国家自然科学基金(81370494)
- 作品数：22 被引量：140H指数：8
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- 拉克替醇和婴儿双歧杆菌对便秘大鼠AQP3及ICC的影响被引量：8
- 2015年
- 目的探讨拉克替醇和婴儿双歧杆菌改善大鼠便秘的作用机制及其对结肠水通道蛋白3（aquaporin 3，AQP3）、Cajal间质细胞（interstitial cells of Cajal，ICC）的影响。方法SD大鼠30只，随机选取6只为对照组，其余大鼠连续5d给予洛哌丁胺灌胃建立便秘模型后随机分为模型组、拉克替醇组、婴儿双歧杆菌组、联合组。连续治疗7d，测定大鼠摄食量、摄水量、体重、粪便含水量及小肠推进率。ELISA法测定各组大鼠血清中P物质（substance P，SP）、血管活性肠肽（vasoacfive intestinal peptide，VIP）含量的变化。Real—time PCR检测结肠蛋白激酶A（protein kinase A，PKA）、速激肽受体1（neurokinin-1 receptor，NK-1）mRNA的表达情况；Western blot、real-time PCR检测结肠AQP3、ICC蛋白和mRNA表达量的变化。结果与模型组相比，各治疗组的粪便含水率、小肠推进率、血清中VIP、SP含量均增加，结肠中PKA、NK-1 mRNA的表达量提高，AQP3、ICC蛋白及mRNA的表达量也明显提高，且差异有统计学意义（P〈0．05）。其中联合组效果最为明显，拉克替醇组次之，婴儿双歧杆菌组效果欠佳。结论拉克替醇和婴儿双歧杆菌能够提高大鼠血清中SP和VIP的含量，SP可以与ICC表面的NK-1受体相结合，促进胃肠道平滑肌收缩，加快肠道蠕动，利于粪便排出。VIP亦可通过cAMP—PKA途径增强AQP3 mRNA和蛋白的表达，促进肠道内水分吸收，软化粪便，改善便秘。
- 丁一芮郑鹏远李付广黄煌白利梅刘思濛
- 关键词：便秘拉克替醇婴儿双歧杆菌水通道蛋白3CAJAL间质细胞
- 抗坏血酸对幽门螺杆菌相关萎缩性胃炎小鼠的干预
- 2020年
- 目的研究不同浓度抗坏血酸(ascorbic acid)溶液对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)相关萎缩性胃炎小鼠模型的作用。方法将C57BL/6小鼠随机分为5组,每组10只。组1为空白对照组,余4组小鼠用幽门螺杆菌悉尼菌株(Helicobacter pylori-Sydney strain 1,H.pylori-SS1)感染2周,快速尿素酶法和免疫组织化学法检测H.pylori-SS1的定植;组3、组4和组5小鼠分别给予抗坏血酸低倍剂量(0.1 g/L)、中倍剂量(0.5 g/L)和高倍剂量(1.0 g/L)灌胃22周。灌胃结束后,处死所有小鼠取胃组织和血清,H&E染色观察组织学变化,ELISA检测血清胃泌素(gastrin)和白介素8(IL-8)水平。结果与H.pylori组相比,抗坏血酸干预组胃组织萎缩程度减轻、血清胃泌素水平升高、炎症因子水平降低(组2 vs组3:F=21.730,P=0.029;组2 vs组3:F=42.781,P=0.015;组2 vs组3:F=35.720,P=0.021),中倍剂量组较低倍剂量组有更显著的作用(组3 vs组4:F=21.730,P=0.041;组3 vs组4:F=42.781,P=0.034;组3 vs组4:F=35.720,P=0.043),但高倍剂量组与中倍剂量组差异无统计学意义(组4 vs组5:F=21.730,P=0.125;组4 vs组5:F=42.781,P=0.391;组4 vs组5:F=35.720,P=0.450)。结论抗坏血酸干预可减轻小鼠H.pylori相关萎缩性胃炎症状,高剂量抗坏血酸与中低剂量比无显著差异。
- 张晗于泳刘云米阳孙向东刘思濛李进鹏秦珍珍
- 关键词：幽门螺杆菌萎缩性胃炎小鼠抗坏血酸
- 酪酸杆菌联合谷氨酰胺对应激小鼠肠道紧密连接蛋白表达的影响被引量：1
- 2014年
- 目的 研究肠道黏膜通透性在IBS致病过程中的作用机制和评价酪酸杆菌联合谷氨酰胺干预的作用.方法 50只BALB/c小鼠按随机数字法均分为空白对照组、实验对照组、谷氨酰胺组、酪酸杆菌组和联合干预组5组,避水试验诱导建立应激IBS小鼠模型.1.5％甲基纤维素灌胃染色粪便法检测小鼠排便时间和粪便含水量,HE染色法评价肠道病理损伤,结肠膨胀试验检测内脏敏感性.检测血清D-乳酸、二胺氧化酶水平和肠上皮细胞间紧密连接蛋白[闭锁蛋白-1、胞质附着蛋白、紧密连接相关蛋白跨膜蛋白（ZOL-1）]蛋白水平变化评价空肠通透性改变,评价酪酸杆菌联合谷氨酰胺干预的影响.组间比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析.结果 与空白对照组相比,实验对照组小鼠排便时间[（100.40±14.80） min比（75.88±12.20） min]明显缩短、粪便含水量[（54.76±9.98）％、（74.95±7.15）％]增加明显（t＝3.692、4.023,P＝0.002、0.002）,最低阈值显著降低[（40.87±4.82） mmHg（1 mmHg＝0.133 kPa）比（27.80±3.18） mmHg;t=8.761,P＜0.01],空肠黏膜损伤评分增加（0.50±0.15比2.60±0.97;t＝6.034,P＜0.01）;肠道通透性包括血清D-乳酸[（913.6±90.1） ng/L比（1 476.0±246.8） ng/L]、二胺氧化酶[（3 391.0±256.9） ng/L比（5 096.0±725.2） ng/L]水平显著增加（t＝40.920、29.810,P均＜0.05）,紧密连接蛋白ZOL-1 （0.165±0.005、0.119±0.003）、闭锁蛋白1（0.104±0.016比0.022±0.006）表达显著降低（t=19.830、19.830,P均＜0.01）.与实验对照组相比,谷氨酰胺组、酪酸杆菌组和联合干预组经灌胃干预后,排便时间增加[（90.50±3.78）、（97.56±8.79）、（99.89±11.90） min]、粪便含水量降低[（69.33±6.71）％、（58.07±8.97）％、（56.74±8.12）％],差异有统计学意义（F=10.020、8.740,P均＜0.01）,而酪酸杆菌组和联合干预组效果最佳（F＝2.481、4.874,P均＜0.05）;最低阈
- 陈东晖于泳刘志强李付广郑鹏远
- 关键词：紧密连接蛋白肠道通透性谷氨酰胺
- 孤独症谱系障碍儿童肠道菌群与行为症状的相关研究被引量：14
- 2019年
- 目的探索孤独症谱系障碍(ASD)儿童肠道菌群的构成及其与行为症状严重程度之间的关系.方法选取30名ASD儿童为ASD组,20名年龄、性别与之匹配的健康儿童为健康对照组,统计两组相关基本信息.对两组儿童粪便样本中细菌16S rRNA基因的V3-V4高变区进行测序,并采用孤独症治疗评估量表评估ASD儿童行为症状的严重程度.应用Spearman秩相关分析ASD儿童肠道菌群与行为症状严重程度的相关性.结果研究表明两组儿童肠道微生态菌群结构存在显著差异.与健康对照组相比,ASD组儿童α多样性指数(Shannon和Shannoneven)显著降低(P<0.05);粪便Firmicutes比例显著降低,而Acidobacteria比例显著增高(P<0.05).ASD组儿童粪便的优势菌群为Megamonas、Megasphaera、Barnesiella等;而健康对照组儿童粪便的优势菌群为Eubacterium_rectale_group、Ezakiella、Streptococcus等.且Megamonas丰度与ASD儿童健康/身体/行为和语言评分均呈正相关(P<0.05).结论 ASD的发展及其行为症状的严重程度与肠道菌群结构密切相关.
- 赵锐豪郑鹏远刘思濛汤有才李恩耀孙榛誉江淼淼
- 关键词：孤独症谱系障碍肠道微生态行为症状儿童
- 幽门螺杆菌对胃癌前期阶段胃上皮DNA同源重组修复关键蛋白的影响被引量：4
- 2018年
- 目的通过检测胃癌前期阶段幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)阳性和阴性患者胃黏膜组织中DNA损伤标志物γH2AX及同源重组(homologous recombination,HR)修复关键蛋白MRE11、Rad51、CtIP表达水平,评价H.pylori感染在胃癌前期阶段对HR精确修复的影响。方法选择2017年3月至9月行胃镜及病理检测的165例H.pylori阳性和阴性患者,取胃黏膜上皮组织,石蜡包埋切片,行HE染色,根据世界卫生组织标准和更新的悉尼标准,划分病理类型。然后应用免疫组织化学染色方法检测H.pylori和DNA损伤标记蛋白及HR修复关键蛋白表达水平,并行统计学分析。结果胃黏膜上皮细胞中γH2AX的表达,在CSG、CAG和IM阶段,H.pylori阳性组表达高于阴性组(Mann-Whitney U=1116.5,P=0.001;Mann-Whitney U=185.0,P=0.018;Mann-Whitney U=214.5,P=0.041),在Dys阶段,H.pylori阳性组和阴性组差异无统计学意义(Mann-Whitney U=35.5,P=0.964);MRE11的表达,在CSG、CAG阶段,H.pylori阳性组表达高于阴性组(MannWhitney U=1117.0,P=0.001;Mann-Whitney U=201.0,P=0.002),在IM、Dys阶段,H.pylori阳性组和阴性组差异无统计学意义(Mann-Whitney U=171.0,P=0.568;Mann-Whitney U=41.5,P=0.616);Rad51的表达,在CSG、IM阶段,H.pylori阳性组表达低于阴性组(Mann-Whitney U=490.0,P=0.002;Mann-Whitney U=73.0,P=0.007),在CAG、Dys阶段,H.pylori阳性组和阴性组差异无统计学意义(Mann-Whitney U=101.0,P=0.404;Mann-Whitney U=24.0,P=0.291);CtIP的表达,在CSG、IM阶段,H.pylori阳性组表达低于阴性组(Mann-Whitney U=593.0,P=0.044;Mann-Whitney U=58.5,P=0.001),在CAG、Dys阶段,H.pylori阳性组和阴性组差异无统计学意义(Mann-Whitney U=84.0,P=0.136;Mann-Whitney U=18.5,P=0.102)。结论在胃癌前期发展阶段,H.pylori感染导致人体胃上皮细胞DNA损伤,却抑制部分HR修复通道关键蛋白表达,从而可能抑制精确的HR修复,增加细胞恶变几率。
- 董海滨米阳黄煌梅璐何晓燕李彦伟郑鹏远
- 关键词：幽门螺杆菌DNA损伤免疫组织化学
- 益生菌对肠易激综合征小鼠肠道黏膜CRF-R1表达及肠道屏障功能的影响被引量：10
- 2014年
- 目的通过观察肠易激综合征（IBS）小鼠模型结肠黏膜肥大细胞上CRF-R1及结肠黏膜PAR-2、Claudin1~4等的表达变化,探讨IBS中应激通过肥大细胞引起肠道屏障功能障碍的可能机制并观察婴儿双歧杆菌的治疗作用。方法 30只雄性Balb/c小鼠随机分为对照组、模型组及婴儿双歧杆菌组。以束缚应激法建立IBS小鼠模型。婴儿双歧杆菌组给予婴儿双歧杆菌灌胃,而对照组及模型组给予等体积生理盐水灌胃。观测腹肌收缩反射（AWR）后处死小鼠。ELISA检测外周血中类胰蛋白酶的表达变化。免疫组织化学分析结肠黏膜CRF、PAR-2、Claudin1、Claudin2、Claudin3、Claudin4的表达情况。免疫荧光双标分析结肠黏膜CRF-R1在肥大细胞的表达情况。RT-PCR检测结肠CRF-R1mRNA的表达情况。结果与对照组相比,模型组小鼠外周血类胰蛋白酶表达量增加;结肠黏膜中CRF、PAR-2、Claudin2表达量、CRF-R1＋肥大细胞数目及CRF-R1 mRNA表达量增加,结肠黏膜Claudin1、Claudin3、Claudin4表达量降低,差异均有统计学意义（P〈0.05）。婴儿双歧杆菌干预后,该组小鼠外周血中类胰蛋白酶表达量降低;结肠黏膜中CRF、PAR-2、Claudin2表达量、CRF-R1＋肥大细胞数目及CRF-R1 mRNA表达量降低,结肠黏膜Claudin1、Claudin3、Claudin4表达量增高,差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论 IBS小鼠模型中,婴儿双歧杆菌可以减轻肠道屏障功能障碍,其机制可能与抑制结肠黏膜肥大细胞上CRF-R1的表达而抑制肥大细胞的激活及其免疫因子的释放,从而降低结肠黏膜PAR-2的表达有关。
- 刘思濛于泳黄煌丁一芮白利梅李付广郑鹏远
- 关键词：肠易激综合征益生菌肠道屏障功能
- 幽门螺杆菌毒力因子VacA促进胃上皮GES-1细胞DNA同源重组修复被引量：3
- 2019年
- 目的检测幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)标准株(Hp P12)和其毒力因子VacA对人胃黏膜上皮细胞(GES-1)DNA损伤和同源重组(homologous recombination,HR)修复的影响。方法应用Hp P12和其vacA基因敲除株(Hp P12 ΔvacA)以感染复数(multiplicity of infection,MOI)=100分别感染GES-1细胞,采用依托泊苷(50 μmol/L)或丝裂霉素(0.5 μg/ml)处理2 h的GES-1细胞作为阳性对照,Western blot和免疫荧光方法检测DNA损伤标记蛋白γH2AX、HR修复关键蛋白(Rad51、pMRE11、CtIP和pCtIP)的表达水平以及在DNA损伤位点的募集情况;进一步采用Hp P12和Hp P12 ΔvacA菌株感染人胚肾HEK-293(DR-GFP)细胞系,验证VacA蛋白对HR修复的影响。结果DNA损伤标记蛋白γH2AX的表达和募集,在Hp P12感染组较未感染组上调(P<0.05),在Hp P12 ΔvacA感染组较标准株感染组下调(P<0.05)。同样,HR修复关键蛋白(Rad51、pMRE11、CtIP和pCtIP)的表达和募集,在Hp P12标准株感染组较未感染组上调(P<0.05),在Hp P12 ΔvacA感染细胞中较标准株下调(P<0.05)。进一步采用上述菌株感染I-SceⅠ质粒转染的HEK-293(DR-GFP)细胞进行验证,发现Hp P12感染组绿色荧光蛋白(GFP)阳性细胞数下调,而Hp P12 ΔvacA感染组下调更加明显(P<0.05)。结论Hp P12标准株感染胃上皮GES-1细胞后引起DNA损伤,促进了GES-1细胞中的HR修复,其中VacA毒力因子起到促进HR修复的重要作用。
- 莫慧郑鹏远米阳孙向东薛福敏刘斌
- 关键词：幽门螺杆菌GES-1细胞VACA
- 12例支气管黏液表皮样癌临床分析被引量：2
- 2017年
- 目的探讨支气管黏液表皮样癌临床特点、诊治及预后,提高临床医师对支气管黏液表皮样癌的认识。方法我院共收治,回顾性分析郑州大学第二附属医院2007年8月至2014年2月收治的12例支气管黏液表皮样癌患者的临床资料。结果 12例支气管黏液表皮样癌患者中,男6例,女6例;年龄13~63岁,平均年龄41.1岁;有抽烟史5例,无抽烟史7例;病程16 d^2 a,多集中于1~3个月;病变位于段支气管及以上气道者9例,位于肺内者3例;主要症状包括咳嗽、咳痰9例,咯血或痰中带血丝3例,发热3例,胸闷、呼吸困难6例;低度恶性者10例,高度恶性者2例;行手术治疗10例,化疗1例,放疗1例。随访结果显示,1 a生存率91.7%、3 a生存率75.0%、5 a生存率65.6%。结论支气管黏液表皮样癌临床少见,多见于青年,症状不典型,低度恶性患者居多,治疗以手术为主,综合治疗措施有望改患者生存时间,其预后与病理分型关系密切。
- 高崴崴刘待见宋园园刘剑波秦瑞玲
- 关键词：支气管黏液表皮样癌预后
- 非酒精性脂肪性肝病患者肠道菌群及生物化学指标相关性分析被引量：35
- 2019年
- 目的探讨不同类型非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者肠道菌群结构与生物化学指标改变的相关性,以期为NAFLD临床诊断和防治提供依据。方法随机纳入NAFLD患者(NAFLD组)48例、NAFLD合并2型糖尿病患者(NAFLD合并2型糖尿病组)40例和体检健康者(健康组)30例,检测其体质量指数及血清中丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、总胆红素、总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、尿酸和空腹血糖,用酶联免疫吸附法检测血清中肿瘤坏死因子-α和空腹胰岛素并计算胰岛素抵抗指数。用16SrDNA高通量测序检测3组对象肠道菌群,最后综合分析各研究因素间的相关性。各组之间的比较采用χ^2检验,符合正态分布且方差齐的多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较用LSD法,不符合正态分布或方差齐性的多组间比较采用K-W秩和检验。结果NAFLD组体质量指数、天冬氨酸氨基转移酶、甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白、尿酸、肿瘤坏死因子-α、空腹胰岛素、胰岛素抵抗指数均高于健康组,高密度脂蛋白低于健康组,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。与NAFLD组比较,NAFLD合并2型糖尿病组年龄、空腹血糖和胰岛素抵抗指数升高,体质量指数、天冬氨酸氨基转移酶、总胆固醇和高密度脂蛋白降低,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。与健康组比较,NAFLD组厚壁菌门丰度降低(P=0.016),NAFLD合并2型糖尿病组厚壁菌门丰度降低(P<0.001)。NAFLD合并2型糖尿病组拟杆菌门丰度高于健康组,差异有统计学意义(P=0.006)。在"属"水平,NAFLD组Roseburia、Subdoligranulum的丰度降低,且NAFLD合并2型糖尿病组Roseburia明显降低,差异均有统计学意义(P值均<0.05);此外,NAFLD合并2型糖尿病组Faecalibacterium、Blautia、Anaerostipes、Fusicatenibacter丰度均低于健康组,差异均有统计学意义(P值均<0.001)。Fusicatenibacter、Blautia、Anae
- 任士萌梅璐黄煌曹少锋赵锐豪郑鹏远
- 关键词：胰岛素抵抗肠道菌群炎症反应
- 慢性心理应激对大鼠远端结肠平滑肌收缩功能的影响被引量：1
- 2015年
- 目的观察慢性心理应激对大鼠远端结肠收缩的影响。方法将SD大鼠随机分为对照组和实验组，束缚制动法制备慢性心理应激大鼠模型，离体灌流法观察远端结肠平滑肌的自发收缩活动及乙酰胆碱（Aeh）对平滑肌收缩的影响。结果行为学测定结果表明成功制备慢性心理应激大鼠模型。对照组大鼠纵形肌和环形肌的自发收缩幅度均显著低于实验组[（0．42±0．09）g比（0．58±0．10）g和（0．52±0．11）g比（0．67±0．11）g，P〈0．05]。Aeh剂量依赖性增加了各组大鼠远端结肠平滑肌的自发收缩幅度（P〈0．01），其在实验组的效应显著高于对照组（P〈0．05）。结论在慢性心理应激大鼠模型，远端结肠平滑肌的收缩强度及其对Aeh的反应均增加。
- 刘霞于泳卢高峰黄煌刘超郑鹏远韩娜
- 关键词：慢性心理应激肠易激综合征远端结肠平滑肌
