福建医科大学科学研究发展基金(FJGXY04026)
- 作品数：3 被引量：6H指数：1
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- 抑癌基因c与p53抑制白血病细胞株生长作用的比较被引量：5
- 2007年
- 目的比较野生型p16^INK4a、p53抑癌基因的表达对白血病细胞株K562和HL60的生长抑制。方法采用脂质体介导野生型p16^INK4a、p53抑癌基因转染K562、HL60细胞并进行G418筛选，免疫印渍检测p16^INK4a、p53基因的表达，通过细胞生长曲线检测细胞活力，流式细胞仪进行细胞DNA周期分析及细胞凋亡分析，采用联苯胺氧化试验检测K562细胞的分化。结果转染后p53、p16^INK4a在K562及HL60细胞中表达；与对照细胞相比，实验组细胞生长受到明显的抑制，G1期细胞数增加，S期细胞减少。与p16^INK4a相比，抑癌基因p53使细胞表达Annexin V增加，显示出更强的致凋亡现象，尤其在HL60细胞株。结论抑癌基因p16脚、p53能有效抑制白血病细胞株的生长，可能更适合复发、难治性白血病的基因治疗。
- 芮红兵苏津自卓光生康日辉林珺芳
- 关键词：白血病基因P16基因P53转染
- 共表达p53、p16基因真核表达载体的构建及其在K562细胞中的表达
- 2009年
- [目的]构建p53、p16基因真核表达载体,观察其在K562细胞中的表达。[方法]设计并构建包含野生型p53cDNA、p16cDNA的真核双表达载体pBudCE4.1-53-16,脂质体法转染K562白血病细胞,用间接免疫细胞化学法、Western blot等方法鉴定外源性p53及p16的表达情况。[结果]构建成功p53、p16基因双表达真核载体,体外成功转染入K562细胞,检测到K562细胞外源性p53、p16蛋白的表达。[结论]重组质粒pBudCE4.1-53-16体外转染K562细胞后,目的基因能够在细胞中同时表达,为进一步研究两种基因用于肿瘤治疗奠定基础。
- 陈琦芮红兵
- 关键词：基因P53基因P16质粒构建共表达K562细胞
- 转染p16、p53对白血病细胞株K562及HL-60的抑制作用被引量：1
- 2010年
- 本研究构建p53,p16基因真核表达载体,用脂质体法转染入白血病细胞,观察其在白血病细胞中的表达和对白血病细胞的作用。设计并构建包含野生型p53cDNA与p16cDNA的真核双表达载体pBudCE4.1-53-16,用脂质体法转染白血病细胞,用间接免疫细胞化学法、Western blot法检测鉴定外源性p53及p16的表达情况。通过CCK-8,流式细胞仪检测细胞的生长曲线、细胞周期、细胞凋亡。结果发现:p53p16基因双表达真核载体构建成功,体外转染入白血病细胞后能检测到外源性P53、P16蛋白在白血病细胞中表达。转染48小时后,试验组与对照组比较,细胞周期阻滞(p<0.001);试验组和对照组比较,细胞增殖下降,细胞凋亡增加(p<0.001)。结论:重组质粒pBudCE4.1-53-16构建成功,经体外转染白细胞细胞后2个目的基因能够在细胞中同时表达,并引起细胞周期阻滞于G0期,细胞凋亡增加。
- 陈琦沈杰芳芮红兵苏津自卓光生康日辉林珺芳
- 关键词：P53基因P16基因基因转染
