江苏省教育厅自然科学基金(02KJD180006)
- 作品数：2 被引量：5H指数：1
- 相关作者：王强张锡然戴君勇曹祥荣庞宏更多>>
- 相关机构：成都动物园南京师范大学更多>>
- 发文基金：江苏省教育厅自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 毛冠鹿与3种麂属动物的GAPDH基因序列的比较分析被引量：1
- 2006年
- 麂亚科（Muntiacinae）动物包括麂属（Muntiacus）和毛冠鹿属（Elaphodus），分布于东南亚、中国及印度，动物形态相似，但具有令人瞩目的细胞遗传学特性．本文以赤麂（Muntiacus muntjak）、黑麂（Muntiacus crinifrons）、小麂（Muntiacus reevesi）和毛冠鹿（Elaphodus cephalophus）4种麂亚科动物为材料，以3-磷酸甘油醛脱氧酶（GAPDH，管家基因）为靶基因，对毛冠鹿在麂亚科中分类地位进行分子鉴定．提取这4种动物的基因组DNA，根据人的GAPDH基因设计引物，进行PCR扩增．获得了约为300bp的扩增产物．将纯化后的扩增产物克隆到质粒pMD18＋TVector中，转化DH-5a菌，挑选阳性克隆。用M13-47／RV—M通用引物进行测序．测序的结果经clustal软件进行了同源性比较．结果显示：麂属动物种问GAPDH基因间的DNA差异在2．52％～4．37％之间，毛冠鹿与麂属3种动物的差异在1．79％-2．87％之间．这些变异以碱基的转换为主．本文结果支持毛冠鹿为独立属1种的分类观念．
- 戴君勇曹祥荣石磊张锡然徐春茂王强
- 关键词：毛冠鹿3-磷酸甘油醛脱氢酶
- 毛冠鹿睾丸组织cDNA文库的构建及P1精蛋白基因的克隆被引量：4
- 2006年
- 为构建毛冠鹿睾丸组织cDNA文库,用TRIzol试剂提取总RNA,利用SMART(switchingmechanismat5’endofRNAtranscript)技术合成cDNA第1链,双链cDNA经LDPCR(LongdistancePCR)扩增并经sfiⅠ酶切和过柱分级分离后,克隆入经sfiI酶切的λTrip1EX2载体,经体外包装而成cDNA原始文库。该毛冠鹿睾丸组织cDNA原始文库含有独立克隆数为5.52×105,重组率达90.8%。文库扩增后,滴度达1.05×109pfu/ml,插入cDNA平均长度为1.01kb。通过随机挑取噬菌斑,并克隆测序,从该文库中克隆了毛冠鹿睾丸组织特异表达基因:P1精蛋白基因(GenBank序列号:DQ299383),该cDNA具有5’和3’非编码区,从第95至250个核苷酸为一完整阅读框(ORF),此阅读框编码一个51Aa的P1精蛋白。以上结果表明本文构建的毛冠鹿睾丸组织cDNA文库符合建库要求,可作为进一步克隆毛冠鹿睾丸组织特异表达基因的可靠材料。
- 张文汤文文庞宏曹祥荣戴君勇张锡然徐春茂王强胡均
- 关键词：毛冠鹿睾丸CDNA文库
