋巴细胞、B淋巴细胞的分化。; 刘岑杰刘欣吴毓马飞王继红李庆伟; 关键词：细胞异质性

Actin启动子的克隆及海洋丝状真菌Phoma herbarum YS4108的遗传转化(英文): 2008年; 目的:建立一种简便有效的海洋丝状真菌Phoma herbarum YS4108的转基因方法。方法:用简并引物扩增和染色体步行克隆P.herbarum YS4108的actin启动子,以潮霉素抗性基因为选择标记,用部分原生质体化的单细胞进行电转化并摸索最佳电转化参数。结果:成功获得了actin启动子序列,并确定了最佳电转化参数:电压0.75kV(0.2cm电转化杯),电阻400?,载体DNA用量为9μg。在此条件下可获得多于100个转化子/电转化杯(106细胞)。结论:内源性的actin启动子可用于P.herbarum YS4108的电转化,该方法可用于P.herbarum的转基因研究。; 周添丰明乾魏闻捷谭仁祥宋勇春; 关键词：ACTIN 电转化 PHOMA 转基因

壳聚糖固定化海洋低温碱性蛋白酶YS-80-122的研究被引量：3: 2008年; 以壳聚糖为固定化载体,采用吸附交联法,以戊二醛为交联剂,对海洋低温碱性蛋白酶YS-80-122进行固定化。通过单因素和正交试验优化得到最佳固定化条件为pH7·0,戊二醛终浓度0·2%,吸附时间50min,酶载体比例40mg/g,交联时间16h,交联温度10℃,固定化酶酶活回收可达47·52%。固定化酶和游离酶的最适作用温度均为30℃,最适作用pH分别为9·0和10·0,相比游离酶,固定化酶可在更宽的温度和pH范围内发挥高活性,且其温度和pH稳定性得到显著提高。室温下经冷冻干燥的固定化酶贮存90d后活性基本保持不变,贮藏半衰期约为190d。以酪蛋白为底物,重复使用7次后酶活仍保留有79·2%,操作半衰期约为21次使用率。; 王海英孙谧王颖; 关键词：固定化壳聚糖

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国家高技术研究发展计划(2007AA09Z400)