国家自然科学基金(30370788)
- 作品数：4 被引量：12H指数：3
- 相关作者：曹广文谭晓洁侯建国贺松琴余永伟更多>>
- 相关机构：第二军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部留学回国人员科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 免疫缺陷动物筛选人转移癌中动物非期望死亡原因分析
- 2007年
- 目的:阐明免疫缺陷动物筛选人转移癌组织过程中主要的非正常死亡原因,为人类肿瘤动物模型建立和筛选提供借鉴。方法:采用皮下、原位、肾包膜下移植等多种方法对267只BALB/c裸小鼠接种(或注射)人肾细胞癌、前列腺癌临床标本、DU-145细胞系,分析成瘤率、肝脏病变情况(临床表现、病理切片、死亡时间分布)等。结果:移植肾细胞癌标本的总成瘤率为21.7%(35/161),转移率为1.2%(2/161)。移植前列腺癌临床标本均未成瘤或发生转移;移植DU-145细胞系成瘤率为100%(20/20),转移率为25%(5/20)。肾细胞癌临床标本移植小鼠肝脏病变率为58.4%(94/161),前列腺癌临床标本移植小鼠肝脏病变率为43.4%(46/106),DU-145细胞系移植小鼠无1例肝脏病变发生。移植肾细胞癌、前列腺癌标本肝脏病变小鼠死亡高峰与小鼠总体死亡高峰趋势一致,均发生在每年的冬春季。结论:肝脏病变是造成动物非正常死亡的主要原因,严格控制SPF环境方可保证肿瘤动物模型的顺利建立。
- 谭晓洁贺松琴侯建国Daniele Martarelli余永伟曹广文
- 关键词：肿瘤移植肾细胞肝脏病变动物
- 基因组消减杂交技术筛选肾透明细胞癌转移相关甲基化基因被引量：3
- 2008年
- 目的:筛选能够早期诊断和预测肾透明细胞癌转移相关基因的甲基化生物标志。方法:应用本室从临床新鲜组织标本体外培养建立的低转移性和高转移性肾透明细胞癌细胞株.病理学鉴定后提取基因组DNA.应用3轮NotⅠ基因组消减杂交的方法富集差异甲基化序列,差异序列连接载体,转化宿主菌和α筛选后.选取40个序列进行测序。应用生物信息学分析确定启动子CpG岛甲基化序列,并对未知基因功能进行预测。结果:DNA测序后获得了27个单一克隆在高转移和低转移性肾透明细胞癌基因组中存在甲基化差异;其中5个序列具有CpG岛,其中2个对应于基因MYADM和LOC646024的启动子区。MYADM与血细胞成熟、干细胞再生有关;而LOC646024与NK细胞抗肿瘤相关的UL16结合蛋白1有85%的相似度。结论:本研究从不同转移能力的中国人肾透明细胞癌基因组中获得多种转移相关性的新甲基化序列.发现MYADM和LOC646024候选基因与肾癌转移相关。
- 孙浚雯常文军翟羽佳谭晓洁侯建国余永伟马立业曹广文
- 关键词：肾透明细胞癌肿瘤转移DNA甲基化
- 人肾细胞癌原位移植裸鼠模型的建立及转移相关基因表达分析被引量：3
- 2006年
- 目的:建立原位移植裸鼠模型,筛选同一标本来源的转移性和非转移性肾细胞癌(RCC)。方法:采用皮下移植法、细胞悬液原位注射法、肾周筋膜内法、组织块原位移植肾包膜下法对BALB/c裸小鼠接种(或注射)RCC组织块(或细胞悬液),观察各种方法的成瘤及转移情况,并采用免疫组化方法初步对比分析了VEGF、bFGF、P16、Bc l-2、C-m et在裸小鼠体内的转移性和非转移RCC的表达情况。结果:(1)组织块原位移植肾包膜下法成瘤率及转移率最高,分别为73.3%(11/15)、20%(3/15)。(2)与原发灶相比,转移灶中VEGF表达明显升高(P<0.05),C-m et表达明显降低(P<0.05),bFGF、Bc l-2、P16表达降低但无统计学差异(P>0.05)。结论:组织块原位移植肾包膜下法是切实有效的RCC转移模型制作方法。采用该法在裸鼠中获得了人转移性和非转移RCC,免疫组化分析证实了转移性RCC中新血管生成因子VEGF表达显著增加。
- 谭晓洁侯建国贺松琴常文军刘世建余永伟曹广文
- 关键词：肾细胞肿瘤转移基因表达
- 采用体外侵袭实验分离侵袭性人原代肾细胞癌细胞被引量：6
- 2006年
- 目的:体外分离肾细胞癌原代侵袭性和非侵袭性细胞。方法:消化法或植块法对32例临床新鲜肾细胞癌进行原代培养。在预实验确定铺胶浓度、消化回收时间的基础上,采用涂有M atrigel的Transwell对3例原代培养的肾细胞癌细胞进行体外侵袭实验,分离回收侵袭性和非侵袭性细胞。结果:(1)原代培养成功率为90.6%(29/32)。(2)以1.0 mg/m l、20μl/孔对Transwell铺胶,固定细胞悬液密度(5×105/m l),第5天消化回收细胞较为理想。非侵袭性细胞散在生长,侵袭性细胞多呈克隆样生长。侵袭性细胞倍增时间为36.1 h,非侵袭性细胞为50.6 h。结论:Transwell可体外快速分离及回收、培养不同侵袭性的肾癌原代细胞群。用原代肿瘤细胞进行体外侵袭实验代表性好,但难以突破肿瘤细胞的有限生存期。
- 谭晓洁侯建国贺松琴陈北川曹广文
- 关键词：肾细胞细胞分离
