湖北省自然科学基金(2001ABB159)
- 作品数:8 被引量:32H指数:3
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- K562冻融抗原负载的树突状细胞诱导抗慢性粒细胞白血病的免疫效应被引量:2
- 2006年
- 目的研究K562冻融抗原负载的健康供者来源的树突状细胞(DC)诱导细胞毒性T淋巴细胞(CTL)体外杀伤慢性粒细胞白血病(CML)细胞的毒性效应。方法利用健康供者外周血单个核细胞诱导分化为DC,采用反复冻融法从K562中提取的可溶性相关抗原负载DC;流式细胞学检测负载抗原前后DC表面分子表达的变化;ELISA法检测DC上清中IL-12和IFNγ的含量;混合淋巴细胞反应(MLR)测定DC体外刺激T细胞增殖的能力;乳酸脱氢酶法检测K562冻融抗原负载DC诱导的抗原特异性CTL对CML细胞的杀伤作用。结果与未经抗原负载的DC相比,经K562抗原负载的DC表面分子表达明显上调,CD1a(27·40±5·00)%、(15·40±2·34)%,CD80(61·35±5·35)%、(42·00±2·77)%,CD83(93·30±3·48)%、(25·15±4·02)%,CD86(85·25±4·39)%、(37·25±3·20)%,CD40(89·80±7·18)%、(35·95±4·06)%,HLA-DR(49·50±5·45)%、(17·15±3·61)%,DC分泌IL-12和诱导T细胞分泌IFNγ的能力增加(P<0·05),具有很强的刺激T细胞增殖能力,且刺激强度在24h最强,48h降低,冻融抗原负载DC后激活的CTL在体外对K562的杀伤率为77·35%,显著高于未经抗原负载的DC(P=0·001)。结论经K562细胞冻融抗原负载DC激活的CTL在体外具有更强的增殖能力和杀伤CML细胞的作用。
- 左学兰周新刘小红陈飞何莉孟娟屈雪菊
- 关键词:K562细胞树突细胞
- P63蛋白和PCNA在B细胞非霍奇金淋巴瘤的表达被引量:3
- 2006年
- 目的:探讨P63蛋白、增殖细胞核抗原(PCNA)在B细胞非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)中的表达及在其发生发展中的作用。方法:应用免疫组织化学SP法检测43例B-NHL患者和10例反应性增生淋巴组织(RH)中的P63蛋白和PCNA的表达水平。结果:P63蛋白在43例B-NHL中的阳性表达率为82.7%(36/43),而在反应性淋巴结组织中的表达率为40.0%(4/10);PCNA在B-NHL表达的阳性率为100.0%,而在反应性淋巴结组织中的表达为30.0%(3/10);且两者在各种类型的B-NHL之间的表达有显著性差异(P<0.01),进一步分析P63及PCNA与B-NHL的恶性程度发现,两者的表达与恶性程度呈正相关(分别为P<0.01和P<0.05)。结论:P63蛋白和PCNA高表达于B-NHL,P63蛋白可能作为癌基因参与B-NHL的发生并促进细胞增殖。
- 刘小红左学兰张克俭杨华强孟娟
- 关键词:P63蛋白PCNAB细胞非霍奇金淋巴瘤
- 柚皮素对人髓系白血病K562细胞增殖的作用被引量:12
- 2007年
- 目的:探讨柚皮素(naringenin)对人慢性髓系白血病K562细胞株生长的影响及其作用机制。方法:MTT法检测柚皮素在不同浓度、不同时间对K562细胞的影响;倒置显微镜下,Wight-Giemsa染色(W-G染色),免疫荧光染色和透射电镜下观察细胞形态变化、凋亡发生情况以及超微结构的变化;并用流式细胞仪分析细胞周期分布,用免疫组织化学的方法检测细胞增殖核抗原(PCNA)的表达。结果:柚皮素对K562细胞增殖有明显抑制作用,作用24,48和72 h后的半数抑制浓度(IC50)分别为455,225和175μmol/L;柚皮素处理组细胞在普通光镜和电镜下均见观察到显著的增殖抑制和典型的细胞凋亡形态学改变;流式细胞仪分析证实柚皮素能使K562细胞聚积在G0/G1期,S期细胞减少;在处理组PCNA的表达显著低于对照组。结论:柚皮素对K562细胞具有明显的增殖抑制作用,这一作用可能是通过细胞周期阻滞和诱导凋亡两种机制实现的。
- 李瑞芳左学兰周颖何莉陈飞
- 关键词:柚皮素白血病细胞增殖细胞周期
- 存活蛋白和P63蛋白在B细胞非霍奇金淋巴瘤组织中的表达及其对细胞凋亡和增殖的作用被引量:12
- 2007年
- 本研究探讨存活蛋白(Survivin)和P63蛋白在B细胞非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)发生发展中的可能作用及其与细胞凋亡和增殖的相互关系。应用免疫组织化学SP法和TdT介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)技术检测43例B-NHL和10例反应性增殖淋巴组织(RHL)中的survivin和P63蛋白表达以及细胞凋亡和增殖细胞核抗原(PCNA)的水平。结果表明:survivin和P63在43例B-NHL中表达的阳性率分别为69.8%(30/43)和82.7%(36/43),survivin和P63在10例RHL中表达阳性率分别为10%(1/10)和40%(4/10),survivin在侵袭性B-NHL中的阳性率明显高于惰性B-NHL(83.3%vs46.2%,P<0.01),P63蛋白表达差异无显著性意义;survivin阳性表达与凋亡指数(AI)和增殖指数(PI)呈正相关(r=0.429,P<0.01;r=0.348,P<0.01),P63蛋白阳性表达与AI和PI呈正相关(r=0.451,P<0.01;r=0.369,P<0.05),B-NHL的AI和PI呈显著正相关(r=0.598,P<0.001)。结论:survivin可能参与了B-NHL的凋亡和增殖调控机制,P63作为癌基因参与B-NHL发生,二者可能共同影响细胞增殖和凋亡。
- 左学兰周颖周新刘小红张克俭杨华强孟娟
- 关键词:B细胞非霍奇金淋巴瘤SURVIVINP63蛋白细胞凋亡细胞增殖
- 异基因树突细胞体外诱导抗慢性粒细胞白血病作用研究
- 2007年
- 树突细胞(DC)是体内惟一可以直接激活初始T细胞的专职抗原提呈细胞,是激发免疫应答的关键。我们选用持续表达BCR-ABL肿瘤抗原的K562细胞冻融抗原负载健康供者DC,避免自体肿瘤抗原和自身DC存在的缺陷,探索BCR-ABL肿瘤抗原负载的异基因健康供者DC在体外能否诱导HLA部分相合的慢性粒细胞白血病(CML)患者T细胞产生抗BCR-ABL^+白血病效应。
- 刘小红左学兰刘胜武张克俭孟娟杨华强
- 关键词:慢性粒细胞白血病体外诱导树突细胞异基因BCR-ABLK562细胞
- 凋亡调控蛋白在B细胞非霍奇金淋巴瘤的表达及其与细胞凋亡的关系被引量:2
- 2006年
- 目的探讨髓细胞白血病基因1(MCL-1)、Survivin在B细胞非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)表达及其与细胞凋亡的关系。方法应用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记技术和免疫组织化学SP法检测43例B-NHL和10例反应性增生(RH)淋巴组织细胞凋亡率和MCL-1、Survivin的表达水平。结果MCL-1和Survivin在43例B-NHL中阳性表达率分别为58·1%(25/43)和69·8%(30/43),而MCL-1在RH淋巴组织阴性表达,Survivin在RH淋巴组织低表达10·0%(1/10),MCL-1在侵袭性B-NHL表达的频率和强度明显高于惰性B-NHL(70·0%,30·8%,P<0·05),Survivin在侵袭性B-NHL中表达的阳性率明显高于惰性B-NHL(80·0%,46·2%,P<0·05);MCL-1阳性表达组与凋亡指数(AI)无相关,Survivin阳性表达组与AI正相关(r=0·429,P<0·01),此外,两者表达呈显著正相关(r=0·598,P<0·001)。结论MCL-1对B-NHL细胞凋亡作用不如Survivin明显,后者可能参与了B-NHL细胞凋亡调节,二者在B-NHL的共表达与其发生发展有关。
- 左学兰周新孟娟张克俭刘小红杨华强
- 关键词:SURVIVIN脱噬作用
- 树突状细胞疫苗与慢性粒细胞白血病
- 2006年
- 树突状细胞(DC)是体内最重要的抗原提呈细胞,在抗肿瘤免疫中起着重要的作用。慢性粒细胞白血病(CML)是起源于多能造血干细胞恶性克隆性疾病,负载CML的肿瘤细胞可溶性抗原、bcr/abl抗原肽于DC形成DC疫苗,在体外诱导出抗CML细胞毒作用,用于清除微小残留病。现综述DC疫苗在CML免疫治疗的研究进展。
- 左学兰周新
- 关键词:树突细胞白血病免疫疗法癌症疫苗
- MCL-1蛋白在B细胞非霍奇金淋巴瘤的表达及临床意义被引量:1
- 2005年
- 目的:分析髓细胞白血病1(MCL-1)蛋白在B细胞非霍奇金淋瘤(B-NHL)的表达,探讨其与细胞凋亡和增殖的相互关系及其潜在的临床意义。方法:用免疫组织化学SP法检测43例不同类型的B-NHL的淋巴结组织以及结外肿瘤组织和10例反应增生淋巴结(RH)中的MCL-1蛋白表达。结果:43例不同类型的B-NHL的MCL-1蛋白的表达中,弥漫大B细胞淋巴瘤的阳性率最高为70.04%(19/27),侵袭性B-NHL表达的频率和强度明显高于惰性B-NHL70.00%vs30.76%,P<0.05,而10例RH的MCL-1蛋白无阳性表达。MCL-1蛋白的表达与B细胞NHL的亚型密切相关(P<0.001),与临床分期无明显相关,MCL-1蛋白的表达阳性组与细胞增殖指数(PI)呈正相关(P=0.002),与凋亡指数(AI)无相关。结论:MCL-1蛋白在侵袭性B-NHL易于表达,其表达与B-NHL亚型相关,并与淋巴瘤细胞的侵袭性和增殖状态有关,推测MCL-1蛋白在B-NHL发生发展中具有潜在作用。
- 左学兰周新刘小红张克俭杨华强孟娟
- 关键词:B细胞非霍奇金淋巴瘤免疫组织化学细胞增殖