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多途径将骨髓间充质干细胞制备成类β细胞的体外实验研究: 2011年; 目的通过诱导法和转基因法将小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)制备成类β细胞。方法在体外分离、培养小鼠BMSCs,运用细胞因子诱导剂诱导和共培养诱导,将BMSCs诱导分化为类β细胞,通过逆转录病毒载体将外源性胰岛素基因转入小鼠BMSCs,使其表达外源性胰岛素基因;获得分泌胰岛素的类β细胞;通过腺病毒载体将PDX-1、NeuroD1及MafA基因转导入小鼠BMSCs,刺激内源性的胰岛素基因的表达,制备类β细胞,比较四种途径制备类β细胞的效果。结果四种方法均能诱导出类β细胞,均有胰岛素分泌,但诱导法和转三基因法制备出的类β细胞产量均较低,转胰岛素基因制备的类β细胞效率高,但对葡萄糖刺激无反应。结论多细胞因子诱导法和转三基因法制备的类β细胞在功能上更加接近β细胞,但需提高制备效率;转胰岛素基因法制备的类β细胞的功能有待进一步提高。; 陆玉华朱铭岩范向军朱沙俊王尧郭青松王志伟; 关键词：间充质干细胞 Β细胞体外小鼠

脱细胞技术及其在肝脏组织工程中的应用被引量：2: 2014年; 肝移植是目前治疗终末期肝病的唯一有效方法,供体来源短缺、器官排斥、长期使用免疫抑制剂导致的毒性以及继发感染等问题限制了其临床应用。以脱细胞方法为基础的肝脏组织工程在近年取得了较大发展,成为最有希望克服上述困难并发挥肝脏功能的有效方法。本文对脱细胞技术及其在肝脏组织工程中应用的最新进展进行了综述。; 邬迪王志伟; 关键词：终末期肝病免疫抑制剂供体来源器官排斥继发感染

自体肝内移植类β细胞对糖尿病Beagle犬的长期疗效及安全性研究被引量：2: 2011年; 目的探讨类β细胞自体肝内移植对糖尿病Beagle犬的长期疗效及安全性。方法通过逆转录病毒载体pMSCV将外源性胰岛素基因和EGFP基因转导入Beagle犬骨髓间充质干细胞(BMSCs),制备类β细胞。然后运用肝动脉介入技术,将类β细胞自体移植入糖尿病Beagle犬肝内,通过监测比较糖尿病Beagle犬移植前后各项生理指标,评价其是否具有长期稳定的治疗效果,同时进行肝脏生理功能及病理组织形态学检测,并对其生物安全性进行验证。结果自体移植类β细胞对糖尿病Beagle犬血糖、体质量、胰岛素水平均有明显改善(均P<0.01),且疗效持续80周以上;Beagle的肝功能正常(P>0.05),移植部位的肝脏未发现肿瘤形成,具有可靠的生物安全性。结论自体肝内移植类β细胞对Beagle犬糖尿病有长期疗效且具有相对可靠的生物安全性。; 陆玉华王志伟朱铭岩朱沙俊范向军王尧钱海鑫; 关键词：糖尿病 BEAGLE犬

多基因修饰骨髓间充质干细胞分化为胰岛素分泌细胞的实验观察被引量：4: 2011年; 目的观测胰岛素转录调控因子PDX-1、NeuroD1及MafA对小鼠骨髓间充质干细胞（mMSC）分化为胰岛素分泌细胞的作用。方法分离培养扩增mMSC，全基因合成转录因子PDX-1、NeuroDl和MafA的碱基序列，构建含目的基因的腺病毒载体并转染293A细胞包装成功后，分别或联合感染mMSC，体外培养分化后反转录聚合酶链反应（RT．PCR）检测胰岛素基因的转录，免疫荧光鉴定胰岛素蛋白表达，ELISA检测细胞上清液胰岛素的分泌情况。结果成功构建分别含目的基因的3种腺病毒载体，导入转录调控因子的mMSC启动胰岛素基因转录，体外培养分化后可见胞质内有胰岛素合成，3种转录因子联合作用的mMSC经葡萄糖刺激后培养液上清胰岛素浓度为（112．84±9．67）mU／L，而未受染mMSC细胞上清液为（1．60±0．22）mU／L，二组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论转录因子PDX-1、NeuroD1和MafA修饰的mMSC能启动内源性胰岛素基因转录，获得显著产胰岛素功能。; 郭青松朱铭岩范向军陆玉华王雷王志伟; 关键词：胰岛素转录因子 Β细胞骨髓间充质干细胞

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国家自然科学基金(81070654)