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高致病性禽流感病毒性肺炎小鼠模型血清细胞因子的水平被引量：2: 2007年; 目的探讨细胞因子IL-1β、IL-6、IL-8和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在高致病性禽流感病毒性肺炎(HPAIVP)中的作用。方法昆明小鼠60只随机分为实验组和对照组,每组30只。高致病性禽流感病毒滴鼻制备HPAIVP小鼠模型,采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA),对攻毒后不同时间点实验和对照组小鼠血清IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α水平进行检测。结果实验组血清IL-1β、IL-6、和TNF-α水平明显高于对照组,差异均有显著性(Pa<0.05)。结论细胞因子IL-1β、IL-6和TNF-α参与高致病性禽流感病毒肺炎的发病过程。; 赵宏霞夏咸柱鲁继荣; 关键词：肺炎白细胞介素1Β 白细胞介素8

ICAM-1及其受体在高致病性禽流感病毒性肺炎中的作用研究被引量：7: 2006年; 本文应用高致病性禽流感病毒性肺炎(Highlypathogenicavianinfluenzaviralpneumonia,HPAIVP)小鼠模型,采用免疫组织化学染色方法,对实验组和对照组小鼠肺组织中ICAM-1及其受体的表达含量进行检测。研究发现:实验组小鼠肺组织中ICAM-1及其受体表达含量在攻毒后1d即开始升高,第4天达高峰。就攻毒剂量来说,以100LD50/50μL攻毒组小鼠肺组织中ICAM-1及其受体阳性表达量升高最明显。并通过ELASA方法进一步证实了这种变化。结果表明:ICAM-1及其受体在HPAIVP中呈现高表达,可能在其发病中发挥了重要作用。; 赵宏霞夏咸柱鲁继荣岳玉环杨松涛朱平; 关键词：ICAM-1 受体病毒性肺炎小鼠

流式细胞术检测HPAIV感染小鼠外周血白细胞表面CD54及其受体的表达: 2007年; 目的研究外周血白细胞表面CD54及其受体CD11 b/CD18在小鼠高致病性禽流感病毒(HPAIV)感染中的作用。方法18-20 g普通健康昆明小鼠60只,随机分为实验组(HPAIV)和对照组,应用荧光标记的抗小鼠CD54CD11 b、CD18单抗,采用全血直接免疫荧光流式细胞术,对不同时相实验组和对照组小鼠外周血白细胞表面粘附分子(adhesion molecules,AMS)CD11 b、CD18、CD54的表达含量进行测定。结果实验组小鼠外周血白细胞表面CD11 b、CD18、CD54的阳性细胞百分率(PPC)和/或平均荧光强度(MFI)与对照组比较普遍上调:(P<0.05或P<0.01)。结论AMS在HAIV感染中发挥了重要作用。; 赵宏霞夏咸柱鲁继荣; 关键词：高致病性禽流感病毒 CD54 流式细胞术小鼠

高致病性禽流感病毒人工感染小鼠组织病理学观察: 2008年; 应用经SPF鸡胚增殖的虎源高致病性禽流感病毒A/Tiger/Harbin/01/2003(H5N1)株(其对MDCK细胞的TCID50为10-7.36/0.05mL),经滴鼻途径人工感染小鼠,无菌采取感染致死的小鼠和对照组小鼠的肺、脑等脏器进行了组织病理学、免疫组化以及透射电镜观察。结果显示:感染致死小鼠以肺脏损害最为明显。光镜观察,肺泡腔不同程度缩小,胞腔内有少量蛋白样浆液渗出,肺泡间隔不同程度增宽,肺内小血管及肺泡间隔的毛细血管扩张、淤血,支气管充血。免疫组化染色发现,在支气管上皮细胞、一些肺泡上皮细胞和浸润的单核细胞胞浆内见到该病毒抗原的阳性染色颗粒。电镜观察,小鼠肺泡扁平上皮细胞表面和肺泡腔中见到短杆型和圆型的流感病毒样粒子。; 常爽丁壮夏咸柱杨松涛徐明高玉伟邹啸环; 关键词：小鼠组织病理学免疫组织化学

HPAIV感染小鼠外周血白细胞表面CD54及其受体的检测: 2006年; 目的研究外周血白细胞表面CD54及受体CD11b／CD18在小鼠高致病性禽流感病毒（highly pathogenic avian influenza virus，HPAIV）感染中的作用。方法18～20g普通健康昆明小鼠60只，随机分为实验组和对照组，应用荧光标记的抗小鼠CD54、CD11b、CD18单抗，采用全血直接免疫荧光流式细胞术，对不同时相实验组和对照组小鼠外周血白细胞表面粘附分子（adhesion molecules，AMS）CD11b、CD18、CD54的表达含量进行测定。结果实验组小鼠外周血白细胞表面CD11b、CD18、CD54的阳性细胞百分率（PPC）和／或平均荧光强度（MFI）与对照组比较普遍上调（P〈0．05或P〈0．01）。结论AMS在HPAIV感染中发挥了重要作用。; 赵宏霞鲁继荣夏咸柱杨松涛高玉伟; 关键词：高致病性禽流感病毒 CD54 受体小鼠

小鼠HMGB1 B box基因的原核表达及其活性鉴定被引量：1: 2008年; 目的:克隆小鼠HMGB1 B box基因,表达具有明显致炎活性的鼠HMGB1 B box蛋白,为深入研究其生物学功能以及新型抗炎制剂的研发奠定基础,也为进一步探讨其与H5N1禽流感病毒性肺炎的相关性奠定了基础。方法:从小鼠的肺脏组织中提取总RNA,经RT-PCR扩增小鼠HMGB1中的B box的cDNA,构建于载体pMD-18T并进行序列测定,随后构建于原核表达载体pET-28a(+)中。IPTG诱导4小时后可见Mr约13000的蛋白。经Ni2+亲和层析柱纯化获得高纯度的HMGB1 B box蛋白,然后用此蛋白刺激小鼠外周血单核细胞(PBMCs),作用6小时后用ELISA检测PBMCs释放TNF-α、IL-6的含量。结果:经RT-PCR扩增得到了240bp的DNA片段,经序列分析与Genebank中报道的已知序列完全一致;成功构建了含有HMGB1 B box编码序列的原核表达载体;纯化表达的HMGB1 B box蛋白能显著地刺激小鼠PBMCs释放致炎因子TNF-α、IL-6,具有较好的生物活性。结论:原核表达的小鼠HMGB1 B box蛋白具有较好的生物活性,为进一步研究HMGB1 B box的作用机制以及新型抗炎制剂的研究奠定了基础。; 侯小强冯娜夏咸柱高玉伟孙培录杨松涛; 关键词：高迁移率族蛋白B1 BOX 原核表达活性鉴定

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国家自然科学基金(30471295)