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国家自然科学基金(30471288)

作品数:6 被引量:36H指数:4
相关作者:姜平李玉峰黄娟许家荣顾小雪更多>>
相关机构:南京农业大学江苏出入境检验检疫局更多>>
发文基金:国家自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”江苏省自然科学基金更多>>
相关领域:农业科学医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 5篇中文期刊文章

领域

  • 4篇农业科学
  • 1篇生物学
  • 1篇医药卫生

主题

  • 4篇病毒
  • 2篇呼吸综合征
  • 2篇呼吸综合征病...
  • 2篇TAQMAN
  • 1篇蛋白基因
  • 1篇衣壳
  • 1篇衣壳蛋白
  • 1篇衣壳蛋白基因
  • 1篇荧光RT-P...
  • 1篇荧光RT-P...
  • 1篇圆环病毒
  • 1篇质粒介导
  • 1篇实时PCR
  • 1篇特异
  • 1篇特异性
  • 1篇猪繁殖
  • 1篇猪繁殖与呼吸...
  • 1篇猪繁殖与呼吸...
  • 1篇猪生殖与呼吸...
  • 1篇猪生殖与呼吸...

机构

  • 5篇南京农业大学
  • 1篇江苏出入境检...

作者

  • 5篇姜平
  • 4篇李玉峰
  • 3篇黄娟
  • 2篇许家荣
  • 2篇顾小雪
  • 1篇鲁韦韦
  • 1篇王先炜
  • 1篇王凯民
  • 1篇蒋文明
  • 1篇唐泰山
  • 1篇冯志新
  • 1篇韩研妍
  • 1篇张常印

传媒

  • 2篇中国病毒学
  • 1篇中国农业科学
  • 1篇中国预防兽医...
  • 1篇中国兽医科学

年份

  • 2篇2008
  • 1篇2007
  • 1篇2006
  • 1篇2005
6 条 记 录,以下是 1-5
排序方式:
M蛋白基因shRNA抑制PRRSV在Marc145细胞中复制的研究被引量:4
2008年
【目的】通过靶向PRRSV基因组中的M基因的siRNA来抑制PRRSV在Marc145细胞中的复制。【方法】构建4个能转录小发夹RNA(shRNA)的质粒,将其与靶蛋白表达质粒共转染HEK293A细胞,观察荧光或进行半定量PCR;或将其转染Marc145细胞,感染PRRSV后进行IFA、TCID50和实时PCR检测。【结果】shRNA表达质粒对M融合蛋白表达的抑制率约为50%,使M真核质粒表达蛋白的mRNA水平降低54%~64%,表达的shRNA在PRRSV感染后48h使病毒的TCID50和mRNA水平均降低到1/10~1/100倍,间接免疫荧光结果表明shRNA表达质粒转染孔的荧光细胞数显著减少。【结论】shRNA表达质粒特异性的抑制了靶蛋白M和PRRSV的复制,靶向PRRSV基因组M基因不同区域的siRNA可以作为控制该病毒传播的候选策略。
黄娟姜平李玉峰蒋文明
关键词:PRRSVRNA干扰
质粒介导的核衣壳蛋白siRNA干扰A型流感病毒复制的研究被引量:4
2005年
Influenza A virus is a widespread pathogen,but current vaccines and drug therapy are of limited value. RNAi may provid a novel route to control it since RNAi can inhibit gene expression high-efficiently and specificly. A recombinant plasmid with a short hairpin RNA(shRNA)targeting at the nuclear protein gene of the virus was constructed and identified by enzyme digestion and sequence analysis.The hemagglutination(HA) titre and TCID 50 of the virus in chicken embryo fibroblastic(CEF)cells transfected with the plasmid was lower than that nontransfected with the plasmid.It showed that the plasmid could specifictly inhibit the virus production in CEF cells.
黄娟姜平顾小雪许家荣李玉峰
关键词:A型流感病毒核衣壳蛋白基因
猪生殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白抗原表位基因的表达及其表达产物的抗原性被引量:3
2007年
为了确定猪生殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白A、B抗原表位之间的相互关系和对免疫的影响,应用PCR方法扩增出A、B抗原表位基因并分别克隆于原核和真核表达载体中。原核重组质粒表达的重组蛋白经Western-blotting检测证明,该重组蛋白具有良好的抗原性。将重组蛋白和真核表达质粒免疫小鼠,前者可诱导产生针对PRRSV的特异性ELISA抗体,但是此抗体没有中和活性;后者不能诱导免疫小鼠产生PRRSV特异性抗体。结果表明,中和抗体的产生不但与A、B表位的空间构象有很大的关系,如果蛋白质分子质量过小也不能诱导机体产生有效的免疫反应。
顾小雪李玉峰姜平黄娟韩研妍
关键词:猪生殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白抗原表位
美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒TaqMan荧光RT-PCR检测方法的建立被引量:3
2008年
根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲株的基因序列,设计U1和U6两套PCR引物和荧光探针,建立了扩增U1和U6基因的荧光RT-PCR用于检测美洲型PRRSV。用10倍倍比稀释的质粒DNA、cDNA、RNA进行扩增以检测其灵敏度,同时对猪瘟(HCV)、猪伪狂犬(PRV)等7种病毒进行特异性检测。结果显示建立的扩增U1和U6基因的荧光RT-PCR可用于检测PRRSV,其灵敏度为10个拷贝的质粒DNA,而与HCV等非PRRSV无交叉反应。本研究所建立的荧光RT-PCR具有快速、灵敏、准确、低污染等优点,可用于PRRSV样品的检测。
鲁韦韦唐泰山张常印王凯民姜平
关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒荧光RT-PCR特异性灵敏度
猪圆环病毒2型TaqMan实时PCR检测方法的建立被引量:16
2006年
设计合成了一套引物和TaqMan探针,特异性扩增猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2基因,在国内首次建立了快速定量检测PCV2的实时PCR方法,且该方法具有较好的特异性和重复性,对PCV2DNA检测下限为1copy/μL,敏感性比常规PCR高106倍;分别用该法和普通PCR方法对PMWS人工发病猪的10份组织及30份血清样品检测,结果表明该方法具有更快速、灵敏、准确、低污染等优点,并可以对PMWS的早期检测、预防起到指示作用。
冯志新姜平王先炜李玉峰许家荣
关键词:TAQMAN实时PCR
共1页<1>
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