重庆市自然科学基金(CSTC2009BB5170)
- 作品数：15 被引量：18H指数：3
- 相关作者：袁伟顾翔蔡婷宋锐周小清更多>>
- 相关机构：第三军医大学西南医院第三军医大学附属西南医院重庆大学更多>>
- 发文基金：重庆市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 内吞相关蛋白Myosin Ⅵ/Disabled-2在小鼠耳蜗毛细胞的表达及年龄相关性变化的研究被引量：1
- 2015年
- 目的:研究不同年龄小鼠耳蜗毛细胞内吞相关蛋白MyosinⅥ和Disabled-2(Dab2)的表达及分布特点。方法:分别选取出生后2周、5周、9周及16月龄的昆明小鼠各10只,采用免疫荧光标记联合激光共聚焦显微镜扫描耳蜗基底膜铺片,观察MyosinⅥ及Dab2蛋白的表达定位,通过荧光定量逆转录PCR测定并比较不同年龄组小鼠耳蜗2种蛋白mRNA的表达水平。结果:MyosinⅥ及Dab2蛋白在内外毛细胞均有表达,支持细胞未见表达,且内毛细胞2种蛋白均存在局部高表达的亚细胞区域。比较不同年龄组MyosinⅥ荧光染色图像后发现,2周龄和16月龄小鼠荧光强度均低于5周龄和9周龄小鼠。比较不同年龄组小鼠2种蛋白mRNA表达后发现,2周龄小鼠mRNA相对表达水平均低于9周龄小鼠,差异有统计学意义(P<0.01),5周龄及16月龄组小鼠分别与9周龄小鼠相比,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:调控网格蛋白介导内吞过程的MyosinⅥ及Dab2蛋白表达于内外毛细胞,内毛细胞顶区表皮板及附近胞质可能是这一过程的主要部位。随着年龄的增长,MyosinⅥ及Dab2蛋白的表达可能会发生改变,网格蛋白介导内吞过程效率可能因此相继发生变化,内毛细胞功能损伤可能与此有关。
- 陈知己顾翔蔡婷宋锐周小清袁伟
- 关键词：内毛细胞
- 突触内吞关键蛋白Dynamin的研究进展
- 2014年
- 囊泡循环为突触的基本生理功能,涉及到多个环节的参与,囊泡回收是整个突触囊泡循环的基础。研究表明,网格蛋白介导的内吞作用是囊泡回收的主要途径,Dynamin(发动蛋白)在此过程中发挥重要作用。Dynamin是一个分子质量约为100 kD的GTP酶,它在网格蛋白介导的内吞过程中发挥"剪刀"的作用,将网格蛋白包被小窝与质膜分离。研究发现癲痫、阿尔茨海默病、中央核肌病等多种神经性疾病与Dynamin相关。本文从Dynamin的结构入手,简要论述其功能、表达调控及相关疾病的研究进展。
- 蔡婷袁伟
- 关键词：突触DYNAMIN内吞作用
- 突触内吞关键蛋白Dynamin在小鼠耳蜗内毛细胞中的表达研究被引量：4
- 2014年
- 目的研究生理情况下Dynamin各亚型在小鼠耳蜗内毛细胞(IHC)的表达分布特点,为探讨其在毛细胞内可能发挥的生理功能以及与听信号传导的关系做铺垫。方法取成年小鼠耳蜗基底膜行免疫荧光染色,激光共聚焦显微镜观察Dynamin各亚型表达及定位分布情况。结果 Dynamin各亚型在小鼠耳蜗内毛细胞中均有表达。其中,Dyna-min-1表达于整个内毛细胞内,Dynamin-2点状分布在内毛细胞胞质,Dynamin-3高表达于内毛细胞核下近螺旋神经节区域。结论网格蛋白介导内吞过程是毛细胞内吞作用的重要机制,作为该过程中的关键蛋白,Dynamin各亚型在耳蜗内毛细胞中均有表达,提示Dynamin在内毛细胞中可能发挥着重要的生理功能。
- 蔡婷袁伟
- 关键词：内吞免疫荧光DYNAMIN
- 非常规肌球蛋白6与耳聋的关系
- 2014年
- 非常规肌球蛋白为细胞内一类蛋白超家族，其中的多个蛋白基因表达失常将会导致内耳毛细胞功能障碍，进而出现感音神经性聋。非常规肌球蛋白6的主要功能涉及胞内物质锚定及转运过程。不断革新的分子结构和功能研究理论使得研究者们能够提出肌球蛋白6在内耳毛细胞中的不同作用机制。本文概括了肌球蛋白6及编码基因MYO6的研究进展及其与耳聋的关系，并阐述了其在内耳毛细胞囊泡内吞转运过程中的作用机制，以期为听力损失防治提供参考。
- 陈知己袁伟
- 关键词：听觉丧失
- 对乙酰氨基酚致小鼠听觉损伤的实验研究被引量：1
- 2014年
- 目的:研究对乙酰氨基酚对小鼠听觉的影响。方法:健康7周龄C57小鼠40只,雌雄不分,随机分为4组:对乙酰氨基酚低剂量组(150mg/kg)、中剂量组(300mg/kg)、高剂量组(600mg/kg)及空白对照组(2ml生理盐水)。每组10只。观察每组于喂药第0、2、4、9天ABR反应阈,通过免疫荧光法观测耳蜗基膜毛细胞形态学改变,用高效液相色谱法测定小鼠耳蜗内淋巴液中对乙酰氨基酚浓度。结果:对乙酰氨基酚灌胃30min后,检测小鼠耳蜗内淋巴中对乙酰氨基酚的浓度,内淋巴中药物浓度与灌服剂量相关。对乙酰氨基酚各组随给药时间延长ABR听阈增高,中、高剂量组给药后9d的平均阈值分别为(44.75±16)dB、(50.00±11.00)dB,与对照组比较差异均有统计学意义(均P<0.05);随着灌服时间的延长,对乙酰氨基酚各组的免疫荧光镜显示内、外毛细胞出现不同程度的缺失。结论:对乙酰氨基酚可通过血迷路屏障进入内耳,服用一定剂量的对乙酰氨基酚可造成小鼠听力损伤。
- 陈林骆晓琴陈小宏张学渊袁伟
- 关键词：对乙酰氨基酚毛细胞听力损伤
- 低剂量顺铂对小鼠耳蜗内毛细胞形态及otoferlin蛋白的影响被引量：2
- 2014年
- 目的:建立稳定有效的低剂量顺铂损伤听觉模型,探讨顺铂造成听功能损伤的机制。方法:将C57小鼠随机分为7组,分别为正常组,不同剂量、不同时间损伤实验组,每组8只。通过小鼠听性脑干反应(ABR)阈值测量、AgNO3毛细胞形态染色、免疫荧光法、RT-PCR测定基膜底回内毛细胞otoferlin蛋白的表达等方式检测顺铂对耳蜗内毛细胞形态及otoferlin蛋白的影响。结果:在同一时间点,用药4d后,1.5mg/kg和3.0mg/kg实验组较正常组小鼠ABR阈值明显升高,用药7d的各实验组ABR阈值较正常组均明显升高。同一剂量下,0.75mg/kg×7d组较0.75mg/kg×4d组阈值明显增高,其余剂量无明显时间差异。实验组中3.0mg/kg实验组蛋白表达均降低,1.5mg/kg实验组与正常组无差异。3.0mg/kg×7d组内毛细胞形态改变最明显,但在各组均未缺失。结论:低剂量顺铂可造成听功能损伤,其损伤机制很可能与内毛细胞的损伤及otoferlin蛋白有关。
- 孙颖蒋晓君陈小宏袁伟
- 关键词：顺铂内毛细胞听性脑干反应
- 衔接蛋白AP-2在不同发育时期小鼠耳蜗毛细胞中的表达被引量：1
- 2015年
- 目的通过检测不同发育阶段小鼠耳蜗毛细胞衔接蛋白AP-2蛋白的表达,初步探讨其在听觉发生、形成中的作用。方法选用出生后7日(P7)、15日(P15)、35日(P35)及16月龄小鼠各20只,分别代表新生小鼠、听觉发育阶段小鼠、听觉发育成熟小鼠及老年小鼠,对其进行ABR检测,用免疫荧光标记技术结合激光共聚焦显微镜观察各发育阶段小鼠耳蜗AP-2蛋白的定位与表达,用qRT-PCR技术检测小鼠耳蜗AP-2基因mRNA的表达。结果 P15、P35及16月龄小鼠ABR反应阈分别为18.67±1.21、13.83±1.47、37.83±7.68dB nHL,P7组小鼠未引出反应波形。在小鼠内耳发育不同阶段均有不同程度的AP-2蛋白表达,主要定位于耳蜗内毛细胞胞浆,集中表达于内毛细胞基底部与带状突触靠近传入神经元区域,P7、P15、P35及16月龄组小鼠耳蜗AP-2蛋白荧光染色密度值分别为190.91±17.27、494.06±27.63、838.41±38.23和682.65±72.22;AP-2mRNA相对表达量分别为0.53±0.09、1.03±0.02、1.00±0.09和1.03±0.06;与新生小鼠相比较,随小鼠听觉的产生和形成,耳蜗AP-2蛋白表达水平逐渐升高(P<0.01),免疫荧光染色提示老年性聋小鼠AP-2蛋白在内毛细胞的表达量较P35小鼠减少(P<0.05),但qRT-PCR分析AP-2基因mRNA的表达水平与成熟小鼠(P15)差异无统计学意义(P>0.05)。结论在小鼠听觉发育成熟阶段,随小鼠日龄增加耳蜗AP-2蛋白表达逐渐增强,提示AP-2蛋白的表达水平可能与听觉的发生、形成和维持密切相关。
- 顾翔陈知己蔡婷宋锐周小清袁伟
- 关键词：内毛细胞年龄相关性听力损失小鼠
- 对乙酰氨基酚致听力损伤的研究进展被引量：1
- 2014年
- 听力损伤是一种常见的疾病，世界卫生组织（W HO）的世界疾病排列表中，听力损伤名列第15位。众多听力损伤的患者中，药物所致的听力损伤占有相当大的部分。对乙酰氨基酚是一种非抗炎解热镇痛药，被广泛应用于发热，轻中度疼痛。近年来越来越多的流行病学研究表明，使用一定剂量的对乙酰氨基酚能引起听力受损。为进一步了解对乙酰氨基酚引起听力损伤的机制，预防和减少因使用对乙酰氨基酚所致的药物性耳聋，本文对国内外近些年报道的对乙酰氨基酚致听力损伤的相关文献进行整理、总结。
- 陈林张学渊袁伟
- 关键词：对乙酰氨基酚听力损伤世界卫生组织药物性耳聋中度疼痛听力受损
- 衔接蛋白AP-2蛋白在小鼠耳蜗中的表达及意义被引量：3
- 2015年
- 目的:研究衔接蛋白AP-2在小鼠耳蜗中的定位与表达,探讨AP-2蛋白与内毛细胞胞吞的相关性。方法:选择健康成年C57BL/6J小鼠,应用免疫荧光标记技术结合激光共聚焦显微镜观察AP-2蛋白在其耳蜗毛细胞的定位与表达。结果:AP-2蛋白主要定位于小鼠耳蜗内毛细胞细胞质,集中表达于内毛细胞基底部与带状突触靠近传入神经元区域。结论:AP-2蛋白在成年小鼠耳蜗中主要表达于内毛细胞突触活化部位,可能与内毛细胞突触囊泡的内吞作用相关,为深入研究AP-2蛋白在内耳听觉生理和病理机制中的作用奠定了基础。
- 顾翔宋锐陈知己袁伟
- 关键词：内吞内毛细胞
- AP-2蛋白调控网格蛋白介导突触囊泡胞吞的研究进展被引量：1
- 2015年
- 神经元间的信息传递依赖于神经递质的释放,这一过程离不开正常有效的囊泡循环机制,突触囊泡循环是调控突触囊泡水平和维持神经递质释放的基础。囊泡回收则是循环过程中保证囊泡从突触前膜回收至胞内,参与新一轮囊泡形成和再生的重要保障。网格蛋白介导的内吞是突触囊泡回收的主要途径,衔接蛋白AP-2(adaptin-2)是参与这一内吞过程不同时期的关键蛋白,其通过绑定不同蛋白分子分别从结构和动力的层面参与了囊泡回收过程,AP-2对网格蛋白介导的突触囊泡胞吞过程具有重要意义。本文结合国内外最新研究报道,简要综述了AP-2的结构特点、分子基础、AP-2蛋白调控网格蛋白介导突触囊泡的胞吞及其与听力的关系。
- 顾翔袁伟
- 关键词：胞吞突触囊泡内毛细胞
