中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(1630032012022)
- 作品数:5 被引量:4H指数:1
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- 相关机构:中国热带农业科学院山西农业大学海南大学更多>>
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- 山羊小热休克蛋白Hspb10基因cDNA克隆及序列分析
- 2013年
- 通过RT-PCR和RACE方法克隆了山羊Hspb10基因cDNA序列并进行了序列分析。结果表明:山羊Hspb10 cDNA全长1 056 bp,编码区全长780 bp,共编码259个氨基酸,提交至GenBank数据库中,收录号为JX067553。用Clustal W方法比对不同物种氨基酸序列同源性,山羊Hspb10与牛的同源性最高,核苷酸和氨基酸序列相似性分别为93.4%和96.5%;编码氨基酸序列BLAST比对结果也表明,哺乳动物Hspb10氨基酸序列极为保守,与禽类差异较大。获得山羊Hspb10 cDNA序列,可以为分子水平上研究山羊Hspb10的生物学功能奠定基础。
- 施力光曹婷侯冠彧周汉林荀文娟
- 关键词:山羊CDNA克隆
- 山羊睾丸生精细胞体外培养和鉴定
- 试验采用两步酶消化法对2月龄公羔睾丸进行处理,得到了总数为7.44×10的生精细胞悬液,经台盼蓝染色,细胞活率在90%以上;支持细胞的贴壁性极好,生精细胞附着在支持细胞上,随着培养时间延长,生精细胞、支持细胞逐渐退化,呈...
- 周汉林施力光侯冠彧荀文娟岳文斌杨茹洁
- 关键词:山羊睾丸生精细胞支持细胞共培养
- 文献传递
- PHGPx在体外共培养山羊睾丸生精细胞中的定位研究被引量:1
- 2012年
- 为探讨磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶(PHGPx)在雄性动物生殖机能中的作用及其在体外培养山羊睾丸生精细胞的定位,在已成功构建的山羊睾丸支持细胞-生精细胞共培养的基础上,制作细胞爬片,采用免疫细胞化学技术定位PHGPx的表达。结果显示,PHGPx在支持细胞、精原细胞中不表达,在圆形精子细胞细胞质检测到阳性表达产物。表明PHGPx在精子发生后期圆形精子的变态发育中起特定的调节作用,但作用机制有待深入研究。
- 施力光荀文娟岳文斌张春香周汉林侯冠杨茹洁
- 关键词:细胞免疫化学
- 海南黑山羊小分子热休克蛋白9cDNA克隆及其生物信息学分析被引量:2
- 2013年
- 本研究以海南黑山羊睾丸组织为材料,利用RT-PCR和RACE技术获得海南黑山羊小分子热休克蛋白9(small heat shock protein 9,Hspb9)基因完整的CDS序列,并对其进行生物信息学分析。结果表明,克隆得到山羊Hspb9cDNA长549bp,CDS区471bp,共编码157个氨基酸,提交至GenBank数据库中,登录号为:JX088726。生物信息学分析结果表明,Hspb9编码的蛋白无跨膜区和信号肽,存在多个磷酸化位点;预测Hspb9蛋白二级结构α-螺旋占15.28%,β-折叠占30.57%,无规则卷曲占54.15%;存在1个UBQ结构域;Clustel W方法比对山羊Hspb9与绵羊、牛的同源性最高。
- 施力光曹婷侯冠彧周汉林黄显洲荀文娟
- 关键词:海南黑山羊CDNA克隆生物信息学分析
- 山羊CREM基因的克隆与生物信息学分析被引量:1
- 2013年
- [摘 要]研究旨在克隆山羊睾丸CREM基因cDNA全序列并进行生物信息学分析.通过提取山羊睾丸总RNA,利用qPCR和RACE技术,扩增山羊PHGPx基因cDNA序列.结果表明,山羊睾丸CREM基因cDNA全长序列为1 183 bp(登录号:HM 802260),包含有960 bp的开放阅读框,编码319个氨基酸;山羊CREM蛋白二级结构功能区域属于bZIP转录因子家族,在319个氨基酸的序列中,73到115之间有一个“pKID”区域,259~316之间含有一个典型的“BRLZ”结构.构建蛋白质氨基酸分子进化树,结果显示山羊与牛亲缘关系最近.该研究结果将为CREM基因表达分子调控研究提供一定的理论依据.
- 施力光荀文娟张春香岳文斌侯冠彧周汉林
- 关键词:山羊RACE技术克隆生物信息学分析
- 山羊睾丸生精细胞体外培养和鉴定
- 2012年
- 试验采用两步酶消化法对2月龄公羔睾丸进行处理,得到了总数为7.44×10~9的生精细胞悬液,经台盼蓝染色,细胞活率在90%以上;支持细胞的贴壁性极好,生精细胞附着在支持细胞上,随着培养时间延长,生精细胞、支持细胞逐渐退化,呈现"集合"的趋势,细胞数量逐渐减少;经BrdU标记、H.E.染色,检测培养的生精细胞到分化到圆形精子细胞阶段,表明成功构建了山羊睾丸生精细胞共培养体系,可为后续深入研究山羊精子体外成熟培养提供一定的实验依据。
- 周汉林施力光侯冠彧荀文娟岳文斌杨茹洁
- 关键词:山羊睾丸生精细胞支持细胞共培养