上海市自然科学基金(99ZB14018)
- 作品数：6 被引量：10H指数：2
- 相关作者：黄惠民邹文艳蒋祖明黄惠民孔祥更多>>
- 相关机构：上海交通大学医学院附属新华医院上海第二医科大学上海第二医科大学附属新华医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 内皮祖细胞定向分化平滑肌细胞的实验研究被引量：4
- 2006年
- 目的内皮祖细胞是一种理论上非常合适的血管组织工程种子细胞,最终分化成成熟内皮细胞。实验拟证实内皮祖细胞可以定向分化成平滑肌细胞。方法以猪为实验动物,采集骨髓单核细胞,分离培养内皮祖细胞,然后应用血小板衍生生长因子(PDGF)BB诱导内皮祖细胞定向分化。通过免疫组化和免疫荧光法鉴定细胞类型。结果经过诱导的内皮祖细胞定向分化成平滑肌细胞。未经诱导的细胞分化成内皮细胞。结论内皮祖细胞不仅可以分化成内皮细胞,而且可以在PDGF-BB作用下分化成平滑肌细胞,是一种理想的血管组织工程种子细胞来源。
- 马良龙黄惠民蒋祖明俞晓青邹文艳
- 关键词：内皮祖细胞血小板衍生生长因子BB平滑肌细胞
- 外周血来源的内皮祖细胞的体外培养与分化被引量：2
- 2004年
- 目的 研究内皮祖细胞(EPC)的分离、培养、分化及鉴定。方法 Ficoll密度梯度离心分离外周血获取单核细胞,在加有EGM-2-MV-SingleQuots的EBM-2培养液中培养和扩增,免疫组化和免疫荧光测定分化细胞表面特异性抗原的表达。结果 培养后10d细胞融合,呈克隆样生长,20d后细胞呈现典型的鹅卵石样内皮细胞形态;免疫组化和免疫荧光显示,CD31、vWF、FLKI/KDR/VEGFR-2和VE-cadherin均呈阳性。结论 外周血来源的单核细胞含有内皮祖细胞,能在一定的培养条件下分化成为血管内皮细胞。
- 吴少峰黄惠民
- 关键词：内皮祖细胞体外培养细胞分化外周血血管内皮细胞
- 先天性心脏病患儿骨髓单核细胞分离培养内皮祖细胞的实验研究
- 2005年
- 目的探索自先天性心脏病患儿骨髓单核细胞中分离培养内皮祖细胞的方法,期望为儿童组织工程血管、补片或带瓣管道的制备找到新的种子细胞来源。方法采集先天性心脏病患儿骨髓,梯度密度离心法分离单核细胞,内皮细胞培养液EGM-2培养,种植于提前包埋了纤维连接蛋白的培养皿进行体外扩增,取48h后贴壁细胞,应用免疫组织化学和免疫荧光技术鉴定内皮细胞系列标志:CD34、CD31、FLK-1、ve-Cadherin和Ⅷ因子。结果经过梯度密度离心和贴壁法选择的细胞表达内皮细胞特异性抗原:CD34、CD31、FLK-1、ve-Cadherin和Ⅷ因子。培养至第5代细胞形态基本相似,细胞总数可以达到108以上。结论自先天性心脏病患儿骨髓单核细胞中可以分离培养出内皮祖细胞并能体外扩增,可以作为先天性心脏病患儿构建组织工程血管的种子细胞来源。
- 马良龙黄惠民孔祥蒋祖明余晓青邹文艳
- 关键词：内皮祖细胞骨髓先天性心脏病
- 小儿骨髓内皮细胞和内皮祖细胞的培养及鉴定
- 2005年
- 目的探索小儿骨髓内皮细胞和内皮祖细胞的分离培养,为组织工程血管、补片或带瓣管道的制备找新的种子细胞来源。方法采集小儿骨髓,梯度密度离心法分离单核细胞,内皮细胞培养液EGM-2培养,种植于提前包埋了纤维连接蛋白的培养皿进行体外扩增,分别取48 h内贴壁细胞和48 h后贴壁细胞,应用免疫组化和免疫荧光技术鉴定内皮细胞系列标志:CD34、CD31、FLK-1、VE-Cadherin和Ⅷ因子以及祖细胞标志CD133。结果经过梯度密度离心和贴壁法选择的细胞表达内皮细胞特异性抗原CD34、CD31、FLK-1、VE-Cadherin和Ⅷ因子,部分表达CD133。培养至第5代细胞形态基本相似,细胞总数可以达到108以上。结论自小儿骨髓可以分离培养出内皮细胞和内皮祖细胞并能体外扩增,可以作为构建组织工程血管、补片或带瓣管道的种子细胞来源。
- 马良龙黄惠民孔祥蒋祖明余晓青邹文艳
- 关键词：内皮细胞内皮祖细胞骨髓
- 脱细胞组织基质和自身细胞构建组织工程移植物被引量：2
- 2006年
- 目的采用脱细胞组织基质作为支架,自身内皮细胞和平滑肌细胞作为种子细胞,构建组织工程移植物。方法取小猪颈动脉,采用酶消化法分别得到内皮细胞和平滑肌细胞,于体外培养、扩增,获得足够量的种植细胞;另取羊主动脉,经多步骤脱细胞处理,获得羊脱细胞组织基质;将培养的猪内皮细胞和平滑肌细胞分别种植于羊脱细胞组织基质,体外培养3周后移植至细胞供体猪。结果培养、扩增的细胞经鉴定,内皮细胞和平滑肌细胞的特异性标志分别呈阳性反应;脱细胞组织基质中胶原纤维和弹性纤维保持原来的形态和结构,力学性能良好;细胞种植后移植至细胞供体猪,3个月后处死,见移植物内表面光滑,无血栓形成,无钙化,内膜层与周围组织连续分布,显微镜下见大量生长细胞,弹力纤维数量与正常血管壁相似。结论体外培养的自身细胞和异种动物脱细胞组织基质可作为构建组织工程移植物的良好材料。
- 黄惠民吴少峰任洪
- 关键词：血管组织工程自体细胞脱细胞组织基质
- 脱细胞血管组织基质的制备和平滑肌细胞的种植被引量：5
- 2001年
- 目的 组织工程血管的研制成功将为先天性心脏病外科提供一种新的理想的修补材料 ,本文研究血管脱细胞组织基质的制备 ,平滑肌细胞的体外培养和种植方法。方法 取成年羊胸主动脉 ,用胰酶消化去除细胞成分 ,保存弹性蛋白和胶原蛋白 ,获得血管脱细胞组织基质 ,经点状注射法 ,种植体外培养的小牛平滑肌细胞。结果 羊主动脉经脱细胞处理 ,得到的组织基质最大负载下降 2 0 % ,最大伸长无显著改变 ;脱细胞组织基质的胶原蛋白含量与新鲜主动脉相似 ;基质的纤维结构完整 ,为网状或多孔状 ;种植的小牛平滑肌细胞生长良好。结论 采用多步骤方法获得的血管脱细胞组织基质可用作为制备组织工程血管的支架 ,适宜于血管平滑肌细胞的生长。
- 黄惠民任虹刘再勇
- 关键词：血管组织工程脱细胞组织基质血管平滑肌细胞
