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湖南省教育厅科研基金(04C381)

作品数：1 被引量：2H指数：1
相关作者：余凯曾凡军李敬业寇笑笑胡胜标更多>>
相关机构：湖南师范大学更多>>
发文基金：中国博士后科学基金湖南省教育厅科研基金国家自然科学基金更多>>
相关领域：生物学更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇生物学

主题

  • 1篇整合酶
  • 1篇链霉菌
  • 1篇杆菌
  • 1篇PMF
  • 1篇穿梭表达载体
  • 1篇大肠杆菌

机构

  • 1篇湖南师范大学

作者

  • 1篇夏立秋
  • 1篇王海龙
  • 1篇丁学知
  • 1篇全梅芳
  • 1篇余子全
  • 1篇胡胜标
  • 1篇寇笑笑
  • 1篇李敬业
  • 1篇曾凡军
  • 1篇余凯

传媒

  • 1篇微生物学报

年份

  • 1篇2010
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
大肠杆菌-链霉菌穿梭表达载体pMF的构建及其应用被引量：2
2010年
【目的】构建能定点整合到链霉菌（Streptomyces）染色体上的高效表达载体。【方法】以链霉菌自杀型表达载体pLSB2为基础,通过插入链霉菌噬菌体ΦC31整合酶基因int和attP位点（Phage attachment site）,构建了能在大肠杆菌和链霉菌之间进行接合转移并定点整合到链霉菌染色体上的表达载体pMF。将pMF转化大肠杆菌ET12567（pUZ8002）,并分别接合转移天蓝色链霉菌（Streptomyces coelicolorM145）、变铅青链霉菌（Streptomyces lividansTK24）和红色糖多孢菌（Saccharopolyspora erythraea2338）,挑取接合子进行PCR和Southern杂交检测。将来自刺糖多孢菌S08-4的S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因（SAM-s）克隆到载体pMF的启动子下游,接合转移到天蓝色链霉菌中。【结果】表明pMF成功整入链霉菌染色体,并且检测到目的蛋白的表达。【结论】构建的pMF载体可作为外源基因定点整合表达的有效工具,为后续的基因功能研究以及链霉菌的遗传改造奠定了基础。
全梅芳余凯夏立秋丁学知曾凡军寇笑笑王海龙胡胜标余子全李敬业
关键词：链霉菌整合酶
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