辽宁省博士科研启动基金(20081100)
- 作品数:3 被引量:8H指数:1
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- 相关机构:辽宁医学院附属第一医院辽宁医学院更多>>
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- BMP-2诱导肌源性干细胞转化为软骨样细胞的体外实验研究被引量:7
- 2009年
- 目的体外定向诱导大鼠肌源性干细胞(MDSCs)向软骨细胞转化,并对诱导细胞进行鉴定。方法用差速贴壁的方法对SD大鼠MDSCs进行分离和培养。用骨形态发生蛋白2(BMP2)将MDSCs进行诱导分化,9d后取出标本,行甲苯胺蓝染色检测软骨基质的分泌,免疫组织化学检测软骨特异性Ⅱ型胶原表达。RT-PCR检测Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖(aggrecan)的mRNA表达。结果5d后镜下见细胞形态由梭形向多边多角形转化。9d后诱导组甲苯胺蓝染色阳性,Ⅱ型胶原免疫组化检测阳性,RT-PCR检测Ⅱ型胶原和aggrecan mRNA呈阳性表达。结论BMP-2可诱导MDSC向软骨细胞转化。
- 梅晰凡袁亚江吕刚郭占鹏李全双
- 关键词:肌源性干细胞软骨细胞细胞分化
- 成肌干细胞在透明质酸凝胶载体中诱导分化为软骨细胞的研究被引量:1
- 2010年
- 目的探讨以透明质酸钠凝胶作为组织工程软骨载体、以成肌干细胞作为种子细胞诱导分化形成软骨细胞的可行性。方法体外分离培养兔成肌干细胞,采用结蛋白(Desmin)细胞化学染色进行鉴定,并观察兔成肌干细胞在不同浓度透明质酸钠凝胶中的生长状态。在5%透明质酸钠凝胶中以骨形态发生蛋白2(BMP-2)诱导兔成肌干细胞,倒置相差显微镜观察细胞生长情况,并通过甲苯胺蓝染色、免疫细胞化学及RT-PCR技术对诱导后的细胞进行鉴定。结果原代培养兔成肌干细胞Desmin细胞化学染色呈阳性表达,且在不同浓度透明质酸钠凝胶中均生长良好。BMP-2诱导培养1d后,成肌干细胞即开始于透明质酸钠凝胶中伸展生长,诱导培养10d后,细胞形态由梭形向多边多角形转化,甲苯胺蓝染色阳性,Ⅱ型胶原免疫荧光检测阳性,RT-PCR检测Ⅱ型胶原和聚焦蛋白聚糖mRNA呈阳性表达。结论兔成肌干细胞可在适当浓度BMP-2诱导下分化为软骨样细胞,透明质酸钠凝胶可作为软骨组织工程的良好载体。
- 李全双梅晰凡郭占鹏王滢丽秦书俭
- 关键词:成肌细胞骨形态发生蛋白质类透明质酸细胞分化
- 透明质酸凝胶中肌源性干细胞与透明软骨联合培养的实验研究
- 2011年
- 目的探讨肌源性干细胞与软骨细胞混和培养体外成软骨的可行性。方法分离培养、扩增传代兔MDSCs及关节软骨细胞,二者按一定比例混和,6×1010/L密度接种于5%浓度的透明质酸凝胶为共培养组,以相同密度的单纯MDSCs和单纯软骨细胞作为阴性与阳性对照。倒置相差显微镜下观察,10 d后行甲苯胺蓝染色和Ⅱ型胶原免疫细胞化学检测,RT-PCR检测Ⅱ型胶原和aggrecan的mRNA表达。结果 5 d后镜下见共培养组MDSCs形态由梭形向多边多角形转化,10 d后细胞甲苯胺蓝染色和Ⅱ型胶原免疫组织化学检测与阳性对照组相同,RT-PCR检测Ⅱ型胶原和aggrecan mRNA呈阳性表达。阴性对照组在体外培养过程中未分化为软骨细胞。结论软骨微环境在MDSCs成软骨分化过程中具有重要作用,软骨细胞能有效地诱导MDSCs向软骨样细胞分化,透明质酸凝胶可以作为软骨组织工程的良好载体。
- 沈兆亮梅晰凡袁亚江李全双郭占鹏张赫
- 关键词:肌源性干细胞软骨样细胞透明质酸凝胶