安徽省高校省级自然科学研究项目(KJ2012A031) 作品数:14 被引量:204 H指数:8 相关作者: 陈勤 陈逸青 彭申明 金欣 朱敏 更多>> 相关机构: 安徽大学 安徽医科大学第一附属医院 海德堡大学 更多>> 发文基金: 安徽省高校省级自然科学研究项目 国家大学生创新性实验计划 安徽省教育厅教学研究项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
桔梗皂苷对慢性支气管炎小鼠肺细胞中的IL-1β和TNF-α表达的影响 被引量:43 2013年 探讨炎性细胞因子在慢性支气管炎小鼠肺细胞中的表达及桔梗皂苷(kikyosaponin,KS)治疗慢性支气管炎的作用机制。将50只健康小鼠分成正常对照组、模型组和桔梗皂苷低、中、高剂量组,除正常对照组外,其余四组动物均采用烟熏加浓氨水吸入法建立慢性支气管炎模型,然后分别用药物进行治疗。实验结束后,取各组小鼠肺组织进行石蜡制片,HE染色光镜观察支气管和肺组织病理形态的变化;免疫组化分析肺细胞中IL-1β和TNF-α的表达。Western blot检测肺组织中IL-1β和TNF-α的表达。免疫组化检测显示,与正常对照组相比,模型组小鼠肺组织细胞中IL-1β和TNF-α的表达非常显著。在连续用药30天后,与模型组相比,各治疗组小鼠肺组织细胞中IL-1β和TNF-α的表达显著降低(P<0.05,P<0.01)。蛋白印迹术检测显示,模型组小鼠肺组织细胞中IL-1β和TNF-α的表达水平明显增加,与正常对照组比较,差异十分显著(P<0.01)。而连续用药30天后,各治疗组小鼠肺组织细胞中IL-1β和TNF-α的表达量明显下降,且呈较好的量效关系。结果表明,桔梗皂苷对慢性支气管炎小鼠肺组织中炎性细胞因子IL-1β和TNF-α的表达有明显的抑制作用。推测其作用机制可能是通过抑制肺组织中炎性细胞因子和自由基的生成而达到抗炎、止咳平喘作用的。 贺立立 陈勤 彭申明 曹炎贵 李杨 朱敏关键词:桔梗皂苷 慢性支气管炎 白介素-1Β 肿瘤坏死因子-Α 菟丝子总黄酮对内分泌衰退痴呆模型小鼠学习记忆功能的影响及保护作用机制 被引量:19 2014年 目的:研究菟丝子总黄酮对内分泌衰退痴呆模型小鼠学习记忆功能的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:将50只昆明种雌性小鼠随机分为模型组,雌激素对照组(0.3 mg·kg-1),菟丝子总黄酮低剂量组(35mg·kg-1),菟丝子总黄酮中剂量组(70 mg·kg-1)和菟丝子总黄酮高剂量组(140 mg·kg-1),采用背部去卵巢法切除双侧卵巢,另取10只小鼠作为假手术对照组,建立内分泌衰退小鼠模型,术后各治疗组进行灌胃给药治疗三个月,假手术组和模型组均给予0.9%生理盐水。给药结束后采用Morris水迷宫观察小鼠行为学变化;放射免疫法检测小鼠血液中雌激素的水平;HE染色光镜观察海马神经元病理形态;流式细胞仪检测小鼠海马神经细胞凋亡率和免疫印迹法检测海马区神经细胞凋亡相关蛋白(Bcl-2、Bax、Csapase-3)及Cyt-c蛋白的表达水平。结果:与假手术组相比,模型组小鼠学习记忆能力明显下降(P<0.01);血液中雌激素水平显著降低(P<0.01);海马神经细胞凋亡率显著增加(P<0.01);Cyt-c、Caspase-3、Bax蛋白表达水平大大增加(P<0.01),Bcl-2蛋白表达降低明显(P<0.01)。与模型组相比,TFSC各治疗组小鼠学习记忆能力显著增强(P<0.05,P<0.01,P<0.01);血液中雌激素水平上升显著(P<0.05,P<0.01,P<0.01);小鼠海马区神经细胞凋亡率明显下降(P<0.05,P<0.01,P<0.01);同时Cyt-c、Caspase-3、Bax蛋白表达水平均大大降低,Bcl-2蛋白表达均明显增加(P<0.05,P<0.05,P<0.01)。结论:TFSC可上调脑细胞中Bcl-2蛋白的表达水平,抑制Bax、Caspase-3和Cyt-c蛋白的表达量,进而增强神经元的可塑性和营养性,以防止神经细胞从内源性线粒体途径丢失或凋亡,进一步改善内分泌衰退型痴呆小鼠的学习记忆能力。TFSC可能是通过促进或增强下丘脑-脑垂体-性腺轴功能,从而达到增加雌激素水平和改善内分泌系统功能的目的。 彭申明 陈勤 陈逸青 叶海燕 王亭关键词:菟丝子总黄酮 学习记忆 睾丸组织移植对内分泌衰退小鼠学习记忆损害的改善作用 2015年 目的研究睾丸组织移植对内分泌衰退小鼠学习记忆损害的改善作用,并探讨其可能的作用机制。方法将40只昆明种雄性小鼠用随机数字表法分为假手术组、去势组、雄激素组和移植组,每组10只。切除小鼠双侧睾丸,以建立去势小鼠模型;移植组将同种小鼠皋丸组织块植入去势小鼠背部皮下肌肉层;雄激素组小鼠灌胃给予雄激素,剂量为30mg/kg,治疗3个月;其他组给予等量生理盐水。90d后,ELISA法测量各组小鼠内分泌水平;Morris水迷宫观察小鼠行为学变化;HE染色观察海马CA1区形态学改变;蛋白免疫印迹检测小鼠脑内雄激素受体和凋亡相关蛋白,即B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcb2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9(caspase-9)的表达。结果假手术组小鼠血清睾丸酮为(50.50±11.41)nmol/L,去势组为(15.50±2.84)nmol/L,雄激素组为(41.504-10.01)nmol/L,移植组为(38.00±9.78)nmol/L。与去势组相比较,移植组小鼠血清睾丸酮水平较高(P〈0.01);移植组小鼠逃逸潜伏期缩短,游泳路程明显减少,穿越平台次数大幅度增加(P〈0.01);移植组海马CAl区神经元形态结构有所改善,且Bax、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase-9)蛋白表达水平明显减少(P〈0.01),雄激素受体和Bcl-2蛋白表达量显著上升(P〈0.01)。结论睾丸组织移植可能是通过分泌内源性睾丸酮,结合脑内雄激素受体,调控神经元凋亡相关基因的表达,上调Bcl-2蛋白水平,降低Bax、caspase-3和caspase-9蛋白的表达量,抑制大脑神经元凋亡,进而改善学习记忆能力。 王亭 陈勤关键词:睾丸 睾丸切除术 记忆 睾丸酮 阿魏酸对蛛网膜下腔出血模型大鼠脑干组织和基底动脉细胞凋亡的影响 被引量:2 2015年 目的:探讨阿魏酸对蛛网膜下腔出血(SAH)大鼠脑干组织神经细胞和基底动脉细胞凋亡的影响。方法:将50只雄性SD大鼠随机分为假手术组、SAH模型组,阿魏酸低(20 mg·kg-1)、中(40 mg·kg-1)和高(80 mg·kg-1)剂量组,采用枕大池内新鲜自体动脉血二次注入法建立大鼠蛛网膜下腔出血模型,术后各治疗组灌胃给药7 d,假手术组和模型组均给予等体积生理盐水。分别采用TUNEL技术和免疫组化法观察脑干组织神经细胞凋亡和基底动脉细胞中caspase-3的表达。结果:与假手术对照组比较,SAH大鼠脑干组织中神经细胞凋亡阳性率明显升高(P<0.01),基底动脉血管内皮细胞和平滑肌细胞中caspase-3表达显著增加(P<0.01),而SAH大鼠灌胃服用阿魏酸7 d后,阿魏酸低、中和高剂量组(20,40,80 mg·kg-1)大鼠脑干组织中神经细胞凋亡率均显著降低(P<0.05,P<0.01,P<0.01),动脉基底血管内皮细胞和平滑肌细胞中caspase-3阳性表达率明显降低。结论:阿魏酸通过抑制脑干组织和基底动脉细胞中凋亡相关基因的表达,从而达到对SAH大鼠脑功能的保护作用。 余剑萍 刘颖 陈勤 黄炎 徐雪婷关键词:阿魏酸 蛛网膜下腔出血 大鼠模型 脑干组织 细胞凋亡 烧伤膏对小鼠皮肤烫伤创面愈合的修复作用研究 被引量:11 2017年 目的:探讨烧伤膏对烫伤小鼠皮肤创面修复的可能作用机制。方法:将50只小鼠随机分为5组:正常组、模型组,烧伤膏高、中、低剂量组。除正常组和模型组外,烧伤膏实验组小鼠每天外涂烧伤膏治疗,连用15天。治疗结束后,采用Masson染色技术检测各组小鼠皮肤厚度及细胞病理形态;采用生化法检测皮肤中羟脯氨酸(Hyp)含量;采用ELISA技术检测皮肤中的TNF-α,IL-1β、Collagen I、EGF和TGF-β1的含量。结果:与正常组相比,模型组小鼠皮肤烫伤创面可见表皮细胞脱落,结构模糊,细胞变性坏死,表皮和真皮厚度明显减少,胶原纤维变薄,排列紊乱无序,呈断裂状;烧伤后创面局部组织中Hyp、TNF-α、IL-1β的含量显著升高(P<0.01,P<0.01,P<0.01),而EGF、TGF-β1和Collagen I含量均明显减少(P<0.01,P<0.01,P<0.01),而应用烧伤膏治疗15天后,上述各项实验指标明显得到改善。结论:烧伤膏抑制创面早期感染,减少胶原蛋白的分解和促进后期创面修复的作用可能与抑制炎性细胞因子和增加皮肤相关生长因子表达的作用机制有关。 邬涛 刘颖 陈勤关键词:烧伤膏 皮肤创面修复 细胞因子 阿魏酸对痴呆小鼠脑内胶质细胞活化与炎性细胞因子表达的影响 被引量:11 2018年 目的:探究阿魏酸(FA)对阿尔茨海默病(AD)模型小鼠脑内炎症与胶质细胞活化及细胞因子表达的影响,揭示阿魏酸对小鼠大脑的保护作用及其机制。方法:将50只昆明种小鼠随机分为假手术组、AD模型组、FA低、中和高3个剂量组。采用脑定位向小鼠右侧海马CA1区注射1μL Aβ1-40建立AD模型,造模成功后第3天开始给药,阿魏酸低、中、高剂量组分别按20.0、40.0、80.0mg·kg-1剂量灌胃,假手术与模型组灌胃等体积生理盐水,用药时间为30 d。实验结束后,处死动物,剖取各组小鼠大脑,采用免疫荧光方法观察大脑皮层区GFAP的表达,用ELISA法测定脑组织中IL-1β、IL-6和TNF-α含量。结果:与假手术组相比,AD模型组小鼠大脑皮层区GFAP阳性细胞表达明显增多(P<0.01),且大脑组织中IL-1β、IL-6和TNF-α含量显著升高(P<0.01、P<0.01、P<0.01);与模型组相比,阿魏酸3个剂量组小鼠皮层区域GFAP阳性细胞表达均明显减少(P<0.01),且大脑组织中IL-1β、IL-6和TNF-α含量也相应地减少(P<0.01、P<0.01、P<0.01)。结论:阿魏酸可能是通过抑制Aβ1-40对神经细胞的毒性和诱导小胶质细胞活化,使得胶质细胞合成的炎性细胞因子含量减少,进而减轻痴呆大脑组织中炎症的形成,从而达到治疗或改善AD患者的临床症状的目的。 孟锐 陈逸青 陈勤关键词:阿魏酸 胶质纤维酸性蛋白 桔梗皂苷对慢性支气管炎小鼠气道重塑的干预作用研究 被引量:10 2013年 探讨桔梗皂苷(kikyosaponin,简称KS)对慢支小鼠气道重塑的干预作用机制.将50只健康小鼠分成正常对照组,模型组和桔梗皂苷低、中、高剂量组,除正常组外,其余4组动物均采用烟熏加浓氨水吸入法建立慢支模型,然后分别用药物进行治疗.实验结束后,取各组小鼠肺组织进行石蜡制片,苏木精-伊红(HE)染色分析气管管壁厚度变化,Masson染色分析肺组织胶原沉积,采用Image-Pro Plus 6.0图像分析软件测量总管壁厚度(WAt/Pbm)、内壁厚度(WAi/Pbm)、平滑肌厚度(WAm/Pbm)以代表气道重塑指标;生化法检测肺组织中羟脯氨酸(Hyp)含量;免疫组织化学染色法观察MMP-9在肺组织中的表达;蛋白印迹术分析MMP-9和TIMP-1在肺组织中的表达水平.HE染色显示,模型组肺组织中支气管明显狭窄,管腔及肺泡中含有大量炎性分泌物,且气道重塑的三项指标均异常增高;免疫组化和三色法显示,模型组小鼠支气管和肺泡细胞中有大量的MMP-9表达,且有胶原蛋白增加明显,生化检测发现模型组小鼠肺组织中Hyp含量亦异常升高,且MMP-9和TIMP-1表达水平升高显著,与正常对照组相比,差异十分显著(P<0.01).在连续用药30 d后,与模型组相比,桔梗皂苷各剂量组能明显抑制慢支小鼠支气管胶原纤维增生,改善气道重塑各项指标;减少MMP-9和TIMP-1表达水平,使气管重塑得到显著的减轻(P<0.05,P<0.01,P<0.01).结果显示,桔梗皂苷可明显减轻慢支小鼠气道重塑的病理改变,其干预机制可能是通过清除慢支小鼠肺组织中的炎性因子和自由基的含量,同时又能抑制MMP-9和TIMP-1的表达,从而达到减少胶原蛋白的沉积以减轻气管狭窄而达到逆转气道重塑之目的. 陈勤 朱敏 李杨 谢华 张尧生关键词:桔梗皂苷 气道重塑 基质金属蛋白酶9 组织金属蛋白酶抑制剂1 桔梗的药理作用研究新进展 被引量:51 2015年 中药桔梗为桔梗科植物桔梗(Platycodon grandiflorum(Jacq.)A.DC.)的根。中医认为,本品性味苦、辛、平,归肺经。有宣肺祛痰、排脓消痈之功,适用于咳嗽痰多,或咯痰不爽、胸膈满闷、咽痛嘶哑及肺痈胸痛、咳吐脓血、痰黄腥臭等。桔梗是临床上常用的止咳化痰平喘中药之一。除治疗慢性支气管炎和哮喘外,桔梗还被广泛用于慢性咽喉炎、感冒、音哑声带息肉、鼻窦炎、肺梗塞、肺脓肿、肺心病、郁证等治疗。 金欣 陈勤关键词:桔梗 药理作用 远志神经系统药理作用研究进展 被引量:32 2015年 现代药理研究表明,远志有增强学习记忆、抗痴呆、抗衰老、抗氧化、镇静、抗惊厥、抗抑郁、祛痰镇咳、抑菌抗炎、抗诱变、保护心脑血管等多种药理活性。我们对远志的神经系统药理活性及相关的作用机制进行了系统的总结,以期为远志的药理实验研究提供思路与方法,为其进一步深入研究和开发利用提供参考。 徐雪婷 陈勤关键词:远志 镇静催眠 抗神经细胞凋亡 抗痴呆 淫羊藿总黄酮增强双侧卵巢摘除模型小鼠学习记忆功能的作用 被引量:6 2017年 研究淫羊藿总黄酮(TFE)对双侧卵巢摘除模型小鼠学习记忆功能的影响,并探讨其可能的作用机制.将50只昆明种雌性小鼠随机分为模型对照组,雌激素对照组(0.3 mg·kg-1),淫羊藿总黄酮(40、80、160mg·kg-1)3个剂量组,采用背部切除双侧卵巢,另取10只小鼠作为假手术对照组,建立卵巢功能减退小鼠模型,术后各治疗组进行灌胃给药治疗3个月,假手术组和模型对照组均给予0.9%NaCl.给药结束后采用Morris水迷宫观察小鼠行为学变化;生化法和放射免疫法分别测定脑组织中AChE活性和ChAT活性;放射免疫法检测小鼠血液中雌激素的水平;HE染色光镜观察海马神经元病理形态.实验结果显示:与假手术组相比,模型对照组小鼠学习记忆能力、ChAT活性、血清雌激素水平和皮层及海马区神经细胞数量均显著下降,而脑组织中AChE活性明显升高;与模型对照组相比,TFE 40、80、160mg·kg-1剂量组各组小鼠学习记忆能力均显著增强;小鼠脑组织AChE活性下降明显,而ChAT活性却显著增加,血液中雌激素水平上升显著.TFE可能是通过升高血中雌激素水平,增强乙酰胆碱(ACh)合成酶ChAT的活性,抑制ACh水解酶AChE活性,提高大脑中神经递质乙酰胆碱的含量,延缓和改善内分泌系统和大脑胆碱能系统功能,从而促进卵巢去势小鼠学习记忆能力的提高. 陈勤 陈逸青 刘金翔 管称长关键词:学习记忆 乙酰胆碱