国家科技重大专项(2012ZXl0001-003)
- 作品数：2 被引量：11H指数：1
- 相关作者：刘升杜红吴锋耀卢祥婵陈德喜更多>>
- 相关机构：南宁市第四人民医院首都医科大学附属北京佑安医院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项广西卫生厅科研项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 对比艾滋病与肺结核合并重症肺炎行机械通气患者的病原分布及耐药性分析被引量：11
- 2015年
- 目的:探讨艾滋病合并重症肺炎的病原分布特点及耐药性,为临床治疗艾滋病合并重症肺炎提供依据。方法:应用回顾性分析方法,选择2012年1月-2014年1月期间在我院住院的重症肺炎患者156例,按感染HIV或肺结核将患者分为A、B 2组,每组各78例,A组为艾滋病合并重症肺炎患者,B组为肺结核合并重症肺炎患者,检测156例重症肺炎并行有创机械通气患者的致病菌及对抗菌药物的耐药率。结果:分离出196株病原菌,其中痰标本分离出140株,占71.4%株,其余分别分离自血液、胸腔积液、肺穿刺组织学标本。A组134株病原菌中:真菌感染54株,革兰阴性杆菌34株(其中14株为ESBL表型阳性菌,4株ESBL表型阳性菌为泛耐药菌株),革兰阳性菌15株(2株MRSA,2株MRSE),结核分支杆菌16株,巨细胞病毒14株,46例病例为2种以上病原感染;B组62株病原菌中:革兰阴性菌25株(其中4株为ESBL表型阳性菌,2株ESBL表型阳性菌为泛耐药菌株)、结核分枝杆菌20株、真菌11株、革兰阳性菌6株(1株MRSA),16例为2种以上病原感染。结论:艾滋病合并重症肺炎感染病原菌以革兰阴性杆菌为主,常合并2种或上2种多种病原菌感染,与肺结核合并重症肺炎患者比较,耐药现象明显。药敏试验结果可以为临床用药提供一定参考。
- 杜红吴锋耀刘升卢祥婵
- 关键词：艾滋病肺结核重症肺炎有创机械通气
- 人类免疫缺陷病毒-1整合酶区标准突变株真核表达载体的构建及其应用
- 2014年
- 目的构建整合酶区标准突变株真核表达载体，并进行初步功能验证，为HIV-1表型耐药研究提供技术方法。方法采用点突变的方法，以质粒pNL4-3．Luc．R-E为模板，扩增整合酶区片段（含突变位点Y143、Q148），经过BamHI和XhoI双酶切，通过T4DNA连接酶将纯化的PCR产物与经过BglⅡ和XhoI双酶切的pcDNA6．2-LTRgagpolSl连接，命名为pcDNA6．2-LTRgagpol，经过GatewayTM技术的BP／LR反应，将LTRgagpol片段重组到pNL4-3-attR，构成整合酶区标准突变质粒。在聚乙烯亚胺（PEI）转染试剂介导下，与水泡性口膜炎病毒的外壳糖蛋白质粒共转染HEK293细胞，得到HIV-1假病毒，应用整合酶抑制剂拉替拉韦与野生株假病毒进行表型耐药比较，将制备的病毒效价按4：1的比例感染HEK293细胞，同时加入拉替拉韦，终浓度为1μmol／L，感染48h后测荧光素酶报告基因。样本间抑制率比较采用单因素方差分析。结果带有整合酶区主要突变位点的HIV-l标准耐药株（pNL4-3-Q148R、pNL4-3-Y143H）构建成功。应用1μmol／L拉替拉韦进行表型耐药检测时，野生型病毒对拉替拉韦最为敏感，报告基因数值平均为1．72×10^3，Y143H耐药株（1．18×10。）和Q148R耐药株（2．82×10。）对拉替拉韦表现为耐药，对三者相对荧光素酶单位取对数值做统计学分析，野生株与Y143H耐药株相比差异有统计学意义（F=38．800，P=0．025），野生株与Q148R耐药株相比差异有统计学意义（F=174．355，P=0．006）。Y143H耐药株与Q148R耐药株相比，Q148R耐药株对拉替拉韦敏感性更低，差异具有统计学意义（F=22．551，P=0．042）。结论成功构建了带有整合酶区主要突变位点的HIV一1标准耐药株载体，并成功表达，为研究临床HIV-1标本表型耐药典定了基础。
- 徐树莹乔录新徐萌袁霖李庆丁渭石英陈德喜
- 关键词：HIV-1HIV整合酶抑制剂点突变病毒
