山东省自然科学基金(Y2002D07)
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 相关作者：葛银林薛美兰张金玉张晓蒋正尧更多>>
- 相关机构：青岛大学更多>>
- 发文基金：山东省自然科学基金国家留学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- n-6脂肪酸去饱和酶fat-1基因对神经元细胞凋亡的抑制作用被引量：1
- 2007年
- 将C.elegans n-6脂肪酸去饱和酶基因fat-1的cDNA插入到腺病毒的穿梭载体pAd-CMV中,并与骨架载体同源重组,构建腺病毒重组载体(Ad.GFP.fat1),通过包装细胞系(293)产生重组腺病毒,感染原代培养的大鼠皮层细胞.在显微镜下观察、细胞增殖试剂盒(MTT)和凋亡染色试剂盒分析fat-1基因对大鼠皮层细胞凋亡的影响,核糖核酸酶保护性分析,检测fat-1基因在大鼠皮层细胞内的表达,酶联免疫分析花生四烯酸类(Eicosanoids)前列腺素(Prostaglandin E2)的含量.结果表明,通过基因重组技术,得到预期的重组病毒;fat-1基因在原代培养的大鼠皮层细胞中能有效异源表达,2 d后,可检测到fat-1 mRNA的条带.与对照Ad.GFP细胞相比,fat-1基因明显抑制了大鼠皮层细胞因诱导产生的凋亡(35%),受保护细胞的前列腺素含量也明显地减少(30%).
- 张金玉葛银林薛美兰蒋正尧张晓
- 关键词：神经元细胞凋亡多不饱和脂肪酸基因治疗
- 胍变性人胎盘碱性磷酸酶复性的研究
- 2005年
- 目的:检测胍变性人胎盘碱性磷酸酶复性过程中活力与构象的变化,探讨其折叠机制。材料与方法:应用分光光度法测定复性酶活力,荧光法检测其内源荧光发射光谱。结果:盐酸胍变性平衡态酶用直接稀释法及空气氧气法进行复性,其最适复性条件是:胍稀释浓度0.5mol/L,温度4℃,复性液pH9.0,时间24小时。在此条件下,测得不同浓度盐酸胍变性酶经稀释复性后的酶活力及其内源荧光光谱显示:变性中间态酶复性后的酶活力及内源荧光光谱可恢复至天然态,而变性酶只能部分恢复,且随胍浓度的增加,恢复愈加困难,当胍浓度为6.0mol/L时,变性态酶经复性后的酶活力与内源荧光光谱则完全不能恢复。结论:变性中间态酶可完全复性,而变性态酶仅部分复性,且与复性条件有关。
- 葛银林李馨曾艳霞耿芳宋
- 关键词：碱性磷酸酶盐酸胍复性
