您的位置： 专家智库 > >

国家自然科学基金(31260553)

作品数：10 被引量：30H指数：4
相关作者：卢晟盛朱向星许惠艳黄勇孙如玉更多>>
相关机构：广西大学贵港市人民医院更多>>
发文基金：国家自然科学基金国家重点实验室开放基金国家教育部博士点基金更多>>
相关领域：生物学农业科学更多>>

文献类型

  • 10篇中文期刊文章

领域

  • 5篇生物学
  • 5篇农业科学

主题

  • 5篇胚胎
  • 5篇小型猪
  • 5篇基因
  • 5篇核移植
  • 5篇巴马小型猪
  • 4篇体细胞
  • 4篇胚胎发育
  • 4篇广西巴马小型...
  • 3篇体细胞核
  • 3篇体细胞核移植
  • 3篇转基因
  • 3篇转染
  • 3篇细胞核移植
  • 2篇水牛
  • 2篇克隆
  • 2篇基因修饰
  • 1篇单精子
  • 1篇单精子注射
  • 1篇电刺激采精
  • 1篇电压

机构

  • 10篇广西大学
  • 1篇贵港市人民医...

作者

  • 10篇卢晟盛
  • 6篇朱向星
  • 3篇许惠艳
  • 2篇卢克焕
  • 2篇杨小淦
  • 2篇孙如玉
  • 2篇陆阳清
  • 2篇黄勇
  • 1篇曾永联
  • 1篇肖鹏
  • 1篇苏克同
  • 1篇黄高波
  • 1篇燕志光
  • 1篇崔静辉
  • 1篇郝朝亮
  • 1篇权利
  • 1篇梁明明
  • 1篇胡林林
  • 1篇王雪芳

传媒

  • 8篇基因组学与应...
  • 1篇广西畜牧兽医
  • 1篇南方农业学报

年份

  • 1篇2016
  • 2篇2015
  • 4篇2014
  • 3篇2013
共 10 条 记 录，以下是 1-10
全选 清除 导出
排序方式：
利用胞浆内单精子注射技术研究水牛与猪的种间受精:阶段性报告
2016年
胞浆内单精子注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)是一种研究种间受精机制的有效工具。本文旨在采用ICSI方法来构建水牛-猪种间显微授精卵,探讨了水牛-猪种间显微授精卵早期发育并检验了几种提高其发育潜力的方法。研究表明:(1)经ICSI方法制备的水牛-猪种间显微授精卵可以形成双原核,并能够发育到囊胚期;(2)PZM-3相对于SOF而言要更适于水牛-猪种间ICSI胚胎的培养;(3)用甲基化酶抑制剂5-azacytidine(5-Aza C)对水牛精子进行处理可以在一定程度上提高水牛-猪种间ICSI卵的原核形成率,但并不能提高其发育潜力。综上,本研究可为进一步探索水牛-猪种间受精机制及精卵互作奠定基础。
全守能朱向星聂骏宇肖鹏王雪芳许惠艳杨小淦陆阳清卢克焕卢晟盛
关键词：水牛卵母细胞精子
广西巴马小型猪转基因克隆胚胎的体外生产被引量：11
2015年
广西巴马小型猪是一种原产于广西巴马县的小型猪品种,非常适于实验动物化,进行广西巴马小型猪的基因修饰研究,可以显著提升其在生物医学研究中的利用价值。当前最有效的构建转基因猪方法是体细胞核移植,但因用于体细胞核移植生物供体细胞在经受转基因操作后活性显著下降,从而制约了转基因克隆猪的生产效率。Xfect polymer是一种新型转染试剂,具有细胞毒性低和操作简便等优点,已被证明适用于多种真核细胞的转基因操作。本研究旨在利用体细胞核移植技术来检验经Xfect polymer转染制备的广西巴马小型猪转基因体细胞,可否支持猪克隆胚胎完全的体外发育的能力,以期为将来生产模拟人类疾病的转基因克隆广西巴马小型猪奠定基础。
朱向星全守能卢晟盛
关键词：广西巴马小型猪胚胎体细胞核移植基因修饰转染
电转染法电压优化与广西巴马小型猪转基因克隆胚胎的生产被引量：8
2014年
本试验旨在优化电转染电压并构建转基因体细胞,为生产转基因广西巴马小型猪打下技术储备。以新生广西巴马小型猪肾脏成纤维细胞和pEGFP-N1为材料、以细胞存活率和转染率为电转染效率评价指标,筛选最佳电压,然后用优化电压进行电转染并经G418抗性筛选获得转基因体细胞系,通过体细胞核移植技术获得转基因克隆胚胎。本研究筛选出最佳电压为120 V,用优化电压进行电转染并成功构建表达GFP的转基因细胞,最后通过体细胞核移植成功获得表达GFP的转基因克隆胚胎。结果表明优化的电转染电压可以高效构建广西巴马小型猪转基因体细胞,并可通过体细胞核移植生产转基因克隆胚胎。
黄勇朱向星全守能卢晟盛
关键词：电转染转基因广西巴马小型猪克隆
供体细胞、去核方法以及TSA处理对巴马小型猪手工克隆胚胎发育的影响被引量：1
2013年
本文用不同的供体细胞、去核方法以及TSA处理浓度研究其对巴马小型猪手工克隆胚发育的影响,试验结果发现:克隆胚的发育率在相同代次的不同供体细胞之间,极体定向和化学辅助去核法之间均无显著性差异(p>0.05);TSA浓度为40nmol/L时克隆胚的囊胚率最高,但与对照组相比无显著性差异(p>0.05)。这说明三种供体细胞均能支持巴马小型猪克隆胚的早期发育,化学辅助和极体定向去核法均为较好的去核方法。
苏克同燕志光孙如玉卢晟盛
关键词：去核方法TSA巴马小型猪
Oxamflatin处理对水牛-猪异种体细胞核移植胚胎早期发育的影响
2014年
为了探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂(Oxamflatin)处理对水牛-猪异种体细胞核移植(i SCNT)胚胎早期发育的影响,分别观察了培养在不同浓度Oxamflatin(0.00μM,0.05μM,0.50μM,5.00μM)和不同处理时间(0h,12h,18h,24h)对水牛-猪i SCNT胚胎早期发育的影响。结果显示,在PZM-3中添加不同浓度的Oxamflatin处理12h后,i SCNT胚胎分裂率在各个处理组和对照组之间差异不显著(p>0.05),囊胚率在各个处理组和对照组之间也无显著差异(p>0.05);随后用Oxamflatin处理不同时间后,i SCNT胚胎分裂率和囊胚率分别在各个处理组和对照组之间差异不显著(p>0.05)。结果表明,在本试验条件下Oxamflatin不能显著提高水牛-猪i SCNT胚胎发育的潜能。
崔静辉刘予娴全守能卢晟盛
关键词：异种体细胞核移植胚胎发育
非人灵长类动物电刺激采精与精液冷冻保存技术的利用现状被引量：1
2014年
辅助生殖技术在非人灵长类动物上有重要的应用价值,获得高品质精液是有效开展辅助生殖研究工作的基本前提。电刺激采精与精液冷冻保存技术是目前获得高品质非人灵长类动物精液的重要手段。本综述在广泛参阅国内外研究成果的基础上,对当前非人灵长类动物电刺激采精与精液冷冻保存技术的利用现状进行整理和论述,旨在为将来开展非人灵长类动物的辅助生殖技术研究提供参考。
朱向星卢晟盛
关键词：非人灵长类电刺激采精精液冷冻保存辅助生殖技术
巴马小型猪转基因克隆胚胎融合/激活条件的优化
2015年
本试验旨在建立一个适合于巴马小型猪转基因克隆胚胎生产的高效融合/激活体系,为生产足量的转基因克隆胚胎奠定基础。把h GFAP-Ds Red基因转入巴马小型猪肾脏成纤维细胞并以转基因细胞为供体核,构建重构胚胎,比较各组胚胎的发育能力,筛选出适合转基因克隆胚胎生产的融合/激活参数。试验结果表明,脉冲时程30μs、1次脉冲、场强1.5 k V/cm组,融合率、分裂率和囊胚率(87.32%,69.79%,21.74%)均显著(p<0.05)高于1.0 k V/cm组(78.63%,45.07%,9.65%)和2.0 k V/cm(63.87%,36.72%,5.49%);脉冲时程30μs时,融合率和囊胚率(81.92%,19.56%)均显著(p<0.05)高于20μs(69.19%,7.51%)和40μs(69.28%,6.51%);3次脉冲组的融合率、分裂率和囊胚率(63.32%,38.09%,5.49%)均显著(p<0.05)低于1次脉冲(81.92%,63.40%,22.15%)和2次脉冲组(81.59%,67.46%,12.97%)。本实验室条件下,最适合于转基因克隆猪胚胎生产的融合/激活参数是1.5 k V/cm、30μs和1次脉冲。
胡林林胡林林许惠艳陆阳清杨小淦卢克焕
关键词：广西巴马小型猪胚胎发育核移植转基因
食蟹猴—猪异种体细胞核移植胚胎的构建被引量：1
2013年
【目的】探索食蟹猴—猪异种核移植胚胎的发育能力,为食蟹猴异种核移植胚胎干细胞的构建奠定基础。【方法】以食蟹猴和猪胎儿的耳部成纤维细胞为供体,猪MII期去核卵母细胞为受体,构建异种核移植重构胚,并从核移植融合/激活方式、培养液两个方面进行优化。【结果】70枚食蟹猴—猪异种核移植胚胎中,有49枚分裂(70.0%),与猪同种核移植胚胎的分裂率(76.6%)无显著差异;使用微卫星引物D15S823对食蟹猴—猪异种核移植胚胎进行遗传学鉴定,均能扩增获得D15S823条带(350 bp);食蟹猴—猪异种核移植胚胎融合后1 h的染色体早熟凝集率(24.2%)显著低于猪同种核移植胚胎(44.7%)和猪孤雌激活胚胎(100.0%),通过使用无Ca2+融合液能够显著提高染色体早熟凝集率(48.2%);在PZM-3、HECM-10和HECM-10+10%FBS 3种培养液中,食蟹猴—猪异种核移植胚胎的分裂率无显著差异。【结论】食蟹猴体细胞核能够在猪MII期去核卵母细胞胞质中发生核重塑,并发育到8-细胞阶段。
梁明明权利黄高波孙如玉许惠艳卢晟盛
关键词：食蟹猴异种核移植胚胎发育
体细胞核移植技术在猪基因修饰中的应用被引量：12
2013年
基因修饰猪作为一种理想的动物模型已应用于生物医学研究。构建基因修饰猪的方法很多,包括原核注射、慢病毒转染、精子介导和体细胞核移植等,其中体细胞核移植具有显著优势,一直是构建基因修饰猪的重要方法。近几年,随着转座子、设计核酸酶等基因修饰新技术以及诱导性多能干细胞研究的不断进展,将进一步凸显体细胞核移植技术在基因修饰猪构建中的价值。本文比较了猪基因修饰的主要方法,并论述体细胞核移植技术在猪基因修饰中的优势、发展历程和最新应用等。
朱向星全守能黄勇卢晟盛
关键词：基因修饰体细胞核移植疾病模型
脂质体法构建广西巴马小型猪转基因体细胞及转基因克隆胚的生产被引量：12
2014年
脂质体法是一种传统的向哺乳动物细胞导入外源基因的方法,然而其转染效率受多种因素影响。本研究将从脂质体和质粒DNA量、转染暴露时间以及混合孵育时间等四方面进行探索,以寻找最佳的转染体系。试验结果表明最佳转染体系为:脂质体1.25μL、DNA 0.7μg、脂质体-DNA混合孵育0 min以及转染暴露6 h。随后我们用优化过的转染体系对新生广西巴马小型猪肾脏成纤维细胞进行转绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)操作,获得了(26.45±2.11)%的转染率,并以此为核供体经体细胞核移植技术成功构建表达GFP的广西巴马小型猪克隆胚胎,同时证实转基因克隆胚的体外发育能力比得上非转基因克隆胚。这为我们构建用于人类疾病研究的基因修饰广西巴马小型猪奠定了基础。
郝朝亮朱向星曾永联全守能卢晟盛
关键词：脂质体转染法转基因克隆广西巴马小型猪
全选 清除 导出
共1页<1>
聚类工具0