国家自然科学基金(30901822)
- 作品数：4 被引量：25H指数：3
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- 相关机构：南方医科大学中山大学聊城职业技术学院更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 去甲斑蝥素干扰HL-60肿瘤细胞周期及其机制研究被引量：4
- 2010年
- 目的明确去甲斑蝥素（norcantharidin,NCTD）对肿瘤细胞周期的影响,进一步阐明NCTD的抗肿瘤作用机制。方法体外培养HL-60细胞,NCTD作用后采用3H-TdR掺入实验检测DNA复制;流式细胞术检测细胞周期进程;Western blotting检测细胞周期调控蛋白Cdk1、Cyclin B1、Cdc 25c表达变化。结果不同浓度（16~128μmol/L）NCTD作用于HL-60细胞12 h后,DNA复制受到抑制,细胞周期出现明显的S期累积,并呈剂量依赖性趋势;同时观察到G2/M的阻滞,且调控G2/M周期进程的调节蛋白Cdk1、Cyclin B1及Cdc 25C蛋白表达下调。结论 NCTD可抑制HL-60细胞DNA复制、下调周期调控蛋白从而干扰肿瘤细胞的周期进程。
- 李金龙蔡于琛胡志明高基民冼励坚
- 关键词：去甲斑蝥素DNA复制HL-60细胞周期
- 去甲斑蝥素对肿瘤细胞DNA复制起始蛋白Cdc6的抑制作用被引量：15
- 2010年
- 目的本研究旨在明确去甲斑蝥素(Norcantharidin,NCTD)对肿瘤细胞DNA复制起始蛋白Cdc6的抑制作用。方法采用MTT法检测NCTD对多种肿瘤细胞,包括:HeLa、HepG2、Jurkat以及Ramos细胞增殖的抑制作用;采用Westernblotting检测NCTD对细胞Cdc6蛋白表达的影响;BrdU掺入实验检测NCTD对肿瘤细胞DNA复制的影响。结果 NCTD显著抑制上述4种肿瘤细胞的增殖,肿瘤细胞Cdc6蛋白被降解,DNA复制受到明显抑制。结论 NCTD可诱导多种肿瘤细胞Cdc6蛋白的降解并有效抑制肿瘤细胞的DNA复制及增殖,Cdc6蛋白可能是NCTD的一个有效抗肿瘤靶点。
- 李金龙蔡于琛胡志明高基民
- 关键词：去甲斑蝥素CDC6DNA复制
- 细胞分裂周期蛋白6:新的抗肿瘤靶点被引量：7
- 2013年
- 真核细胞中细胞分裂周期蛋白6(cell division cycle 6,Cdc6)是起始细胞DNA复制的必需蛋白,其主要功能是参与组装完成"复制前复合体(pre-replication complexes,pre-RC)"。近期的研究发现,Cdc6在调控细胞有丝分裂方面也具有重要作用。Cdc6介导基因组异常情况下ATR监测点信号的活化,从而阻止有丝分裂的提前进入。Cdc6还可抑制有丝分裂期CDK1的活性,促进有丝分裂滑脱。因此,Cdc6必然与细胞的恶性增殖及恶性转化密切相关,抑制Cdc6将会产生有效的抗肿瘤作用。该文总结了近年来的研究成果,阐述了Cdc6在肿瘤发生发展中的作用,重点讨论了Cdc6在调控有丝分裂中的作用,以及抑制Cdc6在抗肿瘤中的作用。
- 李金龙陈三三张春华胡志明
- 关键词：CDC6DNA复制
- 稳定表达Mcm6-GFP细胞株的建立
- 2010年
- 采用RT-PCR的方法扩增人Mcm6基因,克隆入真核表达载体pEGFP-N3,成功构建了pEGFP-Mcm6真核表达质粒,酶切及DNA测序证实了构建质粒序列的正确性。脂质体介导转染Hela细胞后,荧光显微镜可检测到绿色荧光信号,通过G418筛选最终获得了稳定表达的细胞株,Western blot验证了稳定表达细胞株中Mcm6-GFP融合蛋白的表达。本实验成功建立了稳定表达Mcm6-GFP融合蛋白的细胞株,为动态观察Mcm6细胞定位的变化,进一步研究抗肿瘤药物的作用机制提供了有效的分子工具。
- 李金龙蔡于琛胡志明高基民
- 关键词：GFP
