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排序方式：

传统发酵香肠中菌种的分子生物学鉴定被引量：4: 2015年; 为探究发酵香肠的微生物菌群的作用机理,利用传统的微生物学平板稀释分离法,分离出发酵香肠中酵母、大肠杆菌和乳酸菌等微生物,并提取其DNA,PCR扩增16S rDNA、ITS后测序,将测序结果与NCBI基因库中序列进行比对,MegAlign软件进行序列分析并构建系统发育树,结果表明,发酵香肠中富含德氏酵母、YSY1-6腐生葡萄球菌、德式乳酸乳杆菌亚种。; 李丙超胡卫东唐文才李兴玲钟强李再新张智; 关键词：发酵香肠 ITS 同源性比较

一株兔源耐药性肺炎克雷伯氏菌的分离与鉴定被引量：11: 2013年; 本试验旨在对从患呼吸道感染和腹泻的仔兔血液中分离的1株疑似病原菌进行鉴定。采用分离培养、镜检、生化检测、荚膜染色、16S rDNA序列测序、药敏试验和动物体内感染等方法,对该疑似菌进行了分析。结果显示,该疑似菌呈杆状、含有丰富的荚膜多糖,其16S rDNA序列与肺炎克雷伯氏菌标准菌株序列相似性达到99%,且对链霉素、庆大霉素、氨苄青霉素、硫酸庆大霉素、硫酸卡那霉素和氯霉素均表现出不同程度的显著抗性。腹腔注射该菌(109CFU/mL),仔兔全部死亡;而口腔灌喂,仔兔有较强的耐受性(无死亡)。结果表明,从患病仔兔血液中分离到1株肺炎克雷伯氏菌且具有致病性。; 张智李再新曾光菊李丙超胡卫东赵志平刘章琴陈欲云; 关键词：肺炎克雷伯氏菌耐药性

致龋性变形链球菌的分离及其卵黄抗体的抑龋作用被引量：2: 2017年; 目的筛选致龋性变形链球菌并研究其卵黄抗体的抑龋作用，以期为龋齿的防治提供参考。方法从四川省自贡市富顺县某幼儿园5～6岁的儿童龋病患者牙菌斑中分离变形链球菌菌株，并通过形态、生化和分子生物学方法鉴定菌株，分析菌株的血清型、产酸和黏附能力。以灭活变形链球菌为抗原免疫产蛋鸡，提取其鸡蛋特异性卵黄抗体（immunoglobulin Y，IgY）。用e型变形链球菌感染12只SD大鼠，待第16周大鼠形成稳定龋齿后分为两组，实验组大鼠（6只）饲料中添加特异性IgY，对照组大鼠（6只）饲料中添加普通IgY。继续饲喂、观察8周后处死大鼠，使用Keyes计分法评价大鼠的龋损程度。结果从儿童牙菌斑中分离出7株变形链球菌，其中c、e、f、k血清型分别有3、2、0和2株。所有菌株均表现出与UA159标准菌株相似的形态及生化特征，具有较强的产酸和黏附能力；但同为c型的菌株其产酸和黏附能力不同。应用e型变形链球菌感染大鼠16周后，其下颌牙齿均出现龋洞，给予特异性IgY治疗后，实验组大鼠Keyes计分分值[（16．4±2．0）分]显著低于对照组大鼠[（30．2±9．3）分]（P〈0．05）。结论本研究筛选得到的7株不同血清型变形链球菌菌株具有相似的形态和生化特性，但在产酸和黏附能力方面，即使是同一血清型也有显著差异；e型变形链球菌具有独立的致龋能力，应用抗变形链球菌IgY作为被动免疫治疗剂可有效抑制龋齿的发展。; 李兴玲张智李再新邓宁君曾波陈咏梅; 关键词：卵黄抗体

蛋黄中卵黄高磷蛋白的提取优化及其磷酸肽制备被引量：4: 2015年; 卵黄高磷蛋白是已知天然蛋白中含磷量最高的蛋白,经适宜蛋白酶水解后形成磷酸肽,该磷酸肽能够与Ca2+、Fe2+、Mg2+等二价金属离子结合形成可溶性络合物,抑制磷酸钙等非可溶性磷酸盐的形成,从而促进机体对钙、铁的吸收。本文主要探索了不同缓冲溶液、不同稀释程度、不同p H值等因素对卵黄高磷蛋白提取效果的影响,并在单因素实验的基础上采用正交试验,进一步优化了卵黄高磷蛋白的提取工艺。结果表明,应用10倍体积的0.05 M的p H 5.2的醋酸-醋酸钠溶液提取的卵黄高磷蛋白效果较好,每10 m L的卵黄可以提取约90mg的卵黄高磷蛋白。提取的卵黄高磷蛋白成品含磷量为7.2%,N/P比为3.9。经过进一步脱磷、酶解等处理制备了卵黄高磷蛋白磷酸肽,该磷酸肽能明显阻滞磷酸钙沉淀的形成,每100 mg能够结合9.1 mg的钙。本实验结果,为后续动物体内补钙功能实验及相关磷酸肽补钙制剂的研发奠定了基础。; 李再新梁仁明郑姣张伟赵雪箐曾妙文倩张智; 关键词：卵黄高磷蛋白

大肠杆菌微球包封效率及稳定性的研究: 2013年; 多聚物制备而成的微球是一种具有佐剂效应的疫苗控释系统,在疫苗研制中得到广泛应用。为改进大肠杆菌疫苗的制备质量,本文以天然高分子聚合物海藻酸钠和壳聚糖为材料,应用了三种不同制备微球的方法来制备大肠杆菌微球,观察微球的形态、粒径和稳定性,并测算其对大肠杆菌的包封率。结果表明,采用乳化-内部凝胶化法制备的大肠杆菌海藻酸钙-壳聚糖微球,圆整规则,粒径较小,包封率达到≈93.1%,具有良好的控释性能和稳定性,适于低温保存。; 张智李再新赵志平刘章琴陈欲云; 关键词：大肠杆菌乳化

变形链球菌gtf S、gbp B基因的串联表达及其卵黄抗体的制备被引量：1: 2019年; 目的:串联表达变形链球菌毒力基因gtfS、gbpB的重组融合蛋白,将其作为免疫抗原制备特异性卵黄抗体,并研究该卵黄抗体的免疫活性。方法:以变形链球菌标准菌株UA159的基因组为模板,通过PCR方法扩增gtfS的CAT区和gbpB的SYI区,以SOE-PCR方法将其串联成基因片段CAT-SYI。在限制性内切酶EcoRⅠ-HF和XhoⅠ及T4 DNA连接酶的作用下构建重组质粒pET32a-CAT-SYI,转化表达菌株E. coli BL21,用1 mmol/L IPTG诱导表达后超声破碎重组菌,将提取纯化的重组融合蛋白免疫产蛋鸡并从鸡蛋中提取卵黄抗体,利用ELISA、Western blot和斑点杂交分析该抗体的特异性和免疫活性。结果:经PCR、SOE-PCR成功扩增出约750 bp的串联基因CAT-SYI,SDS-PAGE检测结果表明其表达产物约50 kD,与目的蛋白大小符合。ELISA间接法测得卵黄抗体的效价可达1∶100 000以上,Western blot鉴定结果显示IgY的特异性,在相对分子量约为35 kD和70 kD处出现相应的条带,斑点杂交检测结果显示特异性卵黄抗体具有识别变形链球菌的能力。结论:制备的特异性卵黄抗体具有良好的抗变形链球菌免疫活性,为免疫防龋奠定了基础。; 张忠宝孙礼进曾波陈咏梅张智李再新; 关键词：变形链球菌卵黄抗体免疫活性

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四川省教育厅重点项目(12ZA088)

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