植物病虫害生物学国家重点实验室开放基金(SKL2012OP03)
- 作品数:3 被引量:11H指数:2
- 相关作者:孙洋谭永安柏立新肖留斌张永军更多>>
- 相关机构:江苏省农业科学院中国农业科学院植物保护研究所南京农业大学更多>>
- 发文基金:植物病虫害生物学国家重点实验室开放基金国家现代农业产业技术体系建设项目公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 绿盲蝽丝氨酸蛋白酶基因AlSP3的鉴定及表达谱分析被引量:4
- 2012年
- 从绿盲蝽成虫体内克隆了1个丝氨酸蛋白酶基因,命名为AlSP3(GenBank序列号JQ609681)。经序列分析,该基因开放阅读框长1 041 bp,编码346个氨基酸,预测分子量为3.872×104,理论等电点为9.35,N-末端疏水区包含有19个氨基酸组成的信号肽。蛋白质特征分析结果表明,该基因翻译后的蛋白质具有丝氨酸蛋白酶的典型特征。利用荧光定量PCR技术对绿盲蝽取食不同寄主植物后AlSP3基因的表达谱进行分析,结果表明:相对于其他寄主植物,雌成虫取食转Bt基因棉花后AlSP3基因的表达量最高,比对照上升了11.62倍,并显著高于取食常规棉(P<0.01);雌成虫取食常规棉后,AlSP3基因的表达量上升了6.42倍,仅次于取食Bt棉和豇豆,并显著高于取食其他寄主植物(P<0.01)。雄成虫取食常规棉后,AlSP3基因的表达水平仅次于取食蚕豆,上升了9.37倍,并显著高于取食Bt棉(P<0.01)。由此可见,AlSP3基因是绿盲蝽成虫取食常规棉后的重要消化酶基因,并对雌成虫适应取食Bt棉具有重要作用。
- 孙洋柏立新张永军肖留斌谭永安盛洋
- 关键词:绿盲蝽丝氨酸蛋白酶表达谱分析寄主BT棉
- 绿盲蝽丝氨酸蛋白酶基因AlSP4的克隆及取食不同寄主植物后的表达谱分析被引量:9
- 2012年
- 胰蛋白酶类和胰凝乳蛋白酶类丝氨酸蛋白酶是盲蝽科昆虫消化系统内重要的消化酶。为了更好地了解丝氨酸类蛋白酶在绿盲蝽Apolygus lucorum消化系统中的作用,本研究首次克隆了绿盲蝽丝氨酸蛋白酶基因AlSP4(GenBank登录号为JQ609682)。序列分析结果表明,该基因开放阅读框长999bp,编码332个氨基酸,预测分子量为36.84kDa,理论等电点为5.35,N末端疏水区包含有16个氨基酸组成的信号肽。蛋白特征分析表明,该基因翻译后的蛋白质具有丝氨酸蛋白酶的典型特征,即氨基酸序列中具有组氨酸(His)、天门冬氨酸(Asp)以及丝氨酸(Ser)残基组成的酶活性催化中心三元件;该基因翻译后还具有明显的胰蛋白酶前体的特征,即此基因具有信号肽、激活肽以及胰蛋白酶N末端保守的起始氨基酸序列(IVGG)。利用荧光定量PCR技术对绿盲蝽雌、雄成虫取食不同寄主植物后AlSP4的表达谱进行分析,结果表明:相对于其他寄主植物,雌成虫取食Bt棉后AlSP4的表达量最高,并显著高于取食常规棉后的表达量(P<0.01)。雄成虫取食茼蒿后AlSP4的表达量最高;雄成虫取食Bt棉后,AlSP4的表达水平仅次于取食茼蒿后的表达量,也显著高于取食常规棉后的表达量(P<0.01)。由此可见,AlSP4是绿盲蝽取食Bt棉后的重要消化酶基因,对绿盲蝽适应Bt棉取食具有重要作用。
- 孙洋柏立新张永军肖留斌谭永安吴国强
- 关键词:绿盲蝽丝氨酸蛋白酶表达谱分析寄主植物
- 不同温度影响下绿盲蝽丝氨酸蛋白酶基因AlSP3的表达谱分析被引量:2
- 2013年
- 利用荧光定量PCR技术,系统分析了不同温度处理下绿盲蝽成、若虫丝氨酸蛋白酶基因A1SP3的表达谱。结果表明:在24℃下,若虫各虫龄AISP3表达量差异未达到显著水平fP〉0.05).而雌虫交配前期与雄虫交配后期的A1SP3表达量分别达l龄若虫对照的19.71倍与7.16倍,显著高于其他时期。但在21~30℃内,4~5龄若虫AISP3的表达量随温度升高而上升,2~5龄若虫在30℃时AISP3的表达量均达最高;不同温度处理下,刚羽化、交配前的雌、雄成虫的A1SP3的表达量较24℃对照均显著升高(P〈0.01);而交配后的雌、雄成虫的表达量却是18℃下显著高于其他温度处理。此外,极端温度4℃与40℃诱导后,雌、雄成虫AISP3的表达量均显著高于24℃。绿盲蝽AISP3的表达谱综合分析表明,外在环境温度与绿盲蝽虫龄与性别因素均可显著影响绿盲蝽A1SP3的表达量(P〈0.01),并存在一定的互作效应。由此可见,AJSP3对于绿盲蝽雌成虫早期获取寄主营养具有重要作用,并且温度是影响AISP3表达的一个很重要的因素。
- 盛洋孙洋柏立新肖留斌谭永安
- 关键词:绿盲蝽丝氨酸蛋白酶表达谱分析温度