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国家科技支撑计划(2012BAD12B03): 作品数：104 被引量：587H指数：13; 相关作者：张世栋严作廷王东升李宏胜杨峰更多>>; 相关机构：中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所甘肃农业大学四川省畜牧科学研究院更多>>; 发文基金：国家科技支撑计划甘肃省科技支撑计划甘肃省农业科技创新项目更多>>; 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程理学更多>>

黑龙江省部分规模化奶牛场布鲁菌病血清抗体回顾性检测与示范场净化效果评价被引量：1: 2014年; 采用间接ELISA、竞争ELISA对2009-2011年采自黑龙江省16个奶牛场的4 830份血清样本进行回顾性检测,并对此期间的2个布鲁菌病净化示范场样本进行验证性检测,以期了解2009-2011年间黑龙江省布鲁菌血清学状况,并对布鲁菌病牛净化示范场的净化效果进行评价。结果显示,2009-2011年间黑龙江省部分规模化奶牛场布鲁菌血清抗体阳性率较低;2个布病净化示范牛场连续三年始终保持在布鲁菌病净化水平;采用"检疫+扑杀"的净化流程后,2个规模化奶牛场达到净化水平,说明其布鲁菌病净化程序具有实践意义,值得推广。; 邵建伟刘洪涛曹永生张润祥曹翀彭统全张永根张维银甘文平罗清华高明春王君伟; 关键词：酶联免疫吸附试验

紫外分光光度法对催情助孕液中总黄酮含量的测定被引量：1: 2014年; 采用紫外分光光度法测定催情助孕液中总黄酮的含量。以淫羊藿苷为对照品，甲醇作空白对照，在270 nm处测定其吸光度，计算总黄酮含量。结果表明，淫羊藿苷在1.68~10.08μg/mL内线性关系良好，相关系数为0.9995，总黄酮平均回收率为99.29%，为1.20%。催情助孕液中总黄酮含量为1.3179%。采用紫外分光光度法测定催情助孕液中总黄酮的含量，操作快速、简便、准确，适用于催情助孕液中总黄酮含量的测定。; 王东升张世栋苗小楼董书伟严作廷; 关键词：总黄酮紫外分光光度法

用主成分分析法研究腹泻仔猪血清生化指标被引量：3: 2015年; 为了研究腹泻对仔猪血清生化指标的影响,本试验采集了20头腹泻仔猪（7-8日龄）和10头健康仔猪（与腹泻仔猪同日龄、同性别）的粪便和血清。荧光定量PCR法对粪便进行病原学检测,对采集的血清用血生化分析仪进行检测,并利用主成分分析法对其结果进行分析。结果,（1）20头腹泻仔猪粪便的猪流行病腹泻病毒检测结果均为阳性。（2）十二项血清生化指标被转化成了综合性更强的4个主成分,根据这4个主成分进行的聚类分析的结果和临床采集样品的分类结果一致。（3）腹泻仔猪的血清球蛋白、尿素和肌酐水平显著升高（P〈0.05）。结果表明,由猪流行性腹泻病毒引发的腹泻,可能导致仔猪体内的蛋白质代谢紊乱、肝脏和肾脏的机能受损。; 黄美州刘永明王慧王胜义崔东安李胜坤齐志明; 关键词：仔猪腹泻主成分分析生化指标

PCR诊断技术用于奶牛乳房炎病原菌快速检测的研究进展被引量：1: 2017年; 奶牛乳房炎是一种严重影响奶牛业发展的常见多发病,不仅给乳品业造成巨大的经济损失,而且还影响乳品质量,危及人类健康。目前,对于奶牛乳房炎的治疗大部分奶牛场基本都是在不明确病原菌的情况下滥用抗生素,造成病原菌耐药性增加,治疗效果下降。为了有效治疗奶牛乳房炎,对奶牛乳房炎病原菌的早期快速诊断至关重要。由于传统的乳房炎病原菌的检测方法存在操作繁琐、耗时长、灵敏度低及无法检测抗生素乳样中病原菌等缺陷,因此,临床上急需一种快速、灵敏、简便的检测方法。作者对目前用于奶牛乳房炎病原菌诊断的普通PCR法、多重PCR法、实时荧光定量PCR法、巢氏PCR诊断法以及PCR检测试剂盒等进行了综述,并分析了这些方法的优缺点,同时对未来奶牛乳房炎病原菌诊断的研究方向和前景进行了展望,以期为进一步开发快速、特异、敏感的奶牛乳房炎病原菌诊断技术提供理论参考。; 王丹杨峰李新圃罗金印张哲刘龙海张亚茹张莉莉李宏胜; 关键词：PCR 奶牛乳房炎病原菌

牛源金黄色葡萄球菌感染小鼠后药物敏感性变化及其诱导的氧化应激被引量：9: 2013年; 为探讨牛源金黄色葡萄球菌感染小鼠前后对抗菌药物的抗性变化以及该菌感染小鼠后对其肝脏、肾脏和脾脏组织的氧化功能的影响,将20只昆明小鼠随机分为2组,分别为空白对照组和牛源金黄色葡萄球菌感染组。采用纸片扩散法(K-B法)分别对试验菌(感染前)和分离菌(感染后)进行药敏试验;采用比色法分别测定肝脏、肾脏和脾脏组织的总抗氧化能力(T-AOC)与脂质过氧化产物(TBARS),并进行统计学分析。结果显示,分别从感染组小鼠的肾脏和脾脏中分离出金黄色葡萄球菌,肝脏中未分离出。洁霉素、万古霉素、阿莫西林、链霉素、新霉素、庆大霉素、先锋霉素、氨苄西林、强力霉素、氟氧头孢、复方新诺明、四环素、红霉素、卡那霉素、氟苯尼考、恩诺沙星、诺氟沙星和磺胺异噁唑18种药物对分离菌的抑菌圈直径显著小于对试验菌的相应抑菌圈直径(P<0.01),18种药物对感染后肾脏和脾脏的分离菌的相应抑菌圈直径差异均不显著;试验菌和分离菌对青霉素G和杆菌肽不敏感,而对其他18种药物均显示为高度敏感;金黄色葡萄球菌感染小鼠10d后,与空白对照组相比,感染组小鼠的肝脏、肾脏和脾脏组织的T-AOC均显著降低(P<0.01),而相应组织中的TBARS均显著升高(P<0.01)。结果表明,从感染组肾脏和脾脏组织中分离出的金黄色葡萄球菌较感染前对抗菌药物的抗性会增强;牛源金黄色葡萄球菌感染小鼠后能诱导肝脏、肾脏和脾脏组织处于氧化应激状态。; 杨峰王旭荣田永刚王玲李新圃罗金印李宏胜; 关键词：金黄色葡萄球菌药物抗性总抗氧化能力脂质过氧化氧化应激

催情助孕液对小鼠雌、孕激素水平及其受体mRNA表达的影响被引量：8: 2013年; 分别以0.1、0.2、0.4mL/d剂量的催情助孕液给21日龄小鼠灌服7d后,检测体质量、脏器指数、血清雌激素和孕激素水平、子宫组织中雌激素和孕激素受体基因mRNA的表达情况,并与腹腔注射雌二醇4d的小鼠进行比较。结果显示与对照组和雌二醇注射组比较,0.2mL的催情助孕液能显著促进小鼠子宫发育,并增强雌激素水平及其受体基因表达,而对孕激素水平及其受体基因表达无显著影响。结果表明,催情助孕液对动物生殖发育与促进发情具有较好的效果。; 张世栋王旭荣杨峰李宏胜潘虎王东升严作廷; 关键词：雌激素孕激素雌激素受体-Α 孕激素受体

奶牛乳房炎综合防控关键技术研究进展被引量：22: 2015年; 奶牛乳房炎是一种给奶牛养殖业造成极大经济损失的常见多发病。目前的研究表明,采取综合防控技术是控制本病最有效的方法。文章综述了奶牛乳房炎发病情况、病因、发生规律及造成的危害、引起奶牛乳房炎的主要病原菌及其区系分布状况、乳房炎诊断方法、治疗药物及疫苗研制等最新研究进展,同时还对奶牛乳房炎综合防控技术的前景进行了展望,以期为更好地防治奶牛乳房炎提供借鉴和参考。; 刘龙海李新圃杨峰罗金印王旭荣张哲李宏胜; 关键词：奶牛乳房炎病原菌疫苗

奶牛子宫内膜组织抗菌肽分离纯化及其抗菌活性研究被引量：1: 2014年; 目的:研发奶牛抗菌肽生物制剂,防治奶牛子宫内膜疾病。方法:采用酸性尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳和琼脂糖弥散法检测子宫内膜组织酸溶性提取物抗菌活性;应用琼脂糖电泳及水平电泳洗脱分离出相应的抗菌条带,HPLC进一步分离纯化,琼脂糖弥散法检测纯化物的抗菌活性,Tricine-SDS-PAGE电泳检测其分子量。结果:粗提物中有两种主要的抗菌成分,其对金黄色葡萄球菌26003、大肠杆菌BL-21、牛致病性大肠杆菌4605、绿脓杆菌10104具有抗菌活性。上层条带的主要色谱峰出现在43、45 min,其中45 min收集的样品有较强的抗菌活性,其相对分子质量约为14 k Da。下层条带主要色谱峰出现在5、35、43、45、46、47、50 min,其中35、43、45 min收集的样品有抗菌活性,其相对分子质量分别约为14-16、6和12 k Da。各个组分对大肠杆菌BL-21和金黄色葡萄球菌26003均具有抑菌活性。结论:从奶牛子宫内膜组织分离出了5个抗菌成分,从相对分子质量、抗菌活性等方面初步认定为抗菌多肽。; 王东升米宝明荔霞张世栋李世宏宗瑞谦祝秉东王桂荣严作廷; 关键词：子宫内膜奶牛抗菌肽分离纯化

奶牛隐性乳房炎诊断液中阴离子活性物的含量测定被引量：1: 2014年; 【目的】以含量测定为重点，开展奶牛隐性乳房炎诊断液的质量标准研究，为规范诊断液的技术标准提供参考。【方法】建立直接两相滴定法测定奶牛隐性乳房炎诊断液中的阴离子活性物含量，并以诊断液LMT为例，进行方法的准确度、精密度和专属性评价。【结果】准确度分析结果显示，RE为-0.86%（-3.88%-3.06%）；精密度分析结果显示，日内RSD为0.57%-3.14%，日间RSD为2.19%；专属性分析结果显示，LMT中的辅料成分不影响阴离子活性物的测定。直接两相滴定法测定LMT中的阴离子活性物，具备必要的准确度、精密度和专属性。【结论】因为无论是组成还是技术，LMT均能代表同类的诊断液，所以直接两相滴定法可作为奶牛隐性乳房炎诊断液的含量测定方法。; 李新圃罗金印李宏胜杨峰; 关键词：表面活性剂

金黄色葡萄球菌培养基的筛选及发酵条件的优化研究被引量：3: 2018年; 为提高金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)发酵产生的菌体及荚膜多糖产量,对4种不同培养基(THB肉汤、哥伦比亚液体培养基、营养肉汤和脑心浸出液)进行了筛选,利用单因素及正交试验对培养条件进行了优化,并通过透射电镜对优化前后细菌的荚膜进行了比较观察。结果表明,添加2%乳清的哥伦比亚液体培养基最适合金黄色葡萄球菌的生长,优化后的培养条件为发酵液p H 7.0,接种量1%,37℃、200 r/min培养至16 h。与优化前相比,菌体产量提高了20%;电镜观察表明,有荚膜菌体的数量增加且荚膜层增厚。本研究为后期多糖疫苗的研究提供参考。; 张哲李新圃杨峰罗金印刘龙海李宏胜; 关键词：金黄色葡萄球菌培养基

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