江西省自然科学基金(2010GZN0046)
- 作品数:5 被引量:11H指数:1
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- 牛源破伤风梭菌的分离与鉴定
- 2013年
- 1头进行了瘤胃瘘管手术的黄牛发病死亡,临床症状表现为肌肉强直性痉挛。本试验取其手术伤口部位的炎性肌肉进行了细菌分离,分离到1株破伤风梭菌CT-JX-1。该分离菌株为具有顶端芽孢的革兰氏阳性杆菌;在普通琼脂培养基形成出灰白色、扁平、粗糙的菌落,菌落中心部分致密,外缘呈蜘蛛网状;该菌株能液化明胶,对多种糖均不发酵。
- 邓舜洲钟地香肖根辉张文波朱芝秀
- 关键词:破伤风梭菌
- 猪弓形虫病的诊断及虫体分离鉴定被引量:10
- 2012年
- 江西某猪场的后备母猪发生以体温升高、呼吸困难、皮肤发绀为主要特征的疫病,剖检病死猪的病理变化主要表现为肺水肿,肺脏、肝脏和脾脏肿大并有少量灰白色坏死点,全身淋巴结肿大和出血。肺门淋巴结触片,经瑞氏染色镜检可见镰刀形或半月形的弓形虫滋养体;无菌取肺门淋巴结腹腔接种BALB/c鼠,分离得一株弓形虫,该弓形虫分离株对小鼠具有稳定的致病力,小鼠接种弓形虫腹水(0.05~0.1 mL/只)后4~5 d死亡,腹水中有大量成丛、双在或分散的弓形虫滋养体。根据流行病学、临床症状、病理变化及实验室检查结果,诊断该后备母猪场的疫病为猪弓形虫病。
- 邓舜洲张文波冷闯陆根枝许昌满邹柳朱芝秀
- 关键词:弓形虫病
- 抗三肽囊素(Bursin)单克隆抗体的制备及其与三肽囊素分子结合特性分析
- 2013年
- 为研制抗三肽囊素(Bursin,KHG-NH2)单克隆抗体(MAb),本研究采用EDC法、SMCC法将Bursin分子赖氨酰(K)上的氨基与载体蛋白(BSA、OVA)定向偶联,分别制备Bursin人工抗原BSA-KHG-NH2、OVA-KHG-NH2和BSA-S-KHG-NH2。以BSA-KHG-NH2免疫BALB/c小鼠,应用杂交瘤技术,筛选得到二株能够稳定分泌抗Bursin MAb的杂交瘤细胞株,命名为4A11和7B2。这二株MAbs均能够与BSA-KHG-NH2、OVA-KHG-NH2和BSA-S-KHG-NH2反应,不能与BSA和OVA反应;MAbs与OVA-KHG-NH2的反应均能够被KHG-NH2、GKHG-NH2、HHHHHHKHG-NH2肽阻断,但不能被KHGK四肽阻断。结果表明,在Bursin分子甘氨酰胺(G)上的氨基未与其他氨基酸连接时,本实验制备的二株MAbs均能够与Bursin分子特异性结合。抗Bursin MAbs的制备,为进一步以MAb为靶分子筛选Bursin模拟表位、Bursin的生物活性关键基团等研究奠定了基础。
- 邓舜洲朱芝秀徐昌满郑智刚邹柳邬向东戴益民谌南辉何后军张文波
- 关键词:三肽囊素人工抗原单克隆抗体
- 抗三肽囊素单克隆抗体的制备
- 2013年
- 为研制抗三肽囊素(bursin,KHG-NH2)的单克隆抗体,本试验采用EDC法将三肽囊素分子赖氨酰(K)上的氨基与载体蛋白(BSA或OVA)定向偶联,分别制备三肽囊素免疫抗原(BSA-KHG-NH2)和检测抗原(OVA-KHG-NH2)。以BSAKHG-NH2免疫BALB/c小鼠,应用杂交瘤技术,筛选到18株能稳定分泌抗三肽囊素单克隆抗体的杂交瘤细胞株。这18株单克隆抗体与三肽囊素人工抗原的结合均能被三肽囊素、GKHG-NH2四肽阻断,但不能被KHGK四肽阻断,表明18株单抗与三肽囊素分子的结合具有高度特异性。以本研究制备的单抗2D2建立间接竞争ELISA方法,检测三肽囊素含量,检测下限为4ng/mL,线性范围为4~500ng/mL,加标检测回收率为85.0%~92.4%。
- 邓舜洲郑智刚张文波谢笑芳邹柳邬向东谌南辉何后军朱芝秀
- 关键词:三肽囊素人工抗原单克隆抗体间接竞争ELISA
- 定向偶联制备三肽囊素人工抗原及其多克隆抗体的研制被引量:1
- 2013年
- 为研制三肽囊素(Bursin,KHG-NH2,BS)抗体,采用EDC法将三肽囊素分子赖氨酰(K)上的氨基与载体蛋白(BSA、OVA)定向偶联,分别制备免疫抗原(BSA-KHG-NH2)和检测抗原(OVA-KHG-NH2)。以BSA-KHG-NH2免疫5只BALB/c小鼠,经4次免疫后,均产生了较高的抗体水平,其中5号小鼠血清抗体效价达1∶125 000。免疫小鼠血清多克隆抗体与检测抗原的结合不仅能被三肽囊素阻断,而且能被GKHG-NH2四肽特异性阻断,但不能被KHGK四肽阻断,表明本试验制备的三肽囊素人工抗原是由载体蛋白的羧基与三肽囊素分子赖氨酰(K)上的氨基定向偶联而成。利用小鼠多克隆抗体建立了三肽囊素间接竞争ELISA检测方法,线性范围为15~1 000 ng/mL,IC50为160 ng/mL。
- 邓舜洲冷闯张文波许昌满胡杨邹柳邬向东谌南辉朱芝秀
- 关键词:三肽囊素人工抗原多克隆抗体间接竞争ELISA