中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(2013ZL037)
- 作品数：2 被引量：8H指数：2
- 相关作者：闫喜军朱春生胡博吴威王振军更多>>
- 相关机构：中国农业科学院特产研究所吉林农业大学更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 我国首次证实貉感染水貂阿留申病毒被引量：6
- 2013年
- 2013年中国农业科学院特产研究所科研人员在吉林省某一水貂、狐狸、貉共同养殖区,通过对流免疫电泳实验和PCR方法在9只乌苏里貉体内检测到水貂阿留申病毒,这是国内该病毒感染貉的首次报道。目前科研人员已获得了病毒的结构基因序列,相关的研究正在进行中。
- 张蕾胡博王振军朱春生孙彦刚闫喜军吴威
- 关键词：水貂阿留申病毒对流免疫电泳
- 水貂阿留申病病毒VP2蛋白基因在昆虫杆状病毒表达系统中的表达被引量：3
- 2013年
- 为了得到结构和功能近似于天然的水貂阿留申病病毒G株(ADV-G)的衣壳蛋白VP2,将ADVG的VP2基因5′端添加His标签后克隆到杆状病毒转移载体(pFastBac1)后转化入大肠杆菌DH10Bac中重组,筛选重组成功的克隆进行菌液扩增,获得重组的杆粒(Bacmid),然后用重组杆粒转染昆虫细胞(sf9),获得重组的杆状病毒。用P3代病毒感染sf9细胞,接毒后第48小时进行免疫荧光试验,结果,检测到特异的绿色荧光,证实目的蛋白得到成功表达。Western-blot分析结果显示,表达的VP2蛋白能够与His标签单抗和ADV阳性血清产生特异性免疫印迹反应。经过对流免疫电泳(CIEP)验证,在敏感性、特异性、重复性、稳定性方面,表达的VP2蛋白与商业抗原有一致的表现。采用超速离心法对病毒液进行浓缩后,在电子显微镜下可见约为20nm的病毒样颗粒(VLPs)。以上试验结果表明,ADV VP2蛋白在昆虫杆状病毒中得到有效表达,并具有良好的反应原性。
- 王振军吴威闫喜军呼延良浩朱春生胡博张海玲白雪赵建军徐淑娟冯卓张蕾李明霞
- 关键词：水貂阿留申病病毒VP2基因结构蛋白昆虫杆状病毒表达系统
