江苏省自然科学基金(BK2006517)
- 作品数：4 被引量：49H指数：4
- 相关作者：赵明文李玉祥陈军丁一新朱芬更多>>
- 相关机构：南京农业大学更多>>
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- 灵芝三萜高产菌株原生质体紫外诱变选育被引量：27
- 2008年
- 对灵芝(Ganoderma lucidum)HG菌株进行原生质体紫外诱变处理,经过初筛和复筛,获得了生长速度、菌丝干重和三萜含量明显高于出发菌株的9株诱变株;通过10次PDA斜面继代培养、液体培养以及栽培试验筛选,获得了菌丝干重和三萜含量稳定提高的诱变株UV-3,该菌株在栽培袋中的菌丝生长速率及子实体中三萜含量分别比出发菌株高58.6%和29.4%。SRAP-PCR结果表明,诱变株UV-3与出发菌株相比,DNA指纹图谱发生了明显改变。
- 朱芬陈军师亮李玉祥陈孝赵明文
- 关键词：灵芝紫外诱变三萜SRAP-PCR
- 灵芝lz8基因的克隆和原核表达及LZ-8蛋白的免疫印迹检测被引量：7
- 2006年
- 根据已报道的lz8基因序列设计引物,以灵芝基因组DNA为模板,PCR扩增获得lz8基因。构建了原核表达载体pET30a-lz8,转化原核表达宿主菌RosettaDE3,IPTG诱导融合蛋白表达,并用Ni-NTA亲和层析柱对LZ-8蛋白进行分离纯化。将纯化的LZ-8蛋白用Freund佐剂乳化后注射到新西兰白兔体内,经数次加强免疫后采血分离抗血清,并以抗血清为探针建立了LZ-8蛋白的免疫印迹法定性检测方法。
- 丁一新赵明文
- 关键词：异源表达
- SEFA-PCR法克隆灵芝鲨烯合酶基因启动子及其序列分析被引量：12
- 2006年
- 鲨烯合酶是灵芝三萜生物合成的关键酶,灵芝鲨烯合酶基因的表达和活性的高低决定了灵芝中三萜含量的高低。根据已经获得的灵芝鲨烯合酶全长cDNA序列设计一对专一引物,通过PCR扩增得到了灵芝鲨烯合酶基因的基因组全长,序列长1984bp,含有3个内含子。根据其基因组序列设计引物,采用SEFA-PCR的方法,以总DNA为模板,克隆了灵芝鲨烯合酶基因的启动子序列,长1042bp。序列分析发现灵芝鲨烯合酶基因启动子中没有明显的TATA和CAAT框,但是含有CCAAT-bindingfactor、GATA-1、GC-box、TFⅡD等重要的转录因子的结合位点,以及在人和酿酒酵母鲨烯合酶基因启动子中发现的甾醇调节相关的顺式调控元件。
- 李娜王世明陈军李玉祥赵明文
- 关键词：灵芝三萜生物合成转录调控
- 灵芝漆酶基因Cu2+诱导特性研究及其启动子的克隆与序列分析
- 本文以Cu为诱导物,检测灵芝漆酶同工酶基因的转录特性。研究发现:灵芝漆酶基因在Cu的作用下表达量出现明显差异,其中以发酵液中添加3.0 mmol·LCu、诱导时间为6天时,漆酶基因的mRNA表达量最高。根据GenBank...
- 欧阳翔吴婧丁一新李玉祥赵明文
- 关键词：漆酶半定量RT-PCR转录调控
- 文献传递
- 灵芝漆酶基因转录Cu^(2+)诱导特性及其启动子的克隆与序列分析被引量：5
- 2009年
- 以Cu2+为诱导物检测了灵芝漆酶同工酶基因的转录特性,并对其启动子进行了克隆及序列分析。研究发现:灵芝漆酶基因在Cu2+的作用下表达量出现明显差异,其中以在发酵液中添加3.0 mmol.L-1Cu2+、诱导时间为6 d时,漆酶基因的mRNA表达量最高。根据GenBank中已报道的灵芝漆酶基因的序列信息,经PCR扩增获得了灵芝漆酶5′端长879bp的基因特异序列,进而通过self-formed adaptor PCR(SEFA-PCR)方法,扩增得到灵芝漆酶基因起始密码子上游长832bp的启动子序列。分析表明,该启动子区域除分布有TATA-box、CAAT-box及GC-box等基本的转录起始元件外,还存在多个潜在的顺式作用元件序列位点,包括4个MRE元件、4个STRE元件、11个HSE元件和5个氮因子结合位点等。
- 欧阳翔吴婧丁一新李玉祥赵明文
- 关键词：ADAPTORPCR转录调控
- SEFA-PCR法克隆灵芝鲨烯合酶基因启动子及其序列分析
- 鲨烯合酶是灵芝三萜生物合成的关键酶,灵芝鲨烯合酶基因的表达和活性的高低决定了灵芝中三萜含量的高低。根据已经获得的灵芝鲨烯合酶全长cDNA序列设计一对专一引物,通过PCR扩增得到了灵芝鲨烯合酶基因的基因组全长,序列长198...
- 李娜王世明陈军李玉祥赵明文
- 关键词：灵芝三萜生物合成转录调控
- 文献传递
