广东省科技攻关计划(2005836001054)
- 作品数：3 被引量：18H指数：2
- 相关作者：贝抗胜熊英辉吴礼杨廖家成孙庆文更多>>
- 相关机构：粤北人民医院复旦大学汕头大学更多>>
- 发文基金：广东省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人骨膜来源细胞在聚乳酸三维支架体外成骨的超微结构研究被引量：1
- 2015年
- 目的探讨人骨膜来源细胞在聚乳酸（PLA）三维支架体外培养成骨的可行性及其超微结构特征。方法取材于成人胫骨骨膜，组织块法分离出骨膜细胞并体外培养传至第3代后进行定向诱导分化为骨膜来源成骨细胞，相差显微镜观察细胞形态特征，分为诱导组和未诱导组，分别在5、10、15、20d取3个样本，采用碱性磷酸酶（ALP）试剂盒法及钙结节VonKossa染色法检测ALP和钙结节的表达。经诱导分化的成骨细胞随机分为实验组和对照组，分别接种至经含骨形态发生蛋白．7成骨诱导剂预处理的PLA三维支架和普通二维细胞培养板，1、3、5、7、9、11d采用CCKl8法测量两组细胞的增殖能力，并绘制生长曲线；3、6、9、12d电镜下观察细胞在PLA的生长情况和超微形态特征。结果骨膜来源细胞经诱导分化其形态与成骨细胞相似，诱导组的ALP和钙结节染色阳性率明显高于未诱导组，差异均有统计学意义（P〈0．05）。实验组和对照组细胞生长曲线均呈“S”形，实验组对数生长期增殖较快，平稳期细胞数目明显下降，对照组平稳期数目则有上升，差异有统计学意义（P〈0．05）。电子显微镜观察体外骨膜来源成骨细胞具有良好的超微形态学结构。结论体外骨膜来源成骨细胞与PLA三维支架复合有良好的生物相容性、细胞增殖力和超微形态学结构；体外复合成活后应在第8，9天及时转入体内生长以发挥骨修复作用。
- 贝抗胜刘延晓熊英辉吴礼杨卢林俊
- 关键词：成骨细胞细胞培养技术超微结构
- 成骨因子BMP7在骨膜细胞体外培养中的作用被引量：14
- 2010年
- 目的 探讨成骨因子骨形态发生蛋白（BMP7）在骨膜细胞体外培养中的诱导分化作用.方法取材于成人胫骨骨膜,常规细胞培养法行骨膜细胞体外培养,分为实验组和对照组,分别加入BMP7加成骨细胞培养辅助剂和单纯成骨细胞培养辅助剂,相差显微镜观察骨膜细胞形态特征.每组分别在第5、10、15、20天设3个样本,采用ALP试剂盒法及钙结节Von Kossa染色法分别检测成骨细胞特异性标志物ALP和钙结节的表达情况.结果 骨膜细胞在体外生长良好,实验组和对照组形成的成骨细胞增殖良好,形态一致.细胞早期呈梭形,饱满透明,立体感强;分裂期呈立方形或短柱状;后期由长梭形逐渐变成宽梭和不规则形.由BMP7诱导的骨膜细胞的成骨标志物ALP和钙结节染色阳性率明显高于对照组,有统计学意义（P＜0.01）.结论 骨膜细胞具有良好的成骨和再生能力,BMP7在体外培养中具有明显增强骨膜细胞分化为成骨细胞的作用.
- 贝抗胜孙庆文熊英辉季国庆苏宝金廖家成杜志坡吴礼杨
- 关键词：骨形态发生蛋白7骨膜细胞成骨细胞细胞培养
- 人骨膜细胞生物学特性的实验研究被引量：8
- 2011年
- 目的探讨人骨膜细胞体外培养的生物学特性。方法以胫骨骨膜组织为材料，采用组织块法分离细胞，完全培养基培养，通过倒置硅微镜观察细胞形态学，锥虫蓝染色计数法检测细胞增殖能力；流式细胞学分析细胞表面抗原。随机分为3组，成骨实验组和成软骨实验组分别加入不同的定向培养剂，对照组加入完全培养基，采用碱性磷酸酶染色、Von Kossa染色、甲苯胺能染色、Ⅱ型胶原免疫组化染色检测各组细胞的成骨和成软骨分化指标。结果骨膜细胞在体外培养条件下呈贴壁乍长，细胞牛K曲线证实骨膜细胞传至第9代仍保持良好的增殖能力；流式细胞仪检测证实细胞表阿抗原CD90及CD105呈阳性；组织化学染色检测证实成骨实验组分化后细胞碱性磷酸酶及钙结节呈阳性，成软骨实验组分化后细胞蛋门聚精及Ⅱ型胶原呈阳性，对照组各项指标均呈阴性。结论骨膜细胞体外培养细胞增殖能力强，具有间允质干细胞的特性和良好的成骨和成软骨分化潜能，其定向诱导分化的成骨细胞和软骨细胞均具有各自明显的细胞功能表达。
- 贝抗胜吴礼杨孙庆文熊英辉杜志坡廖家成
- 关键词：骨膜
