浙江省自然科学基金(Y106725)
- 作品数：25 被引量：143H指数：7
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- 纳米Pt／聚吡咯／HRP酶共固定微电极传感器及对血清中H2O2的快速测定被引量：6
- 2008年
- 将聚吡咯(PPy)和辣根过氧化物酶(HRP)以电聚合的方式沉积在微Pt电极(φ=10μm)上,再以电化学沉积法将纳米Pt颗粒沉积在电极表面,由此制备出纳米Pt/HRP-PPy共固定微电极传感器(Pt/HRP-PPy-nano Pt CME),研究了其电化学行为。在除O2的磷酸盐缓冲液(PBS)中,该电极加速了H2O2还原反应,而沉积在PPy上的纳米Pt显著催化了该反应。以计时电流法定量分析H2O2,在30℃的0.02mol/LpH=7.0PBS中检测H2O2,在0.001～0.3mmol/L浓度范围呈现线性响应,相关系数为0.9972,检测下限达0.3μmol·L-1(S/N=3)。该传感器对H2O2电流响应灵敏度高(0.42mA.cm-2·mmol·L-1)、迅速(7.3s)、稳定性好。此传感器表现出Michaelis-Menten行为,KaMpp为0.033mmol·L-1。较小的KaMpp值表明固定在微Pt电极表面的纳米Pt/HRP对H2O2具有较高亲和性。检测了实际人血清样品中H2O2,结果和对照方法一致,本电极可用作痕量H2O2生医传感器。
- 干宁王峰李天华杨欣江千里
- 关键词：聚吡咯生物传感器微电极
- 胶束电动毛细管色谱检测鱼肉中的七种生物胺被引量：18
- 2007年
- 建立了一种利用胶束电动毛细管色谱同时检测鱼肉中组胺、腐胺、2-苯乙基胺、尸胺、色胺、亚精胺及精胺7种生物胺的方法。样品经6%过氯酸萃取后,由苯甲酰氯衍生化,以含0.06mol/L脱氧胆酸钠的0.02mol/L硼酸(pH9.2)-甲醇(体积比为95∶5)混合液为电泳介质,电泳电压25kV,温度25℃,检测波长214nm,在12min内实现了7种生物胺的完全分离。7种生物胺的浓度与其峰面积在一定的范围呈良好的线性关系,检出限除组胺为15μg/g外,其余均为5μg/g。迁移时间和峰面积的日内、日间相对标准偏差均小于5%。该法用于海鱼中7种胺类物质含量的测定,结果令人满意。
- 干宁李天华王鲁雁江千里
- 关键词：生物胺鱼肉
- 甲胎蛋白与顺铂水合物的相互作用机制及对血清样品中甲胎蛋白的检测
- 2008年
- 目的研究顺铂水合物(cis-[Pt(NH3)2(H2O)2]2+)与甲胎蛋白(AFP)体系的相互作用机制。建立了血清中AFP的荧光检测方法。方法采用电喷雾质谱(ESIMS)、循环伏安(CV)和分子荧光法(FL)探讨了cis-[Pt(NH3)2(H2O)2]2+与AFP的作用方式和大小,考察了共存物质对AFP荧光检测的干扰。结果在一定cis-[Pt(NH3)2(H2O)2]2+浓度范围内,随着AFP浓度上升,荧光峰强度呈正比升高,该方法有较高的灵敏度,对AFP的检出限为5.7ng/ml。对实际样品进行测定,结果与标准方法一致。结论该法适用于血清样品中的AFP分析。
- 王鲁雁干宁李天华侯琳熙徐伟民
- 关键词：电喷雾质谱循环伏安分子荧光甲胎蛋白
- 四羧基酞菁钴Ⅲ/Fe_3O_4/金胶共固定修饰免疫传感器检测尿样中核基质蛋白22被引量：10
- 2007年
- 同时固定四羧基酞菁钻（Ⅲ）（CoPc）和HRP标记核基质蛋白22抗体（HRP-Ab-NMP22）于自组装在金电极表面的Fe3O4／Au胶上，构建了一种快速测定膀胱肿瘤患者尿液中NMP22抗原（NMP22）含量的安培免疫传感器。CoPc可被用作电檄表面HRP的电子传递媒介体。当该传感器在含NMP22尿样的溶液中温育后，NMP22与HRP-Ab-NMP22免疫结合导致HRP的活性中心与CoPc之间的电子传递部分阻碍，使HRP对H202电催化还原电流Io，降低。△Io与NMP22浓度在1．2～200μg／L呈线性关系；检出限为0．5μg／L。该传感器对NMP22响应灵敏，较ELISA法提高了检测速度，有望用于膀胱肿瘤的体外诊断。
- 干宁王鲁雁徐伟民李天华江千里
- 关键词：核基质蛋白22膀胱肿瘤
- 双核铜(Ⅱ)-β-丙氨酸缩水杨醛席夫碱配合物与血清蛋白相互作用的共振瑞利散射光谱被引量：4
- 2008年
- 合成了双核铜-β-丙氨酸缩水杨醛席夫碱配合物([Cu2(HL)2](NO3)2·2H2O,简称CuL)。在与血清白蛋白相互作用的过程中,发现它们结合会引起蛋白共振瑞利散射(RRS)的急剧增强。最大RRS峰位于470/470nm。对体系的适宜反应条件、影响因素及散射强度与蛋白质浓度的关系进行了研究。结果表明,在一定浓度范围内,蛋白质浓度与散射强度成正比。该方法有较高的灵敏度,对牛血清白蛋白(BSA)和人血清蛋白(HSA)的检测范围为5.0—30.5ng/mL。考察了共存物质的干扰影响,并对蛋白质合成样品和实际样品进行分析,结果满意。
- 张晓亮陈亚东徐伟民杨欣干宁
- 关键词：血清蛋白共振瑞利散射
- 自组装CA125免疫传感器的研制及其对血清中CA125的分析被引量：3
- 2007年
- 利用自组装的方法在金电极上制得巯基丁二胺钌（Ⅲ）／纳米金胶／卵巢癌抗体（抗CA125）免疫修饰电极．用该修饰电极对CA125进行检测，发现溶液中CA125抗原分子和传感器表面固定化CA125抗体发生免疫反应．结果显示：CA125抗体导致了该传感器电流的降低．在优化的实验条件下，样品中CA125浓度在2～140unit／mL范围内与电流降低成线性关系，检测限为0．8unit／H1L该免疫传感器表现出良好的准确性和精确性．对40unit／mL的CAl25重复测定8次，相对标准偏差约为2．9％．该传感器具有较好的制备重复性和稳定性．该方法的提出为卵巢癌临床免疫分析提供了一种有前景的方法．
- 干宁李天华侯琳熙徐伟民陈妮
- 关键词：自组装CA125血清
- 基于甲胎蛋白抗体和巯基丁二酰胺铜(Ⅱ)共固定修饰电极的人血清中甲胎蛋白免疫传感器被引量：7
- 2008年
- 研制基于甲胎蛋白抗体(Ab-AFP)和巯基丁二酰胺铜(Ⅱ)(CuL)共固定修饰玻碳电极(GCE|Ab-AFP/TiO2/CuL)的免疫传感器,用于测定人血清中AFP抗原水平。该免疫传感器是利用溶胶-凝胶气相沉积技术,将AFP抗体分子固定在CuL修饰玻碳电极表面制备而成。电极表面的CuL具有电活性,对H2O2有良好的电化学还原催化。当该免疫传感器在含AFP样品的溶液中于25℃温育30min后,AFP抗原与Ab-AFP抗体分子的免疫结合物导致CuL的电子传递被部分阻碍,使CuL对H2O2电催化还原的效率降低,电流值的下降量和AFP浓度成正比,可用于AFP定量测定。在pH=6的PBS中,25℃温育30min的优化条件下,该传感器对AFP的检测线性范围为0.5～3.9和3.9～100ng/mL,检出下限为0.081ng/mL(3σ)。该免疫传感器制备过程比基于酶标抗体修饰传感器简单,尤其是对H2O2催化响应迅速,稳定性好,可以在磷酸盐缓冲溶液中稳定存放15d。对于构建无试剂的免疫传感器和临床免疫分析提供了一种新颖的方法。
- 王鲁雁干宁李天华江千里王峰
- 关键词：H2O2电化学免疫传感器
- 流动注射氢化物发生与动态反应池-电感耦合等离子体质谱法分析镍基超合金中锗砷硒被引量：16
- 2007年
- 建立了流动注射(FI)氢化物发生(HG)与动态反应池(DRC)-电感耦合等离子体质谱法(CP-MS)分析镍基超合金样品中锗、砷、硒的方法。采用动态反应池-氢化物生成技术富集锗、砷、硒,选择半胱氨酸(L-Cys)以及使用气液分离装置,降低了Ni,Co基体在三种元素氢化物生成时的干扰。探讨了氢化物生成的最佳条件、气体流速及基质氧化物对测定的影响。结果表明,以2.0 g/L NaBH4作为氢气发生剂,20 g/L L-Cys作为掩蔽和增敏剂,控制气体流速为0.95 mL/min时,三种元素都有最佳的氢化物发生效率,且Ni,Co对分析干扰可忽略不计。实验求得锗、砷、硒检测限分别为0.003 pg/L,0.001 pg/L,0.002 pg/L。测定1μg/g锗、砷、硒的RSD分别为1.5%,2.9%,2.2%,回收率分别为91.3%,91.4%,112.0%。应用该法于镍基合金标准样品中Ge,As,Se的测定,结果与认定值相吻合。
- 干宁李天华王鲁雁徐伟民
- 关键词：镍基超合金锗砷硒
- 微透析结合高效液相色谱法检测牛奶中的磺胺类药物被引量：2
- 2008年
- 目的:以微透析装置连结高效液相色谱(MD—HPLC)仪分析牛奶中的6种磺胺类药物(简称 SFDs):磺胺嘧啶(SDA)、磺胺一甲基嘧啶(SME)、磺胺二甲基嘧啶(SMZ)、磺胺恶唑(SMX)、磺胺一甲氧嘧啶(SMM),磺胺二甲氧嘧啶(SMO)的含量。方法:采用 pH 7.5的0.5 mol·L^(-1)NaCl 作为微透析灌流液,流速为1.0 μL·min^(-1),收集样品透析液20 min 后用 HPLC 分离检测。采用 Zorbax,Eclipse XDB C_8(150.0 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,柱温30℃。以乙腈-0.01 mol·L^(-1)NaH_2PO_4(pH=5.0)(25:75)为流动相,流速为0.6 mL·min^(-1),检测波长260 nm。结果:在最佳色谱及微透析条件下,各 SFDs 的浓度在21～3000 ng·mL^(-1)范围内线性关系均良好(r=0.995～0.997)。回收率为:SDA(105.0%),SME(104.0%),SMX(93.0%),SMZ(98.0%),SMM(98.0%),SMO(102.0%)。检测限为:SDA(0.41μg·L^(-1)),SME(0.86μg·L^(-1)),SMX(0.09μg·L^(-1)),SMZ(0.45μg·L^(-1)),SMM(0.19μg·L^(-1)),SMO(0.08μmg·L^(-1))。结论:本方法准确,灵敏度高,易于质控,适用于市售牛奶中SFDs 的分离检测。
- 干宁王鲁雁李天华李春野徐伟民
- 关键词：微透析高效液相色谱牛奶
- 5′-核苷酸酶和HRP酶共固定修饰电极快速检测鸡肉中肌苷酸含量被引量：1
- 2008年
- 利用气相沉积方法在玻碳电极表面得到二氧化钛凝胶膜,并在电极表面同时固定5′-核苷酸酶(5′-NT)和辣根过氧化物酶(HRP),构建了一种新型快速测定肌苷酸(IMP)含量的安培传感电极(5′-NT-HRP/GCE)。在溶解氧存在的条件下,IMP被凝胶膜中的5′-NT催化氧化,通过产物H2O2在电位-150mV下被HRP酶催化还原的电化学响应对IMP进行测定。在邻苯二酚存在下,该传感器对IMP表现出快速的响应(响应时间小于10s)。该电极对IMP的测定具有较宽的线性范围(1×10-6-2×10-4mol/L)和较低的检测限(0.5×10-6mol/L)。该电极对IMP的测定具有很高的准确度和良好的重现性。除抗坏血酸以外,与IMP共存的其它物质对其测定没有干扰。结果表明,该电极显示出很好的重现性和稳定性,能用于鸡肉中IMP的在线检测。
- 干宁王鲁雁李天华陈晓东徐伟民
- 关键词：辣根过氧化物酶肌苷酸
