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贵州省狂犬病病毒流行毒株与疫苗毒株糖蛋白基因差异研究: 2012年; 目的分析贵州省狂犬病病毒流行毒株与疫苗毒株的糖蛋白基因（G基因）差异，为狂犬病疫苗研制及有效防控措施的制定提供科学依据。方法以RT-PCR扩增贵州省近几年人和犬狂犬病病毒阳性脑组织标本G基因序列，对扩增产物进行序列测定后采用生物信息学软件对序列与疫苗株G基因序列进行比较分析。结果贵州省狂犬病病毒阳性标本经RT-PCR扩增、测序与拼接后得到8株狂犬病病毒G基因全长序列，与我国常用狂犬病疫苗毒株在核苷酸和推导的氨基酸水平上的同源性分别为82．0％～94．1％和87．6％-97．5％，与人用疫苗株中的CTN株G基因核苷酸和氨基酸序列同源性最高（分别为87．0％～94．1％和93．7．％～97．5％），而在兽用疫苗株中与Flury株的核苷酸和氨基酸同源性最高（分别为83．9％～84．6％和91．1％～93．0％）。在所测定序列中以来自贵州省2005年的GZ09与人用疫苗毒株CTN和动物用疫苗株Flury株G同源性最高，而以2010年的GZ30与人用疫苗毒株CTN和动物用疫苗株Flury株G基因同源性最低。系统进化树分析显示，本次所测定的序列和9株疫苗株与狂犬病病毒基因1—7型中的基因1型代表毒株聚类在同一分支，与疫苗毒株中的CTN亲缘进化关系最近，而与其他疫苗株相对较远，所测定序列中以2005年的GZ09与CTN疫苗株同源性最近，而其他序列与CTN毒株的亲缘进化关系相对较远。结论本研究从狂犬病病毒G基因水平证明贵州省狂犬病病毒流行毒株与常用的疫苗株同属狂犬病病毒基因1型，与人用疫苗株中的CTN毒株及兽用疫苗株中的Flury株差异最小，且随着时间的推移贵州省狂犬病病毒流行毒株与疫苗毒株G基因的差异越来越大，该研究结果将为狂犬病疫苗研制及有效防控措施的制定提供科学依据。; 李世军余春王定明唐青陶晓燕李浩庄妍周敬祝王月田克诚唐光鹏; 关键词：狂犬病病毒糖蛋白基因疫苗毒株

2005--2010年贵州省狂犬病病毒与疫苗株核蛋白遗传差异分析被引量：1: 2012年; 目的分析2005--2010年贵州省狂犬病病毒（RABV）与疫苗株核蛋白基因的差异。方法对贵州省不同地区2005--2010年收集的4份狂犬病患者标本和28份狂犬病病犬脑组织标本进行分析。采用直接免疫荧光法（DFA）和巢式RT—PCR检测，测定病毒N基因序列全长，同时，根据同源性及系统进化树比较，分析贵州省近年流行的RABV与GenBank数据库收录的RABV疫苗株N基因序列之间的差异。结果经检测，21份病犬脑组织和4份患者标本RABV抗原和核酸阳性。经N基因序列测定拼接均得到长度为1353bp的核苷酸序列。同源性分析显示，25株RABV毒株基因序列与GenBank数据库收录的RABV基因1型毒株的N基因核苷酸和氨基酸序列同源性较高，分别为89％～100％和98％-100％；与疫苗株核苷酸和氨基酸序列同源性分别为86％～95％和96％-100％，在兽用疫苗株中，与HEP．Flury株N基因核苷酸和氨基酸的同源性最高（分别为88％-89％和98％-99％），而在人用疫苗株中，与CTN株的核苷酸和氨基酸同源性最高（分别为86％～100％和96％-100％）。N基因系统进化树分析显示，25株毒株与RABV基因1型毒株和疫苗株CTN株单独构成一群，与人用疫苗株CTN的差异最小。结论贵州省2005--2010年流行的RABV与兽用疫苗株HEP—Flury和人用疫苗株CTN在N基因水平的差异最小。; 李世军余春王定明唐青陶晓燕李浩庄妍周敬祝王月田克诚唐光鹏; 关键词：狂犬病病毒狂犬病疫苗核蛋白类

贵州省一例犬伤致人患狂犬病的病原学及病毒基因分析: 2011年; 目的从病原学角度证实贵州省凯里市一起犬伤人致儿童死亡病例为狂犬病所致，了解狂犬病病毒的基因特征。方法采用dFA实验初步检测犬和患儿脑组织狂犬病病毒抗原，以RT-nestedPCR检测狂犬病病毒核酸，测定狂犬病病毒N基因全长序列，根据同源性比较及系统进化树进行分子流行病学分析。结果dFA与RT-nestedPCR检测显示犬脑和人脑组织标本均为狂犬病病毒抗原和核酸阳性。经测序拼接均得到长度为1353bp的核苷酸序列，同源性分析显示犬脑组织（GZD）和人脑组织（GZH）检出的狂犬病病毒N基因核苷酸与推导的氨基酸同源性均为100％，与我国各省已报道的狂犬病病毒基因1型流行毒株及疫苗株核苷酸和氨基酸序列同源性分别为88．4％～99．6％和98．2％-100％，与我省往年报道的毒株N基因核苷酸和推到的氨基酸同源性最高。此外，在与疫苗株的比较中，与CNT株的核苷酸和氨基酸同源性最高。进化树分析显示犬脑和人脑组织标本狂犬病病毒N基因亲缘进化关很近，同属于基因1型狂犬病病毒。结论从病原学和病毒分子生物学证实了贵州省一起犬伤人致儿童死亡病例为狂犬病所致，其病原为狂犬病病毒基因1型，与疫苗毒株中的CNT毒株的亲缘进化关系最近，该起病例可能为我省境内传播，因此，应加强我省狂犬病疫区的防制工作。; 李世军余春王定明唐青陶晓燕李浩庄妍周敬祝王月田克诚唐光鹏; 关键词：N基因进化树

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贵州省科学技术基金(J[2011]2279)

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