广州市医药卫生科技项目(2009-ZDa-03)
- 作品数：10 被引量：38H指数：5
- 相关作者：刘志辉孟繁荣张言斌谭守勇尹小毛更多>>
- 相关机构：广州市胸科医院广东省结核病防治研究所广州医学院更多>>
- 发文基金：广州市医药卫生科技项目国家科技重大专项广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 直接检测痰标本中MPB64蛋白在结核病诊断中的临床应用价值被引量：5
- 2010年
- 目的:探讨直接检测痰液标本MPB64蛋白作为结核病快速诊断方法的可能性。方法:对65例肺结核病患者和72例非结核病患者的痰液标本同时进行痰涂片染色抗酸菌检查、实时荧光定量PCR检测结核杆菌DNA和免疫胶体金法检测MPB64蛋白,比较分析3种方法的检测结果,并依据临床诊断对MPB64蛋白检测结果进行诊断方法学评价。结果:MPB64蛋白检测法与涂片染色、荧光定量PCR检测结果的符合率均为60.58%;MPB64蛋白检测的敏感度、特异度、准确度分别为58.46%、69.44%和64.23%,其敏感度显著高于涂片染色法的27.69%与荧光定量PCR法的35.38%,但其特异度和准确度则低于涂片染色法(100%、65.69%)与荧光定量PCR法(98.61%、68.61%)。结论:采用免疫胶体金法直接检测痰液标本中MPB64蛋白对结核病的诊断具有较高的敏感度,可以作为筛查检测手段;但特异度相对较低,可否作为一种结核病快速诊断方法值得进一步研究。
- 孟繁荣谢贝郑小凌尹小毛蔡杏珊许婉华彭湘明赖艳榕刘志辉
- 关键词：结核MPB64
- 培养滤液MPT64抗原检测结核分枝杆菌复合群生长的效能分析被引量：2
- 2012年
- 目的评价以培养滤液MPT64抗原作为结核分枝杆菌复合群(Mycobacterium tuberculosis complex,MTBC)生长指示实验(简称"MPT64检测法")的检测效能,为建立新型结核分枝杆菌培养方法提供科学依据。方法对799例应用BACTEC MGIT 960分枝杆菌快速培养仪器法(简称"仪器法")进行分枝杆菌培养的培养液在培养的第42天进行MPT64检测,对1265例每隔7d(即培养第1～6周末)进行1次MPT64检测,以出现阳性检测结果或第42天为检测终点,并和仪器法比较。应用χ2检验统计分析所有样本(2064例)的检测结果,分析MPT64检测法的准确度;对1265例监测样本应用t检验分析MPT64检测法的快速性。结果 (1)在2064例分枝杆菌培养的临床样本中,仪器法报告298例MTBC、108例非结核分枝杆菌(non-tuberculous mycobacteria,NTM)、1521例培养阴性及137例污染(后三者即无MTBC生长),其中分别有279、6、0、2例MPT64检测阳性(即有MTBC生长),两者间差异无统计学意义(χ2=0.12,P=0.742);与仪器法的总体一致性为98.69%(2037/2064);对仪器法报告为MTBC者MPT64检测法的阳性率为93.62%(279/298),具有较高的阳性符合水平。(2)在每周进行MPT64监测的1265例培养液样本中,两种方法均检测到MTBC者168例。其中:仪器法在培养1～6周报告阳性率分别为25.60%(43/168)、66.67%(112/168)、92.26%(155/168)、98.21%(165/168)、98.81%(166/168)和100.00%(168/168);MPT64检测法的阳性检出率则分别为17.26%(29/168)、61.90%(104/168)、89.88%(151/168)、95.24%(160/168)、98.81%(166/168)和100.00%(168/168)。两者阳性报告时间差异无统计学意义(t=1.68,P=0.366)。结论MPT64检测法具有准确、快速、简便的特点,值得在临床中推广应用。
- 许婉华黄业伦刘燕文胡丽环罗少珍孟繁荣刘志辉
- 关键词：分枝杆菌结核细菌细菌蛋白质类细菌学技术
- 95株耐多药结核分枝杆菌katG基因序列分析被引量：1
- 2012年
- 目的分析广州地区耐多药结核分枝杆菌katG基因突变的分子特征。方法应用PCR-测序法对来自广州地区100株耐多药结核分枝杆菌株katG基因的261～330位密码子长度约210 bp目的片段进行序列测定,并与结核分枝杆菌标准株H37Rv菌株katG基因序列(GenBank:X68081.1,1-4810)进行对比,并应用DNASTAR软件推测氨基酸突变情况。在PCR和基因序列测定中,引物设计相同,上、下游引物分别为5'-GAAACAGCGGCGCTGATCGT-3和5'-GTTGTC-CCATTTCGTCGGGG-3'。结果 100株耐多药结核分枝杆菌菌株中,95株成功扩增出katG基因,95株中有70株呈现katG基因突变(73.68%);基因突变类型均为点突变,突变均发生于315位点,未见插入或缺失型基因突变;氨基酸突变包括3种类型,其中:66株发生AGC(Ser)→ACC(Thr)突变即S315T(94.28%),2株发生AGC(Ser)→ATC(Ile)突变即S315I(2.86%),2株发生AGC(Ser)→AAC(Asn)突变即S315N(2.86%)。结论在所测菌株范围内,广州地区耐多药结核分枝杆菌katG基因突变率和突变类型具有其特点。
- 竺澎波孟繁荣苏雯婕谭守勇刘志辉周惠贤石琳张言斌
- 关键词：结核分枝杆菌耐多药KATG基因DNA序列测定
- 分枝杆菌菌株库信息系统建设的初步实践被引量：4
- 2010年
- 目的:依据分枝杆菌菌株库建设的主要工作和工作流程,建立科学、标准、规范化的分枝杆菌菌株库信息系统。方法:以中国工业微生物菌种保藏管理中心(CICC)实验室信息管理系统(LIMS)为框架,以分枝杆菌菌株库工作和工作流程为基础,设计信息系统的功能模块和工作流程。结果:(1)分枝杆菌菌株库信息系统功能模块设计为保藏管理、质控管理、文档管理、资源管理、系统管理五大子系统,其中以保藏管理子系统为核心。各子系统由相应的模块组成,各子系统之间既相对独立又密切联系。(2)按收集菌株库外暂存、菌株资料录入、病例资料录入、菌株保存价值判定、菌株入库保存、特定菌株取用及研究信息补充录入等实际工作程序制定计算机模式下的工作流程。结论:分枝杆菌菌株库信息系统的建设与不断完善将能大力加强菌株库管理水平和有效提高运行效率。
- 刘志辉钟球蒋蔚海石胜华陈涛孟繁荣钱明李昕洁尹小毛刘健雄谭守勇
- 关键词：分枝杆菌信息系统
- 分枝杆菌菌株库建设模式与实践研究被引量：5
- 2012年
- 目的建立生物安全保证、菌种资源丰富、相应资料齐全、操作流程顺畅、资源共享便捷的分枝杆菌菌株库,为结核病临床诊疗与科学研究提供基础性平台。方法主要依照二级生物安全(BSL-2)实验室管理要求和"中国医学微生物菌种保藏管理办法"、"人间传染的病原微生物名录"等法规构建分枝杆菌菌株库生物安全保证体系;根据菌株库的功能作用结合结核病临床诊疗与科学研究的最新成就及未来发展要求确立分枝杆菌菌株库建设的内涵与外延;以临床分离菌株、专项研究收集菌株为操作对象制定适宜的菌株资料、相应病例资料收集及信息库建设流程;采用网络通讯和数据库技术建立分枝杆菌菌株库信息系统以提高建库工作效率和提供便捷的资源共享服务。结果①构建了包括生物安全管理领导机构、实验技术生物安全水平标准、实验室生物安全管理与防护、菌株库生物安全管理等在内的分枝杆菌菌株库生物安全保证体系;②分枝杆菌菌株库包括菌株保存库、菌株资料库及相应病例资料库、菌株库信息系统三大主要部分,保存菌株的资料收集以相应的1个治疗周期为界限,菌株保存周期为10年;③临床分离菌株的菌株资料、相应病例资料收集及信息库建设流程按时间序列包括收集菌株库外暂存、菌株资料录入、病例资料录入、菌株保存价值判定、菌株入库保存、特定菌株取用及研究信息补充录入等重大步骤,专项研究收集菌株则按其特定的要求建立相应的工作流程;④采用SQL SERVER大型数据库和Delphi7开发工具开发了基于C/S体系结构包含保藏管理、质控管理、文档管理、资源管理、系统管理等五大子系统的分枝杆菌菌株库信息系统。结论在分枝杆菌菌株库建设中,生物安全保证是前提、丰富内涵建设是中心、合理流程设置是关键、信息系统开发是基础。
- 刘志辉钟球陈涛孟繁荣钱明李昕洁尹小毛刘健雄张言斌王云南薛植强陈其琛谭守勇
- 关键词：分枝杆菌菌种保藏菌种资源生物安全
- 95例耐多药结核菌株rpoB基因突变的分子特征被引量：6
- 2012年
- 目的:探讨广东地区MDR-TB菌株rpoB基因突变的分子特征。方法:对95例MDR-TB菌株rpoB基因453-564位密码子片段进行PCR-直接测序。结果:95例MDR-TB菌株rpoB基因突变率91.58%。86例为点突变,1例插入突变,未发现缺失。常见位点为531(63.22%)、526(20.69%)、516(9.20%)。其中:单位点突变69例(80.23%),双位点突变16例(18.60%),三位点突变1例(1.17%)。511位点突变常同时伴有其他位点突变(57.14%)。结论:主要突变位点与国内外报道基本相同,但各位点所占比例具有地域差异;联合突变率较高,占19.54%。512位点插入(AGGAGC)突变可能为新突变类型。
- 苏雯婕苏政军孟繁荣谭守勇刘志辉张言斌
- 关键词：耐多药结核菌RPOB基因
- 1034例利福平耐药结核杆菌对其它一线抗结核药物耐药性分布特征被引量：10
- 2011年
- 目的了解广州市近17年来，结核分枝杆菌临床分离株利福平耐药情况及对其它一线抗结核药物的敏感性分布特征。方法回顾性分析广州市胸科医院1992年2月-2008年7月期间门诊结核病人一线抗结核药物敏感性试验结果。结果10167例结核分支杆菌分离株中，耐R菌株1034例，耐H菌株2214例，耐S菌株1073例，耐E菌株622例，总体耐药率为25．80％；在1034例R耐药株中，H、R共同耐药者927例，占R耐药株总数的89．65％，却只占2214例H耐药株的41．87％；而R、S共同耐药者502例，R、E共同耐药者237例，分别占耐R株总数的48．55％及22．92％，明显少于R、H共同耐药者。结论耐RFP菌株绝大部分同时对INH耐药，但反之不然，现有的耐药机制难以解释此种现象，结核杆菌是否存在其它耐药机制有待进一步研究。
- 谢贝苏雯婕刘志辉张言斌
- 关键词：结核杆菌利福平异烟肼耐药性
- 采用gyrB基因扩增快速鉴定结核分枝杆菌复合群的初步研究被引量：5
- 2010年
- 目的:初步分析gyrB基因扩增用于结核分枝杆菌复合群(MTC)快速鉴定的可行性。方法:采用特异性引物进行分枝杆菌标准株和临床株的gyrB基因扩增,再通过琼脂糖凝胶电泳观察聚合酶链反应(PCR)结果。结果:15株各种分枝杆菌标准株中,结核分枝杆菌(MTB)、牛分枝杆菌和非洲分枝杆菌均扩增出1184bp目的片段,而其余分枝杆菌PCR结果为阴性;94株分枝杆菌临床株中,60株MTB和10株牛分枝杆菌扩增阳性,而其他分枝杆菌(包括6株脓肿分枝杆菌、5株偶发分枝杆菌、4株龟分枝杆菌、3株鸟分枝杆菌、3株胞内分枝杆菌、2株耻垢分枝杆菌、1株堪萨斯分枝杆菌)均扩增阴性。结论:采用针对MTC的特异性引物进行gyrB基因扩增能快速、准确地鉴别MTC和非结核分枝杆菌。
- 尹小毛刘志辉
- 关键词：分枝杆菌属结核分枝杆菌复合群聚合酶链反应
- 应用MPT64分泌为结核杆菌生长指示的适宜检测时点研究被引量：2
- 2012年
- 目的:探讨应用免疫胶体金法检测结核分枝杆菌复合群特异分泌蛋白MPT64指示结核杆菌生长的适宜检测时间,为创建新型、实用的结核杆菌分离培养方法提供科学依据。方法:在第7、14、21、28、35、42天(即1～6周末)对BACTEC MGIT960分枝杆菌快速培养样本实验瓶进行MPT64检测,以出现阳性检测结果或第42天为检测终点,以BACTEC MGIT960分枝杆菌快速培养及菌种鉴定结果为参照标准分析适宜的检测时间。结果:在1265例临床样本分枝杆菌分离培养中,依据后续分枝杆菌菌种鉴定结果,应用BACTEC MGIT960分枝杆菌快速培养法,178例样本分离到结核杆菌,其中168例MPT64检测阳性;168例MPT64检测阳性样本中,在第1、2、3、4、5、6周呈现MPT64检测阳性的样本数分别为29、75、47、9、6和2例,其阳性检出率分别占MPT64检测阳性的17.26%、61.90%、89.88%、95.23%、98.81%和100%。结论:应用免疫胶体金法检测结核分枝杆菌复合群特异分泌蛋白MPT64指示结核杆菌生长,在2、4周末可分别检测到60%与95%以上的MPT64阳性样本,可以分别视为快速检测和培养终点检测的适宜时点,但更望能有连续监测方法的问世。
- 许婉华黄业伦刘燕文胡丽环罗少珍孟繁荣刘志辉
- 关键词：结核杆菌MPT64
- 分枝杆菌菌株库菌株资料系统建设的初步研究被引量：4
- 2010年
- 目的科学、合理设置分枝杆菌菌株库菌株资料系统内容及资料收集流程,努力提高分枝杆菌菌株库建设水平。方法将分枝杆菌菌株库菌株资料系统建设分为三大部分:菌株资料内容设计、资料收集流程设置和相应信息系统建设。①依据分枝杆菌菌株库的功能作用,结合结核病基础、临床、流行病学和控制策略研究的最新成就,设计"分枝杆菌菌株库菌株/病例资料登记卡";②依据登记卡确定资料收集流程并试运行,而后根据实践效果不断对登记卡内容和资料收集流程进行修正与完善;③采用网络通讯和数据库技术建立菌株资料信息系统模块。结果 ①通过反复论证和实践检验,设计了内容较为全面、系统、科学而且实践可行的"分枝杆菌菌株库菌株/病例资料登记卡"。其主要内容包括:菌株检索信息、菌株生物学信息、菌株-患者链接信息、患者一般资料、患者结核病治疗管理资料和菌株间链接信息。②资料依次按照菌株生物学信息、菌株-患者链接信息、患者一般资料、患者结核病治疗管理资料和菌株间链接信息进行收集,最后确定菌株检索信息和菌株间链接信息。信息收集以相应的治疗周期为限。③依据登记卡内容和资料收集流程,采用SQL SERVER大型数据库和Delph i7开发工具开发了菌株资料信息系统模块。结论进行分枝杆菌菌株库菌株资料系统的建设必须达到内容科学性和实践可行性的高度统一,并须有专业性强、功能性好、易于操作的信息系统支持以采集、分析、处理庞杂的资料信息。
- 刘志辉钟球周琳张言斌肖芃杨应周薛植强陈其琛谭守勇
- 关键词：分枝杆菌信息系统
