南京军区医学科技创新课题(11MA072)
- 作品数：4 被引量：11H指数：3
- 相关作者：张雅雅王静刘涛万幼峰郭春华更多>>
- 相关机构：厦门大学中国人民解放军第一七四医院解放军第174医院更多>>
- 发文基金：南京军区医学科技创新课题厦门市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- LKB1协同二甲双胍影响宫颈癌HeLa细胞的增殖与凋亡及其可能的机制被引量：3
- 2014年
- 目的:探索肝脏激酶B1(liver kinase B1,LKB1或serine-threonine kinase 11,STK11)基因协同二甲双胍对人宫颈癌HeLa细胞增殖与凋亡的影响及其可能的机制。方法:构建含有LKB1基因的重组质粒LKB1-pEGFP-n1并转染HeLa细胞,MTT检测LKB1基因对经二甲双胍处理的HeLa细胞增殖的影响,流式细胞术检测对细胞周期和凋亡的影响,Western blotting检测对LKB1-AMPK信号通路相关蛋白AMPK、ACC和Rb磷酸化水平的影响。结果:LKB1-pEGFP-n1和空载体pEGFP-n1成功转染HeLa细胞,LKB1-pEGFP-n1转染细胞内稳定表达LKB1。二甲双胍处理LKB1-pEGFP-n1转染细胞的IC50显著低于pEGFP-n1转染细胞[(2.9±0.4)vs(7.8±1.3)mmol/L;t=-6.9921,P=0.002 2]及野生型HeLa细胞[(2.9±0.4)vs(9.6±1.5)mmol/L;t=-7.527 1,P=0.001 7]。经二甲双胍处理后,LKB1-pEGFP-n1转染细胞周期阻滞于G1期,而pEGFP-n1转染和野生型细胞周期无显著变化。二甲双胍作用剂量为15 mmol/L时,LKB1-pEGFP-n1转染细胞凋亡率较pEGFP-n1转染及野生型HeLa细胞显著增多[(28.6±2.3)%vs(9.6±1.6)%、(17.8±1.9)%,均P<0.05]。LKB1-pEGFP-n1转染细胞内AMPKα和ACC的磷酸化水平较pEGFP-n1转染和野生型细胞升高,Rb磷酸化水平降低。结论:LKB1能够协同二甲双胍影响HeLa细胞的增殖与凋亡,其可能通过LKB1-AMPK信号通路发挥作用。
- 包传恩张雅雅崔殿龙魏凌云郭明
- 关键词：宫颈癌HELA细胞二甲双胍
- Ovol2基因的过表达抑制肺腺癌细胞远处转移及侵袭力的研究
- 2016年
- 目的研究Ovol2基因对肺腺癌细胞上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)过程及其侵袭能力的影响,以期为肺腺癌的靶向治疗提供一定的理论基础。方法通过体外培养肺腺癌细胞株A549,并感染PLV-BSD-Ovol2及PLV-BSD-Control慢病毒形成实验组(过表达Ovol2)和对照组;通过实时荧光定量PCR实验(quantitative real-time PCR,Real-time PCR)检测与EMT相关基因的mRNA表达水平变化;用蛋白印迹法检测相关标记蛋白,如E-钙黏蛋白(E-cadherin)及波形蛋白(vimentin)的表达水平;划痕实验(wound healing)及侵袭实验(transwell)比较实验组和对照组细胞的转移和侵袭能力的变化。结果 Ovol2基因过表达后,不论在mRNA还是在蛋白表达水平,E-钙黏蛋白表达上升,N-钙黏蛋白及波形蛋白表达下降;同时肺癌细胞的转移和侵袭能力也相应被抑制。结论 Ovol2基因的过表达会通过抑制肺腺癌细胞的EMT过程来抑制其远处转移和侵袭力。
- 汪志海李忠杨清杰郭明
- 关键词：上皮-间质转化肺腺癌远处转移侵袭力
- Hsp90潜在抑制剂姜黄素诱导人宫颈癌Hela细胞凋亡的机制被引量：5
- 2014年
- 目的:研究姜黄素对人宫颈癌细胞Hela的抑制作用及对Hsp90信号通路的影响。方法:MTT法检测姜黄素对Hela细胞的增殖抑制作用。划痕实验检测姜黄素对细胞浸润侵袭的影响。流式细胞术检测姜黄素促进细胞凋亡的效果。Western blotting检测姜黄素对Hela细胞内Hsp90、Hsp70、AKT及Her-2蛋白表达的影响。结果:作用48h后,姜黄素对Hela细胞的增殖抑制呈现出显著的剂量依赖性(P<0.01),当药物浓度为100μmol/L时抑制率达到(87.5±3.5)%,IC50值为(41.8±2.3)μmol/L。划痕实验表明,姜黄素能抑制细胞的浸润和迁移。流式细胞结果显示,姜黄素能有效的促进Hela细胞凋亡,40μmol/L组细胞的凋亡率即从原来的(10.3±0.6)%提高至(19.1±1.5)%(P<0.05),当药物浓度达到100μmol/L时凋亡率达到(55.8±2.6)%。Western blotting结果显示,姜黄素能引起Hsp70蛋白表达上调,并促进Hsp90下游客户蛋白AKT及Her-2降解。结论:姜黄素表现出较强的抗Hela细胞活性,其机制可能是通过抑制Hsp90活性,影响相关信号通路引起的。
- 王静张雅雅刘涛郭春华万幼峰
- 关键词：姜黄素HSP90细胞凋亡
- 姜黄素对Hsp90的结合及抑制作用被引量：3
- 2015年
- 目的:研究姜黄素对Hsp90的结合及抑制作用。方法:采用分子模拟对接、等温滴定微量热法及Octet技术检测姜黄素与Hsp90的结合机制。采用变性荧光素酶再复性法检测姜黄素对Hsp90的抑制作用。结果:分子模拟对接结果显示姜黄素与Hsp90的ATPase区域有特异性结合。等温滴定微量热法及Octet测定二者的结合常数分别为2.84×104L/mol和9.79×104L/mol。荧光素酶复性法确定姜黄素能通过对Hsp9 0的抑制作用阻止其对变性荧光素酶进行修复,与阳性对照GA相比(IC50值为1.14μmol/L),姜黄素对Hsp90的IC50值为7.51μmol/L。结论:姜黄素与Hsp90有较强的结合且对其分子伴侣功能具有一定的抑制效果。
- 王静张雅雅刘涛郭春华万幼峰
- 关键词：姜黄素HSP90相互作用分子伴侣
