安徽省自然科学基金(050430902)
- 作品数：33 被引量：120H指数：7
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- 胃功能三项联合Hp抗体对胃癌及癌前病变的鉴别诊断价值被引量：6
- 2018年
- 目的:探讨胃功能三项联合幽门螺杆菌(Hp)抗体对胃癌及癌前病变的鉴别诊断价值。方法:收集我院2014年5到2017年8月收治的胃癌患者34例(胃癌组)、癌前病变患者46例(癌前病变组),抽取研究对象空腹静脉血5 mL,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清胃蛋白酶原-I(PG-I)、血清胃蛋白酶原-II(PG-II),并计算PG-I/PG-II(PGR)值,采用胶体金法或胶乳免疫比浊法检测HP抗体,比较两组胃功能三项及HP抗体阳性率差异,分析胃功能三项联合HP抗体鉴别诊断价值。结果:胃癌组血清PG-Ⅰ和PGR水平低于癌前病变组(P<0.05),胃癌组与癌前病变组血清PG-Ⅱ水平、HP抗体阳性率比较差异无统计学意义(P>0.05)。胃癌组HP抗体阳性者和阴性者血清PG-Ⅰ、PG-Ⅱ、PGR水平比较差异均无统计学意义(P>0.05),癌前病变组HP抗体阳性者血清PG-Ⅰ水平明显低于HP抗体阴性者,差异具有统计学意义(P<0.05)。并联检查胃癌和癌前病变的准确度分别为67.6%(23/34)、43.5%(20/46),高于串联的14.7%(5/34)、6.5%(3/46),差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:Hp感染可能导致PG-Ⅰ降低,具有癌前病变风险,再降低可能具有胃癌风险,临床上根据胃功能三项筛检早期胃癌并且辅助HP检测可早期诊断胃癌。
- 金鑫李树锦陈贞杨善峰严波金娟
- 关键词：HP抗体胃癌癌前病变
- 实时荧光PCR监测HBV感染患者拉米夫定治疗病毒YMDD变异被引量：9
- 2007年
- 目的 建立一种快速准确的实时荧光PCR方法检测HBV感染患者经拉米夫定治疗后YMDD变异情况。方法 首先用PCR法筛选HBVDNA阳性血清157例，HBVDNA含量为2．0×10^3-8．0×10^8拷贝／ml，HBVDNA阴性血清30例，然后采用TaqMan探针技术和选择性引物的实时荧光PCR对其进行YMDD变异检测。通过变异株和对照管的循环阈值（cyclethreshold，Ct值）差来计算血清中总HBV中的YMDD变异株含量，并用PCR产物直接测序方法随机对69例HBVDNA阳性标本RT区进行基因序列分析，验证所建立方法的准确性。结果 187例接受拉米夫定治疗患者血清标本中，发生YMDD变异88例，其中YIDD变异39例，YVDD变异38例，YIDD与YVDD混合变异11例。突变株的含量为10％～100％。30例HBVDNA阴性血清的C管循环40次，69例测序结果显示68例两种方法检测结果完全相同，符合率为98．55％。结论 采用选择性引物和TaqMan探针技术建立实时荧光PCR方法能快速准确地检测YMDD变异情况，并能检测患者变异株在HBV总量中的比例，为临床使用拉米夫定治疗乙型肝炎病毒感染监测耐药性提供一种有效方法。
- 孙余婕沈佐君吴赟高人焘李宜杨志军
- 关键词：乙型拉米夫定
- 氨甲蝶呤多聚谷氨酸的检测及其临床应用价值被引量：4
- 2008年
- 氨甲蝶呤多聚谷氨酸(methotrexate polyglutamate,MTXPG)为氨甲蝶呤(methotrexate,MTX)在细胞内的代谢产物,其蓄积程度决定着MTX的细胞毒性和治疗效果。MTXPG的检测有利于监测其在细胞内的浓度,指导临床用药和预后判断。本文就MTXPG在细胞内的代谢过程、检测方法及其在临床疾病治疗中的应用价值做一综述。
- 李明沈佐君
- 甲氨蝶呤对映体诱导肺癌细胞耐药后引起血管内皮细胞分化差异的研究被引量：2
- 2009年
- 目的研究甲氨蝶呤（MTX）对映体大剂量冲击作用肺癌A549细胞后，MTX对映体耐药细胞血管分化是否具有手性选择性。方法用大剂量冲击法诱导获得A549对映体耐药肺癌细胞，流式细胞双色分析细胞CD44／CD31以及P-170表达；皮下接种裸鼠，成瘤后取瘤体切片，进行CD34组化染色，计数新生微血管密度（MVD）。以A549亲本细胞（未获得耐药）作为对照组。结果分别建立耐药浓度为15μmol／L的L—MTX和D—MTX的A549耐药细胞株；它们与各自对映体的耐药指数分别为12．4±1．2和20．14-2．3；A549亲本细胞、L—MTX耐药细胞和D．MTX耐药细胞中：CD31’阳性率分别为55．5％±9．7％、32．9％±8．O％和91．9％±3．2％，差异有统计学意义（F=511．92，P=0．000）；P-170阳性率分别为85．5％±4．6％、71．5％±8．2％和87．0％±8．9％，L—MTX耐药细胞P-170的阳性率低于D．MTX耐药细胞（t=6．13，P=0．002）；3种细胞植入裸鼠成瘤后切片免疫标记CD34统计新生MVD，A549亲本细胞为3．6±1．2，L-MTX耐药细胞为7．24-1．7，D-MTX耐药细胞为55．9±11．9，D．MTX耐药细胞显著高于L—MTX耐药细胞（t=13．37，P=0．000）。结论MTX对映体诱导肺癌A549耐药细胞向血管内皮细胞分化能力不同，D—MTX耐药细胞经血管转移高于L．MTX耐药细胞，这提示MTX制剂中D型组分不能简单当成污染物而忽视，应尽量选用单-对映体的L-MTX药物制剂，减少D—MTX带来的副作用。
- 何晓东胡世莲沈佐君陶绍能董林朱园园李明
- 关键词：抗药性甲氨蝶呤细胞分化对映体
- 高效毛细管电泳测定海马组织和脑脊液中氨基酸类神经递质被引量：8
- 2007年
- 目的建立测定大鼠海马组织和人脑脊液中氨基酸类神经递质的高效毛细管电泳分析方法。方法用高效毛细管电泳技术,选用总长60 cm、有效长度50.5 cm、直径75μm熔融石英毛细管,在20 kV电压下快速分离4种氨基酸。以100 mmol/L硼酸-三羟甲基氨基甲烷（Tris）（1∶1,含1%异丙醇）为电泳缓冲液（pH值为10.35）,激光诱导荧光检测器进行检测,并对此方法进行方法学评价。同时检测45例患者脑脊液的氨基酸含量。结果谷氨酸（GLU）、天冬氨酸（ASP）、γ-氨基丁酸（GABA）、甘氨酸（GLY）4种氨基酸能在15 min内分离,线性范围为1.0~100.0μmol/L,GLU、ASP、GABA、GLY最低检出限分别为10、23、18、15 nmol/L,4种氨基酸的批内精密度范围4.44%~9.72%,批间精密度范围6.96%~10.50%。4种氨基酸的回收率不低于88.1%。全面性大发作癫痫患者GLU、GLY、ASP含量显著高于对照组（P〈0.05）,而GABA较对照组差异无统计学意义;复杂部分性发作癫痫患者4种氨基酸含量较对照组显著增加（P〈0.05）。结论高效毛细管电泳具有快速、灵敏、准确的特点,为临床和科研提供了一种有效的方法。
- 宣柳沈佐君何晓东伊茂礼金鑫鲁明傅先明
- 关键词：神经递质高效毛细管电泳
- 实时荧光定量PCR方法检测乙型肝炎病毒基因型被引量：5
- 2009年
- 目的建立一种快速准确的实时荧光PCR方法检测乙型肝炎病毒基因型。用此方法对安徽地区乙肝患者进行检测,了解该地区HBV基因型分布情况。方法首先用实时荧光定量PCR方法对150例安徽地区乙肝患者进行HBVDNA定量检测和分型检测,然后对其中载毒量大于5000IU/mL的113例标本和1例1000IU/mL≤载毒量<5000IU/mL进行测序分型检测,验证所建立方法的准确性,了解安徽地区HBV基因型分布情况。结果150例HBV样本中HBVDNA含量<1000IU/mL30例,分型检测结果均为阴性,对载毒量≥5000IU/mL的样本检出率为97.35%(110/113);对1000IU/mL≤载毒量<5000IU/mL的样本检出率为14.29%(1/7);对全部DNA阳性样本的检出率为92.5%(111/120)。HBV分型检测与HBVDNA测序检测的114例样本中,只要是HBVB基因型、C基因型或B/C混合型,乙型肝炎病毒基因分型检测都能检出来(共111例),其中部分样本经分型检测属于B/C混合基因型,测序结果都是混合基因型中占优势的基因型结果,总体符合率为100%。未能被本法检出的样本共3例,3例样本经测序分型均为D型。120例病毒载毒量≥1000IU/mL乙肝患者中B型病例占51.67%(62/120);C型占29.17%(35/120);B/C混合型占11.67%(14/120)。PCR测序检出为D型3例,占2.5%(3/120)。结论应用TaqMan探针的实时荧光定量PCR方法能快速对我国HBV主要基因型B基因型、C基因型进行检测,结果准确可靠,特异性高。安徽地区的HBV基因型以B型为主,C型次之,亦存在着D型的少数感染病例和B/C的混合感染。
- 孙余婕沈佐君
- 关键词：乙型肝炎病毒聚合酶链反应基因型
- 叶酰多聚谷氨酸合成酶与肿瘤耐药被引量：2
- 2010年
- 叶酰多聚谷氨酸合成酶(folyl-polyglutamate synthetase,FPGS)是近几年来研究比较多的肿瘤耐药靶酶之一。随着人们对其在基因组学和蛋白组学研究的逐渐深入,涉及FPGS(分胞浆型cFPGS和线粒体型mFPGS两种异构体)与肿瘤耐药的研究也越来越多。本文就FPGS结构、功能、生化特点及其与肿瘤耐药关系作一综述,并探讨其在临床的应用前景和意义。
- 孙利沈佐君
- 关键词：肿瘤抗药性
- 表皮生长因子受体介导的信号转导与肿瘤侵袭、转移的关系研究进展被引量：8
- 2008年
- 表皮生长因子受体(EGFR)属受体酪氨酸蛋白激酶,在多种肿瘤中表达或高表达。与配体结合后传递信号至细胞核内,调节基因的表达。参与生长、分化、增殖、血管发生和凋亡等多种细胞功能的调节。肿瘤的侵袭、转移是一个复杂的过程,也是导致肿瘤患者死亡的主要原因。本文就EGFR的结构、信号转导及其在肿瘤的侵袭和转移中的作用作一综述,为肿瘤的靶向治疗提供新思路。
- 陶绍能沈佐君
- 关键词：信号传导肿瘤侵润肿瘤转移
- 二氢叶酸还原酶与肿瘤耐药被引量：2
- 2010年
- 二氢叶酸还原酶是核酸代谢中的关键酶之一,是肿瘤化疗药物的主要靶酶。随着人们对其在基因水平研究的逐渐深入,发现氨甲蝶呤的靶酶二氢叶酸还原酶是引起耐药的主要原因。本文就二氢叶酸还原酶结构、功能及其与肿瘤耐药关系作一综述,并探讨其在临床的应用前景和意义。
- 李道静沈佐君
- 关键词：二氢叶酸还原酶肿瘤氨甲蝶呤抗药性
- 氨甲蝶呤对映体耐药A549细胞株的建立及其生物学特征被引量：11
- 2009年
- 目的诱导并建立耐氨甲蝶呤对映体的A549细胞株并观察耐药细胞系(L-(+)-MTX/A549、D-(-)-MTX/A549)的生物学特性。方法以MTX对映体为诱导剂,采用浓度递增结合低剂量持续诱导方法诱导A549细胞株,建立MTX不同对映体耐药细胞系;倒置相差显微镜观察细胞形态变化;MTT法绘制细胞生长曲线;MTT法检测耐药细胞株的耐药指数;流式细胞仪检测细胞周期和细胞的分裂增殖能力。结果L-(+)-MTX/A549、D-(-)-MTX/A549耐药指数分别为6.0的和20.2。倒置相差显微镜观察细胞形态发生了改变;细胞生长曲线显示D-(-)-MTX/A549的增殖略慢于亲本细胞,而L-(+)-MTX/A549的增殖最慢;流式细胞仪检测细胞周期结果显示L-(+)-MTX/A549、D-(-)-MTX/A549耐药细胞株S期细胞数量减少(P<0.05),G0/G1期细胞增多(P<0.05);CFSE检测A549、L-(+)-MTX/A549、D-(-)-MTX/A549的MFI分别为(6.08±0.55)、(7.72±0.30)、(6.90±0.18)。两对映体细胞株间有明显手性差异。结论本研究建立了MTX两种对映体耐药细胞株,为进一步研究其耐药机制提供了一种实验模型。
- 陶绍能何晓东董林李明朱园园孙自敏沈佐君
- 关键词：氨甲蝶呤A549细胞对映体
