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TGF-β1基因修饰的树突状细胞对实验性自身免疫性重症肌无力大鼠外周血单个核细胞CD28／CTLA-4：B7表达的影响被引量：1: 2008年; 目的探讨TGF-β1基因修饰的树突状细胞（DC）对实验性自身免疫性重症肌无力（EAMG）大鼠外周血单个核细胞（PBMC）CD28／CTLA-4：B7表达的影响。方法近交系8～10周龄健康雌性Lewis大鼠30只．分为正常组、EAMG组、DC对照组、pcDNA3-TGF-β1-DC组、pcDNA3-DC对照组、生理盐水对照组。除正常组外．其余各组均采用丁氏双鳍电鳐电器官乙酰胆碱受体（AChR）蛋白二次免疫的方法复制EAMG大鼠模型。初次免疫后第5天分别皮下注射2×10^6的DC、pcDNA3-TGF-β1-DC、pcDNA3-DC及等体积的生理盐水，正常组和EAMG组不接受任何治疗。初次免疫后7周分离各组PBMC,应用RT-PCR和流式细胞术方法分别进行CD28、CTLA-4mRNA及B7-1、B7-2蛋白表达水平的检测。结果（1）正常组大鼠PBMCCD28、CTLA-4mRNA的表达水平较低，尤其CTLA-4mRNA极少量表达：EAMG组大鼠CD28、CTLA-4mRNA的表达水平均明显增加；pcDNA3-TGF-β1-DC组CD28mRNA的表达较EAMG组明显降低（氏0．01），而CTLA-4mRNA的表达水平较EAMG组明显增加（P〈0．05）；EAMG组、DC治疗组、pcDNA3-DC对照组和生理盐水对照组之间CD28、CTLA-4mRNA的表达水平无显著性差异（胗0．05）。（2）正常大鼠B7-1、B7．2在PBMC上少量表达；EAMG组B7-1、B7-2两者表达明显增加（P〈0．001）；pcDNA3．TGF-β1-DC治疗组B7-1、B7-2的表达较EAMG组均明显降低（P〈0．011；DC对照组、pcDNA3-DC对照组、生理盐水对照组与EAMG组比较均无明显差异（P〉0．05）。结论EAMG大鼠存在PBMCCD28／CTLA-4：B7协同刺激分子的表达异常，主动调节机体的共刺激通路可能是TGF-β1基因修饰的DC治疗EAMG的机制之一。; 王云甫孙圣刚曹学兵李罗清乔娴何国厚; 关键词：重症肌无力树突状细胞转化生长因子

TGF-β1基因修饰的树突状细胞移植对EAMG大鼠T淋巴细胞IFN-γ/IFN-γR表达的影响: 2009年; 目的探讨TGF-β1基因修饰的树突状细胞（Dc）移植对实验性自身免疫性重症肌无力（EAMG）大鼠T淋巴细胞IFN-γ分泌及其表面IFN-γ受体（IFN—γR）表达的影响。方法近交系、8～10周龄、健康雌性Lewis大鼠25只，随机分为健康对照组、EAMG组、DC对照组、pcDNA3-TGF-β1表达质粒转染的DC（pcDNA3-TGF-β1～DC）组与生理盐水对照组5组。除健康对照组外，各组均采用丁氏双鳍电鳐电器官乙酰胆碱受体（AChR）蛋白二次免疫方法复制EAMG大鼠模型。初次免疫后第5天分别皮下注射2×10^6DC、pcDNA3-TGF-β1—DC及等体积生理盐水，健康对照组和EAMG组不接受任何治疗。初次免疫后γ周，分离脾脏T淋巴细胞，分别应用酶联免疫吸附试验和免疫组化方法检测T淋巴细胞IFN-γ分泌及其表面IFN-γR表达水平。结果（1）体外培养48h后，健康对照大鼠T淋巴细胞上清液中IFN-γ水平很低，而EAMG组大鼠T淋巴细胞上清液中IFN-γ水平显著升高（P〈0．001）。pcDNA3-TGF-β1—DC治疗组IFN-γ水平与EAMG组差异无统计学意义（P〉0．05）。（2）健康对照大鼠T淋巴细胞经体外培养后可见少量IFN—γR阳性细胞，而EAMG组大鼠T淋巴细胞经体外培养后可见较多IFN—γR阳性细胞，其阳性细胞数及平均吸光度均明显高于健康对照组（P〈0．001）；pcDNA3-TGF—β1-DC组IFN-γR阳性细胞数较EAMG组明显增多，其阳性细胞平均吸光度亦明显高于EAMG组（均P〈0．01）。结论EAMG组大鼠T淋巴细胞IFN-γ分泌及其表面IFN-γR表达水平明显提高；pcDNA3-TGF-β1—DC治疗可进-步诱导IFN—γR表达，调节T淋巴细胞IFN—γ／IFN-γR表达可能是TGF-β1基因修饰的DC治疗EAMG的机制之-。; 王云甫孙圣刚李罗清乔娴何国厚; 关键词：重症肌无力转化生长因子-Β1 细胞移植

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湖北省自然科学基金(2006BA344)

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