安徽省高校省级自然科学研究项目(2006KJ381B)
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
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- 重组高频干扰素的生物合成及其活性鉴定被引量：1
- 2011年
- 验证通过分子信息理论预测获得的高频干扰素(HFINF)抗病毒活性。以软件InsightⅡ和CE预测获得高频干扰素基因序列,通过分子克隆技术,将高频干扰素基因克隆到pGEX-4T-2载体中,构建高效表达质粒pGEX-4T-2-HFIFN,转化至大肠杆菌E.coliBL21(DE3)中,构建高效表达菌株,通过优化培养条件,逐级扩大培养、收集菌体,裂解菌体,将表达产物通过GST柱纯化,经SDS-PAGE鉴定,获得高纯度的HFIFN。结果表明,在菌体密度OD约为0.6时,加入体积浓度为1 mmol/L的IPTG,25℃下诱导4 h可获得含量最高的可溶性表达,将纯化的高频干扰素,通过HA细胞培养,加入VSV病毒验证实验,鉴定重组高频干扰素抗病毒活性。结果表明重组高频干扰素具有抗病毒活性,分子信息理论和实践是吻合的,这为进一步研究奠定了基础。
- 宋静尹登科周丽丽汪兴生
- 关键词：纯化活性鉴定
