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国家高技术研究发展计划(2007AA09Z421)

作品数：2 被引量：21H指数：2
相关作者：洪宇植肖亚中彭惠方泽民刘娟娟更多>>
相关机构：中国科学技术大学安徽大学佛罗里达国际大学更多>>
发文基金：安徽省优秀青年科技基金国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
相关领域：生物学更多>>

文献类型

  • 2篇中文期刊文章

领域

  • 2篇生物学

主题

  • 1篇异源
  • 1篇异源表达
  • 1篇水解酶
  • 1篇糖苷
  • 1篇糖苷酶
  • 1篇葡萄糖
  • 1篇葡萄糖苷
  • 1篇葡萄糖苷酶
  • 1篇漆酶
  • 1篇重组酶
  • 1篇酶性质
  • 1篇酵母
  • 1篇基因
  • 1篇基因组
  • 1篇海洋微生物
  • 1篇高密度发酵
  • 1篇Β-葡萄糖苷...
  • 1篇毕赤酵母

机构

  • 2篇安徽大学
  • 2篇中国科学技术...
  • 1篇佛罗里达国际...

作者

  • 2篇肖亚中
  • 2篇洪宇植
  • 1篇周宏敏
  • 1篇张学成
  • 1篇孙宝林
  • 1篇房伟
  • 1篇蒲春蕾
  • 1篇刘娟娟
  • 1篇方泽民
  • 1篇彭惠

传媒

  • 2篇生物工程学报

年份

  • 1篇2009
  • 1篇2007
共 2 条 记 录，以下是 1-2
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排序方式：
栓菌漆酶在毕赤酵母中高效表达及重组酶的性质被引量：10
2007年
栓菌420（Trametes sp．420）漆酶基因lacD以两种方式在巴斯德毕赤酵母（Pichiapastoris）进行异源表达，产生两种重组漆酶：rLacDx（具有天然N-末端）和rLacDe（N-末端带有8个额外的氨基酸残基）。摇瓶发酵18d，rLacDx和rLacDe的产量分别为1．21×10^5u／L、7、38×10^4u／L[以2，2＇-连氮-3-乙苯-二噻唑-6磺酸（ABTS）为底物]。在高密度发酵条件下，rLacDx的产量增加到2．39×10^5u／L，同时其生产周期降至7．5d。两种重组酶对愈创木酚底物的氧化特性相似，且在50℃和pH3～10的范围内均稳定。然而，rLacDx对底物ABTS的比活力（1761u／mg）高于rLacDe（1122u／mg），其表观Km值（427μmol／L）低于rLacDe（604μmol／L）。
周宏敏洪宇植肖亚中CUI Teng-JiaoWANG Xiao-Tang蒲春蕾
关键词：异源表达高密度发酵漆酶毕赤酵母
新型海洋微生物β-葡萄糖苷酶基因的克隆、表达及重组酶性质被引量：11
2009年
通过功能筛选方法,从中国南海海洋表层海水微生物元基因组文库筛选得到了6个β-葡萄糖苷酶阳性克隆。对其中的一个阳性克隆pSB47B2进一步亚克隆和序列分析,获得一新型β-葡萄糖苷酶基因(命名为bgl1B)开放阅读框。以pET22b(+)为载体、Escherichia coli BL21(DE3)为宿主菌,bgl1B被高效活性重组表达。通过Ni-NTA亲和层析柱纯化了重组Bgl1B(rBgl1B)。纯化的rBgl1B催化pNPG水解反应的最适pH为6.5,最适温度为40oC。在最适反应条件下,rBgl1B水解pNPG的活性达到39.7U/mg,Km和Vmax分别为0.288mmol/L、36.9μmol/min。纤维二糖是rBgl1B的有效作用底物,其Km和Vmax分别为0.173mmol/L、35μmol/min。但rBgl1B不能催化转化蔗糖、乳糖、麦芽糖以及CMC。rBgl1B催化pNPG的水解反应对高浓度的Na+有较好的耐受性,而低浓度的Ca2+、Mn2+对该酶活有一定促进作用。不同于许多来源于真菌的酸性β-葡萄糖苷酶,rBgl1B在pH7.0～9.0范围内具有比较高的酶活力并具有较好的稳定性。
房伟方泽民刘娟娟洪宇植彭惠张学成孙宝林肖亚中
关键词：海洋微生物Β-葡萄糖苷酶
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