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膜蛋白Flotillin-1与细胞膜PrPC内吞相关性研究被引量：1: 2012年; 目的研究膜蛋白Flotillin-1是否与PrP。蛋白内吞相关。方法利用免疫印迹法观察不同细胞株中Flotillin-1表达情况；利用免疫共沉淀的方法，检测Flotillin-1和PrPc蛋白在Cu2＋存在条件下相互作用的情况。结果①免疫印迹法显示Flotillin-1在多种细胞株中均有表达，且表达量没有明显差别；②免疫共沉淀实验（IP）结果提示在cu2＋处理条件下细胞中有PrPc与Flotillin-1蛋白复合体的形成，并且与cu2＋浓度以及cu2＋处理时间相关；结论膜蛋白Flotillin-1与细胞膜PrPc内吞过程存在相关性。; 任科王轲许尹李龙珠张瑾王荟燕玉娥董小平高晨; 关键词：朊病毒铜

自噬与病毒复制: 2012年; 自噬是真核生物中一类保守的胁迫机制，是溶酶体蛋白降解途径的主要形式之一。自噬通过降解衰老损伤的细胞器和老龄蛋白维持细胞内稳态（homeostasis），同时通过吞噬细胞内微生物病原体行使天然免疫功能。在不同病毒感染过程中，自噬也可以发挥不同的作用：既能阻止病毒复制也可以促进病毒复制。当自噬发挥抗病毒作用时，通过包裹病毒蛋白或病毒颗粒运至溶酶体，进行降解，这一过程称作异自噬（xenophagy）。相反，一些病毒蛋白与宿主自噬蛋白相互作用，阻滞自噬过程，促进病毒复制。另外，还有～些病毒利用自噬机制完成自身复制并行非裂解细胞型释放。; 许尹田婵董小平; 关键词：病毒病病毒复制自噬

朊蛋白突变体D178N在RT—QuIC实验中的转化研究: 2012年; 目的利用RT—QuIC研究带有D178N突变的朊蛋白的自我转化能力。方法以带有人PRNP基因的质粒为模板，通过定点突变，构建了带有D178N突变的人PRNP基因，利用原核表达系统表达并纯化了带有N端及N端缺失的D178N朊蛋白。分别将此蛋白作为底物，利用RT—QuIC体外纤维形成实时监测系统，对各种突变蛋白体外纤维形成进行了观察和比较，并对形成纤维蛋白的蛋白酶抗性进行了初步分析和比较。结果正确构建了D178N突变的PRNP基因；在RT—QuIC的反应条件下，缺失N端的带有D178N突变的人朊蛋白，即使在不存在PrP5c种子的情况下，在体外也能够发生自我转化，且形成的纤维具有蛋白酶抗性；而带有N端的D178N突变的朊蛋白，在RT-QuIC的反应条件下不发生自我转化。结论朊蛋白N端对D178N突变的朊蛋白自发纤维形成具有一定影响，这为探索和研究遗传型克雅病的致病机制提供了重要线索。; 高晨任科李龙珠姜慧英陈操张瑾韩俊董小平; 关键词：朊病毒核酸扩增技术

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国家自然科学基金(31100117)