国家教育部博士点基金(20070183128)
- 作品数：2 被引量：4H指数：2
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- 小鼠分泌型内皮抑素原核表达载体pFLAG-ssEndostatin的构建被引量：2
- 2010年
- 目的构建带有小鼠分泌型内皮抑素(ssEndostatin)的原核表达载体pFLAG-ssEndostatin。方法利用分子生物学方法,采用Kpn I内切酶将ssEndostatin从pcDNA3.1-Egr1-ssEndostatin质粒上切下,然后连接到pFLAG表达载体上,构建成原核表达载体pFLAG-ssEndostatin,并对其进行PCR、酶切鉴定。结果经酶切、PCR鉴定,所构建的原核表达质粒pFLAG-ssEndostatin与预测的一致。结论成功地构建了带有分泌信号的内皮抑素原核表达载体pFLAG-ssEndo-statin,为进一步研究Endostatin在肿瘤治疗方面的作用奠定了基础。
- 杨志广刘林林苏清秀杨艳明邵国光
- 关键词：内皮抑素原核表达载体分泌型
- 短双歧杆菌携带内皮抑素和干扰素γ的特性及其抗小鼠肺癌的作用被引量：2
- 2011年
- 目的:以短双歧杆菌为载体,以内皮抑素(ES)和干扰素γ(IFNγ)为目的基因,探讨携带目的基因的短双歧杆菌在小鼠体内的分布特性及其抗小鼠肺癌的效果。方法:构建原核表达载体pNZ44-IFNγ及pNZ44-ssEndostatin,电穿孔法将质粒转入用3H-TdR标记的短双歧杆菌,筛选鉴定。制备荷瘤小鼠,实验分为对照组(Control)、双歧杆菌无质粒组(B-b)、双歧杆菌空质粒组(B-b-pNZ44)、双歧杆菌内皮抑素组(B-b-pNZ44-ssEndostatin)、双歧杆菌干扰素组(B-b-pNZ44-IFNγ)和双歧杆菌联合组(B-b-pNZ44-ssEndostatin+B-b-pNZ44-IFNγ),通过尾静脉注射和灌胃给予携带目的基因的短双歧杆菌。观察短双歧杆菌在小鼠体内的分布情况,以及移植瘤体积、小鼠免疫学指标和肿瘤间质微血管密度(IMVD)的变化。结果:成功构建了携带目的基因的短双歧杆菌。经尾静脉注射后,实验动物的心脏、肝脏、肺脏和肾脏中双歧杆菌逐步被清除,从第3天开始,各器官中放射活性较第1天明显降低(P<0.05);肿瘤组织的放射活性随时间延长逐渐增加,从第3天开始放射活性与第1天比较差异有统计学意义(P<0.05)。通过灌胃和尾静脉注射携带目的基因的短双歧杆菌,能抑制小鼠肺癌移植瘤的生长,并且增加CTL细胞活性、NK细胞活性和TNFα分泌活性,降低IMVD。结论:携带ES和IFNγ的短双歧杆菌能够靶向性地在肿瘤组织中定植,并通过免疫增强和抑制血管生成等机制起到抗肿瘤作用。
- 杨志广刘林林邵国光
- 关键词：双歧杆菌内皮抑素干扰素Γ基因疗法
