国家重点基础研究发展计划(2011CBA01006)
- 作品数：16 被引量：47H指数：4
- 相关作者：顾为望袁进王玉珏徐名衬刘薇更多>>
- 相关机构：南方医科大学东北农业大学广州医科大学更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>
- 不同辐射剂量对西藏小型猪小肠线粒体的影响被引量：1
- 2012年
- 目的观察不同剂量X线全身照射对西藏小型猪小肠线粒体的影响及其变化特点。方法将18头成年,健康,雄性西藏小型猪分为6组。实验组5组,对照组1组(n=3头/组)。分别接受2,5,8,11,14 Gy全身X线照射。照射后72 h麻醉处死并采集小肠组织分别检测线粒体相关基因的表达,线粒体呼吸链复合酶Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ和Ⅳ活性,线粒体琥珀酸氧化呼吸链和NADH氧化呼吸链的功能及观察线粒体的超微结构。结果 8 Gy以下剂量组的线粒体蛋白编码相关基因表达、呼吸链复合物活性及呼吸功能明显低于对照组且随放射剂量的增加而降低;而8 Gy以上剂量组,上述指标虽仍明显低于对照组,但不再随放射剂量的增加而继续降低并维持于一较低水平。电镜下线粒体超微结构在2,5 Gy时的改变主要表现为线粒体的扩张及轻微的电子密度降低。8 Gy及其后的剂量组则观察到更为明显的电子密度降低及线粒体的空泡化,嵴与线粒体外膜的连接缺失等。结论电离辐射导致的小肠线粒体损害在一定剂量范围内(8 Gy以下)随放射剂量的增加而愈发明显;但接受更高强度的照射后,其损伤程度并不会随放射剂量的增加而继续增加。
- 王玉珏郭凯陈驰吴少杰顾为望
- 关键词：线粒体小肠西藏小型猪
- 利用CRISPR/Cas9技术制备白化小鼠
- 目的本研究选择可视化毛色表型作为观察指标,应用CRISPR/Cas9技术敲除C57BL/6J小鼠酪氨酸酶基因(Tyrosinase gene,Tyr)致其黑色素合成障碍以制备白化表型小鼠,快速熟练掌握CRISPR/Cas...
- 陈傍柱； 顾鹏； 刘玉敏； 刘宇； 肖东； 顾为望；
- 文献传递
- 四烯雌酮对西藏小型猪同期发情的效果观察
- 目的研究四烯雌酮对西藏小型猪同期发情的影响方法将80头西藏小型猪分为4组,每组20头。第1、2组为经产母猪,日龄为400~430d;第3、4组为未经产母猪,日龄为210~240d;第1、3组单笼饲喂;第2、4组每组20头...
- 顾鹏； 陈傍柱； 顾为望；
- 关键词：西藏小型猪同期发情发情率
- 文献传递
- 多指标正交设计评价和优化巴马香猪精液冷冻稀释液被引量：1
- 2014年
- 该文通过多指标正交实验设计对巴马香猪精液冷冻稀释液中低密度脂蛋白(LDL,因素A)、海藻糖(因素B)和甘油(因素C)等3种保护剂联合使用时的作用进行评价,并分别对3种物质的最佳体积质量分数、摩尔浓度和体积百分比进行优化.结果表明3种保护剂对精子活率(TMS)、质膜完整性(PMI)和彗星率(CR)作用的主次顺序均为A>C>B,对精子顶体完整性(AI)作用的主次顺序为B>A>C;3种保护剂对TMS和PMI均有极显著的保护作用(p<0.01),对CR均无显著性作用(p>0.05);LDL和海藻糖对AI有显著的保护作用(p<0.05),甘油对AI无显性作用(p>0.05);通过因素与指标关系趋势图的绘制,发现由各个指标得到的最佳组合均为A2B3C2,且指标间的相关性均达到了显著水平(p<0.05).因此,用TMS,PMI,AI和CR评价巴马香猪冷冻-解冻后精液质量时,指标间不存在矛盾,用9%(w/v)低密度脂蛋白、200mmol/L海藻糖和2%甘油为巴马香猪精液冷冻稀释液中最优组合.
- 孔德营商海涛刘福慧韩勇魏泓张家骅
- 关键词：精液冷冻低密度脂蛋白甘油海藻糖
- 口服百草枯建立帕金森病模型及其评价研究被引量：7
- 2015年
- 通过模拟人类经消化道长期慢性暴露于百草枯的方式,建立大鼠帕金森病模型及对其进行评价。将大鼠随机分为高剂量组(20mg/kg百草枯)、中剂量组(10mg/kg百草枯)、低剂量组(5mg/kg百草枯)和对照组(生理盐水),每组16只,连续灌胃4个月后运用行为学检测系统、中脑黑质部及肺部病理学观察、高效液相色谱法检测纹状体多巴胺及其代谢物含量等进行分析及评价。给药4个月后,与对照组相比,中剂量组大鼠反应迟钝、动作僵硬、四肢震颤、学习记忆能力减退(P<0.01),中脑黑质神经元细胞明显萎缩,纹状体中的多巴胺及高香草酸含量分别下降了20.0%(P<0.01)和11.3%(P<0.01),且肺组织有明显损伤;低剂量组与对照组相比上述变化不明显。通过口服百草枯可建立具典型行为学变化和大脑黑质纹状体多巴胺能神经系统受损的大鼠帕金森病模型,这将为帕金森病的机制及防治研究提供理想的模型动物。
- 罗烘权袁进徐名衬郑春华王玉珏吴丽红顾为望
- 关键词：百草枯口服帕金森病
- 西藏小型猪肋软骨细胞的分离培养及鉴定
- 目的 分离培养西藏小型猪肋软骨细胞，并对其进行甲苯胺蓝染色鉴定。方法 取3日龄西藏小型猪，二步消化法分离培养西藏小型猪肋软骨细胞；对所分离培养的软骨细胞进行甲苯胺蓝染色。结果 成功分离培养西藏小型猪肋软骨细胞，甲苯胺蓝染...
- 刘薇史俊文陈佩雯张婷婷唐华袁进顾为望肖东
- 关键词：西藏小型猪软骨细胞甲苯胺蓝
- 新型封堵器应用于小型猪房间隔缺损的修复实验
- 2015年
- 目的在猪房间隔缺损动物模型上评价改良的封堵器有效性、安全性和相容性。方法选用西藏小型猪5头,利用房间隔穿刺结合囊扩张的方法建立房间隔缺损(atrial spetal defect,ASD)猪,用改良的封堵器进行房间隔封堵术,术后进行超声心动图、大体解剖、电镜扫描和光镜观察。结果 5只猪均成功建立了ASD模型并进行封堵术成功,超声心动图观察显示封堵器良好,位置固定,心腔和心肺功能正常。3个月后封堵器与房间隔组织紧密嵌合,表面覆盖一层较厚的光滑的白色组织,电镜下观察到大量心肌纤维,未发现内皮细胞。结论改良的ASD封堵器操作简便、安全性好,具有良好的生物相容性。
- 曹苹李安宁张德元刘香东施小立徐名衬顾为望
- 关键词：房间隔缺损小型猪封堵器
- 一种高效转染西藏小型猪胚胎成纤维细胞的方法被引量：1
- 2015年
- 目的应用Nucleofector II核转染仪将外源基因EGFP导入西藏小型猪胚胎成纤维细胞(PEFs),并与脂质体转染的方法进行比较,寻求一种高效转染猪胚胎成纤维细胞的方法。方法使用Lonza公司的Nucleofector II核转染仪,参考已报道的转染程序与相应的转染试剂,将绿色荧光蛋白(GFP)基因导入西藏小型猪PEFs,并与脂质体转染的方法进行对比研究,比较两种方法的转染效率。结果转染5 h后,核转染仪组镜下即可见绿色荧光,转染效率高达80%,远远高于脂质体转染的方法。结论用Nucleofector II核转染仪能实现西藏小型猪PEFs的高效转染,为高效制备转基因克隆西藏小型猪提供了可靠的方法。
- 刘薇陈燕岳敏袁进邱添武肖东顾为望
- 关键词：西藏小型猪胚胎成纤维细胞转染脂质体转染
- 3种腺相关病毒介导的绿色荧光蛋白对西藏小型猪胚胎成纤维细胞的转染效率被引量：1
- 2012年
- 目的比较3种不同血清型腺相关病毒(AAV)介导的绿色荧光蛋白对西藏小型猪胚胎成纤维细胞的转染效率。方法原代分离培养西藏小型猪胚胎成纤维细胞并进行形态学鉴定,按照感染复数(MOI)为103、104、105转染传代两次的猪胚胎成纤维细胞,流式细胞学检测不同血清型AAV对西藏小型猪胚胎成纤维细胞的转染效率,并在倒置显微镜下观察转染后绿色荧光的表达强度;同时,应用MTT方法检测不同血清型AAV对西藏小型猪胚胎成纤维细胞的毒性。结果腺相关病毒AAV2-EGFP对PFF的转染效率随MOI值的增加而增高,MOI为103、104、105时,转染效率分别为(33.68±1.18)%、(50.80±2.59)%和(60.08±1.08)%,而其他两种血清型病毒感染效率均低于AAV2-EGFP。3种病毒转染PFF过程中,细胞生长正常,MTT显示各个转染组与对照组(未转染组)在D570处吸光度无显著差异。结论AAV2血清型载体对体外培养的猪胚胎成纤维细胞的感染效率显著高于其他几种血清型,AAV8和AAV9对PFF感染能力极差,筛选AAV2作为西藏小型猪基因打靶的最适病毒载体;同时,3类血清型病毒载体对猪胚胎成纤维细胞均无明显细胞毒性。
- 黄威毛莹莹刘薇唐华揭飞龙李红卫顾为望
- 关键词：腺相关病毒西藏小型猪胚胎成纤维细胞绿色荧光蛋白流式细胞技术
- 野百合碱诱导的肺动脉高压小型猪的肺病理改变被引量：6
- 2012年
- 目的观察野百合碱诱导小型猪肺动脉高压模型不同时期心肺组织的病理变化。方法12 头雄性西藏小型猪，4.0~4.5月龄，体质量15.0~18.0 kg。测定12 头小型猪平均肺动脉压作为基础值；然后选择10 头小型猪腹腔注射野百合碱（MCT）10.0 mg/kg；给药4周和8周后再分别测定小型猪平均肺动脉压。分别于4、8周处死两头小型猪，采样观察小型猪心肺组织病理改变情况。结果给药4 周和8 周后，西藏小型猪的肺动脉压力与人体相近，正常平均肺动脉压约为（15.19±0.70） mmHg（1 mmHg=0.133 kPa）；给药4周后平均肺动脉压升至（19.69±2.47） mmHg；给药8周后升至（25.62±4.88） mmHg，与基础压相比均有显著差异（P〈0.01）。组织病理学分析显示，给药4 周后即可形成有意义的病理改变, 右心室肥厚；8周后有明显的病理学改变，如右心室纤维化和肺动脉中层增厚。结论MCT给药8周后，造成肺动脉压力升高和肺血管重构，可以诱导西藏小型猪形成慢性肺动脉高压模型。
- 赵瑾刘蓉李洪涛张新凤刘宝骅吴清洪钱元新顾为望
- 关键词：肺动脉高压野百合碱小型猪动物模型
