国家自然科学基金(81070656)
- 作品数：2 被引量：8H指数：2
- 相关作者：沈雅辰贾璐邢静丁颖任伟更多>>
- 相关机构：南京医科大学南京大学福建医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 胰腺十二指肠同源异型盒-1、神经源性分化因子-1及肌腱膜纤维肉瘤癌基因同系物A三基因修饰小鼠诱导多潜能干细胞分化为胰岛素分泌细胞的研究被引量：2
- 2014年
- 目的 观察胰岛素转录关键调控因子胰腺十二指肠同源异型盒-1（PDX-1）、神经源性分化因子-1（NeuroD1）及肌腱膜纤维肉瘤癌基因同系物A（MafA）对小鼠诱导多潜能干细胞（iPS）分化为胰岛素分泌细胞的作用。方法 重组腺病毒Ad-mPDX-1-IRES-绿色荧光蛋白（GFP）、Ad-mNeuroD1-IRES-GFP、Ad-mMafA-IRES-GFP联合转染小鼠iPS细胞,体外培养后逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测胰岛β细胞功能基因表达,免疫荧光检测胰岛素蛋白表达及定位,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测不同糖浓度下胰岛素的分泌量。将胰岛素分泌细胞移植到糖尿病小鼠肝脏,免疫组织化学检测其在体内胰岛素的表达,葡萄糖耐量试验及空腹血糖监测评估移植细胞在糖尿病小鼠体内的功能发挥。结果 三基因转染的小鼠iPS细胞能分化为胰岛素分泌细胞,RT-PCR结果显示其胰岛β细胞功能基因的表达与小鼠胰岛β细胞株MIN6相似,免疫荧光检测见细胞内有胰岛素合成,ELISA检测结果显示细胞对不同浓度葡萄糖有较好的反应性。当葡萄糖浓度为30 mmol/L,胰岛素释放量最高为（0.309 3±0.017 9）ng。免疫组织化学染色显示移植细胞注射区域的肝实质内可见相对集中的棕黄色染色,表明移植细胞有胰岛素分泌。糖耐量试验及空腹血糖监测显示移植细胞能够控制糖尿病小鼠的血糖水平,在体内发挥良好的治疗作用。结论 胰岛素转录关键调控因子PDX-1、NeuroD1和MafA三基因能使小鼠iPS细胞分化为具有显著胰岛素合成和分泌能力的胰岛素分泌细胞,在体内发挥一定的治疗作用。
- 王尧王志伟
- 关键词：胰岛素分泌细胞
- 高尿酸对胰岛β细胞生存与功能的影响被引量：6
- 2013年
- 目的探讨高尿酸对胰岛β细胞生存及功能的影响。方法采用免疫荧光染色方法检测正常小鼠(A组)和高尿酸小鼠(B组)胰岛形态及胰岛素水平变化。采用CCK-8方法观察尿酸浓度为0mg/dl(C组)、5mg/dl(D组)和15mg/dl(E组)大鼠胰岛细胞系INS-1细胞活力。采用ELISA法检测尿酸浓度为0mg/dl(F组)、15mg/dl(G组)小鼠分离的胰岛胰岛素分泌量及储藏量变化。结果与A组比较,B组小鼠胰岛面积明显缩小,胰岛素水平降低(P<0.05)。与C组比较,D组、E组INS-1细胞活力呈剂量依赖性显著降低(P<0.05)。与F组比较,G组细胞胰岛素的分泌水平和储存水平均显著降低(P<0.05和P<0.01)。结论尿酸对胰岛β细胞有直接损伤作用。
- 贾璐邢静丁颖任伟郑舒静沈雅辰史旭辉郭万华苏东明
- 关键词：高尿酸血症胰岛Β细胞
